蛋白聚集体的检测

1. 可溶聚集体最小的可溶聚集体是二聚体,可溶聚集体的大小上限则因蛋白质和溶液条件而异。这些可溶的蛋白聚集体,无论是通过物理相互作用还是化学修饰,通常可以用SEC-HPLC检测。该方法的局限在于样品在层析柱中的稀释可能会导致聚集体的解离、不同蛋白质需要不同的流动相、同时流动相或高压也可能会诱导蛋白质形成聚集体。除此之外,其他的一些可以检测蛋白质聚集体的方法有原位动态光散射、原位静态光散射