DNA印迹法所需仪器试剂
仪器1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 材料电泳分离DNA的琼脂糖凝胶试剂1 酸变性液:0.25mol/L HCl, 用分析纯的盐酸12Mol/L稀释 2碱变性液,0.5mol/L NaOH,1.5mol/l NaCl pH13.1 3中和液,0.5mol/L Tris·HCl(pH7.5),1.5mol/L NaCl 4 20×SSC: 0.3mol/柠檬酸,3mol/L NaCl,pH7.0(配方见附录) 5 10×SSC和2×SSC 用双蒸馏水稀释20×SSC储存液......阅读全文
DNA印迹法所需仪器试剂
仪器1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 材料电泳分离DNA的琼脂糖凝胶试剂1 酸变性液:0.25mol/L HCl, 用分析纯的盐酸12Mol/L稀释 2碱变性
DNA印迹法所需的仪器试剂介绍
1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶
免疫印迹法试验所需试剂
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000
免疫印迹法所需试剂有哪些?
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000
蛋白质印迹法所需试剂有哪些?
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000
DNA印迹法的实验器材和试剂
器材 1、电热真空干燥箱 2、硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3、大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4、滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5、刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶 试剂 1、酸变性液:0.25mol/L HCl, 用
硫酸铵纯化法所需仪器和试剂
1.组织培养上清液、血清样品或腹水等 2. 硫酸铵( NH 4 ) SO 4 3. 饱和硫酸铵溶液( SAS ) 4. 蒸馏水 5. PBS( 含 0.2g /L 叠氮钠 ) 6. 透析袋 7. 超速离心机 8. pH 计 9. 磁力搅拌器
DNA印迹法的定义
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或
DNA-印迹法的概念
中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定 义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
电极法测电导率所需仪器和试剂
仪器①容量瓶:1000ml。②烧杯:50ml。③电导仪。④恒温水浴器。试剂标准氯化钾溶液C(KCl)=0.01000mol/L:称取0.7455g氯化钾,溶解于重蒸蒸馏水中(重蒸蒸馏水必须煮沸以除去水中溶解的CO2,放冷后使用),移入1000ml容量瓶,用水稀释至标线。
DNA-印迹法的技术特点
中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定 义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
DNA印迹法的实验步骤
注意注意,操作戴手套。凝胶处理1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变
DNA印迹法实验凝胶处理
1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。 2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变性,则凝胶中溴酚兰的颜
DNA印迹法的技术原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳
免疫印迹法试剂准备
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。 2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。 3、转膜缓冲液:甘氨酸2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容
速测卡法(纸片法)测定农药残留所需的仪器和试剂
试剂①速测卡:固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(广州天河绿洲生物化学研究中心)②pH7.5缓冲溶液:分别取15.0g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)与1.59g无水磷酸二氢钾(KH2PO4),用500mL蒸馏水溶解。仪器 常量天平,有条件时配备37℃±2℃恒温装置。
关于DNA印迹法的基本介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤
DNA印迹法的起源和原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳
气相色谱法检测氯乙烯所需仪器和试剂
仪器①具塞刻度管:5ml。②容量瓶:10ml。③气相色谱仪:其火焰离子化检测器。色谱柱:长3m、内径2mm玻璃柱,柱内填充GDX-502(80~100目)。④活性炭吸附采样管:可以购买或自己制作。试剂①二硫化碳:分析纯。②氯乙烯标准气:99.99%。
碘量法检测水中溶解氧所需仪器和试剂
碘量法需要准备250~300ml溶解氧瓶、25~50ml酸式滴定管、量筒、搅拌器和虹吸管、250ml锥形瓶、移液管等仪器。 试剂 (1)硫酸锰溶液:称取480 gAnSO·4H2O或364 gAnSO,·H2O溶于水,稀释至100ml。此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中,遇淀粉不得产生蓝色。
蛋白质印迹法所需样本的制备方法
1、单层贴壁细胞总蛋白的提取:(1)倒掉培养液,并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液(或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走)。(2)每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放轻轻摇动1min洗涤细胞,然后弃去洗液。重复以上操作两次,共洗细胞
Westernblot法实验所需仪器
伯乐生命bio-rad-Trans-Blot 转印槽是一种多功能仪器,适用于多种Westernblot法应用。功能和优点:能进行多胶转印多组参数灵活可设,可调节的电压设置(从30V的过夜转印到到 200 V的1 小时快速实验)。电极间距设置为8cm可用于标准转印,设置为4cm用于高强度转印。采用特级
DNA印迹法实验膜处理的介绍
1)剪下一张与凝胶面积相同的硝酸纤维素膜(NCP)或尼龙膜,NL,。注意NCP也要剪去一角且不可用手触摸,粘有油腻的膜不能被湿润,也不能结合DNA。同时剪8,10张与NCP等大的干净滤纸 2)将NCP与3,4张滤纸依次漂浮于盛有双蒸馏水的带盖方盘中,使水自然从NCP的下面向上浸润,待其完全浸湿
DNA印迹法的注意事项介绍
1、操作时戴手套,严禁用手接触凝胶和硝酸纤维素膜, 2、转移时,滤纸与膜、膜与凝胶、凝胶与滤纸桥之间均不能有气泡,否则影响DNA转移, 3、凝胶易碎,操作时应格外小心, 4、硝酸纤维素膜上的DNA固定非常重要,固定不好时DNA·在杂交过程中会脱落下来,烤膜温度过高,膜脆性增加,易碎, 5
DNA印迹法的基本原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以
蛋白质印迹法试剂准备
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。 2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。 3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定
免疫印迹法实验的试剂准备
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。 2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。 3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定
Western印迹法(试剂配制和操作步骤)
Western印迹法(试剂配制和操作步骤) 这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。 Western使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合
DNA体外转染试剂_如何准备转染所需的质粒DNA
转染效率受到诸多因素的影响,除了细胞、培养基和载体等影响因素外,另外一项非常重要的因素便是DNA的质量。为了比较不同厂家的转染效率,我们分别从三家不同的供应商购买了质粒制备试剂盒来制备pEGFP-N3质粒DNA,并通过不同的方法将制备的pEGFP-N3质粒转运至NIH-3T3细胞。pEGFP-N3质
间接法测抗体所需试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4荧光标记的抗人球蛋白抗体:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释。搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的纱布垫)荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等。