DNA印迹法实验膜处理的介绍
1)剪下一张与凝胶面积相同的硝酸纤维素膜(NCP)或尼龙膜,NL,。注意NCP也要剪去一角且不可用手触摸,粘有油腻的膜不能被湿润,也不能结合DNA。同时剪8,10张与NCP等大的干净滤纸 2)将NCP与3,4张滤纸依次漂浮于盛有双蒸馏水的带盖方盘中,使水自然从NCP的下面向上浸润,待其完全浸湿后,连同浸湿的滤纸一起浸入于转移液中浸泡5,10分钟。· 注意,在蒸馏水中如NCP表面有气泡时,可将其放在65水浴中浸泡几分中,仍有气泡或不能完全被湿润(膜上有白色或黄色斑块)则不能用于转移。......阅读全文
DNA印迹法实验膜处理的介绍
1)剪下一张与凝胶面积相同的硝酸纤维素膜(NCP)或尼龙膜,NL,。注意NCP也要剪去一角且不可用手触摸,粘有油腻的膜不能被湿润,也不能结合DNA。同时剪8,10张与NCP等大的干净滤纸 2)将NCP与3,4张滤纸依次漂浮于盛有双蒸馏水的带盖方盘中,使水自然从NCP的下面向上浸润,待其完全浸湿
DNA印迹法实验凝胶处理
1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。 2)变性：将凝胶浸泡于适量的碱变性液中，室温下变性30分钟。期间更换变性液一次，不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变性，则凝胶中溴酚兰的颜
DNA印迹法的实验步骤
注意注意，操作戴手套。凝胶处理1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。2)变性：将凝胶浸泡于适量的碱变性液中，室温下变性30分钟。期间更换变性液一次，不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变
DNA印迹法实验步骤转移的相关介绍
1)取一个较大的方形瓷盘,放一块玻璃板于盘上,盘内加转移液(6×SSC或10×SSC)使液面距离玻璃底面约1,2cm,玻璃板表面盖两张预先用转移液浸润的Whatman 3M ·滤纸(也可用新华滤纸),滤纸两端浸入SSC转移液中,用一玻璃棒将滤纸压平,滤纸与玻璃板间不得有气泡, 2)将琼脂糖凝胶
DNA印迹法的实验器材和试剂
器材 1、电热真空干燥箱 2、硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3、大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4、滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5、刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶 试剂 1、酸变性液:0.25mol/L HCl， 用
关于DNA印迹法的基本介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离，使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性（使双链DNA变成单链），通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用，将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤
DNA印迹法的实验的注意事项
1,操作时戴手套,严禁用手接触凝胶和硝酸纤维素膜,2,转移时,滤纸与膜、膜与凝胶、凝胶与滤纸桥之间均不能有气泡,否则影响DNA转移,3,凝胶易碎,操作时应格外小心,4,硝酸纤维素膜上的DNA固定非常重要,固定不好时DNA·在杂交过程中会脱落下来,烤膜温度过高,膜脆性增加,易碎,5,大片段DNA转移效
DNA印迹法的定义
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或
DNA－印迹法的概念
中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定 义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上，用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
DNA印迹法所需的仪器试剂介绍
1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶
DNA印迹法的注意事项介绍
1、操作时戴手套,严禁用手接触凝胶和硝酸纤维素膜, 2、转移时,滤纸与膜、膜与凝胶、凝胶与滤纸桥之间均不能有气泡,否则影响DNA转移, 3、凝胶易碎,操作时应格外小心, 4、硝酸纤维素膜上的DNA固定非常重要,固定不好时DNA·在杂交过程中会脱落下来,烤膜温度过高,膜脆性增加,易碎, 5
Southern－印迹实验——印迹法
Southern印迹法是将DNA片段从电泳凝胶中转移至膜支持物上，使DNA片段固定，因此该膜半永久性地重现出凝胶电泳的带型。实验方法原理本方案是专门为将琼脂糖凝胶印迹至不带电荷或带正电荷的尼龙膜上而设计的，稍作修改后同样可用于硝酸纤维素膜方法。实验材料DNA试剂、试剂盒HClNaClTrisNaOH
DNA印迹法实验步骤和注意事项
注意：操作戴手套。凝胶处理1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变性,
DNA－印迹法的技术特点
中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定 义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上，用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
DNA印迹法的技术原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样，比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置，也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来，不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳
如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜？
硝酸纤维素膜（NC膜）是蛋白和核酸杂交最常用的印迹膜，是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起，虽然这其中的机制还不是十分清楚，但由于硝酸纤维素膜的这个特性，而且易于封闭非特异性结合，从而得到了广泛的应用。目
如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜
硝酸纤维素膜（NC膜）是蛋白和核酸杂交zui常用的印迹膜，是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起，虽然这其中的机制还不是十分清楚，但由于硝酸纤维素膜的这个特性，而且易于封闭非特异性结合，从而得到了广泛的
DNA印迹法所需仪器试剂
仪器1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 材料电泳分离DNA的琼脂糖凝胶试剂1 酸变性液:0.25mol/L HCl, 用分析纯的盐酸12Mol/L稀释 2碱变性
DNA印迹（Southern－Blot)实验
【实验原理】DNA印迹是1975年由英国Southern创建的。其基本原理是：DNA分子经限制性核酸内切酶酶切后，由琼脂糖凝胶电泳将所得 DNA片段按分子质量大小分离，然后将DNA片段变性，并使凝胶中的单链DNA片段转移到尼龙膜、硝酸纤维素膜(NC)或其他固相支持物上，此法中DNA 片段
DNA印迹法的起源和原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳
RNA样品的转膜（虹吸印迹法）
实验概要本实验介绍了RNA样品的转膜（即虹吸印迹法）的操作步骤等。主要试剂1. 20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，DEPC水定容1000ml NaOH调pH至7.0，高压后备用。 2. 6×SSC：用20×SSC稀释。主要设备1. 紫
DNA斑点和狭线印迹实验——多样抽滤法
斑点和狭线印迹实验，可用于检测被印迹的1DNA制品中靶序列的相对丰度。主要应用（1）遗传病诊断；（2）DNA图谱分析；（3）检测样品中的DNA及其含量；（4）PCR产物分析。实验方法原理斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的技术。实验材料DNA试剂、试剂盒S
DNA印迹法的基本原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样，比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置，也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来，不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以
DNA印迹杂交分析实验
放射标记法 实验方法原理 本方案适合于用100~1 000 bp 长的放射性标记的DNA探针对Southern转印、斑点及狭线印迹进行杂交分析。
DNA印迹杂交分析实验
实验方法原理 本方案适合于用100~1 000 bp 长的放射性标记的DNA探针对Southern转印、斑点及狭线印迹进行杂交分析。实验材料 DNA试剂、试剂盒 SDSSSC仪器、耗材 水浴锅培养箱实验步骤 用6×SSC润湿带有固定了的DNA的膜。2. 将膜的DNA面朝上置于杂交管中，ATP溶
印迹膜的用途
中文名称印迹膜英文名称blotting membrane定 义在印迹时接受被转移样品的膜介质。如硝酸纤维素膜、尼龙膜等。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
基于－PCR－的－DNA－斑点印迹实验
对于高通量的筛选，推荐使用几个热循环仪厂家提供的 96 孔或 384 孔 PCR 板，或者使用单个的管子。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验方法原理dNTP ，PCR 缓冲液，聚合酶混合液，嵌套引物，LB-氨苄液体培养基，溶液NaOH，SSC，Tris-HCl，PCR
基于－PCR－的－DNA－斑点印迹实验
实验方法原理 dNTP ，PCR 缓冲液，聚合酶混合液，嵌套引物，LB-氨苄液体培养基，溶液NaOH，SSC，Tris-HCl，PCR 产物微量滴定板，尼龙膜，紫外交联装置，96 孔或 384 孔复制器，热循环仪，PCR 管或反应板
基于－PCR－的－DNA－斑点印迹实验
实验方法原理 dNTP ，PCR 缓冲液，聚合酶混合液，嵌套引物，LB-氨苄液体培养基，溶液NaOH，SSC，Tris-HCl，PCR 产物微量滴定板，尼龙膜，紫外交联装置，96 孔或 384 孔复制器，热循环仪，PCR 管或反应板试剂、试剂盒 dNTP PCR 缓冲液聚合酶混合液嵌套引物LB-氨苄
DNA斑点和狭线印迹实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 SSCNaClNaOHTris·Cl仪器、耗材 紫外透射仪电泳仪多样抽滤加样器实验步骤 1. 裁一张与多样过滤加样器一样大小的尼龙膜，将膜置于6×SSC的表面让其自然浸没。放置10 min。 2. 裁一张与多样过滤加样器一样大小的Whatman 3 MM 滤纸，用6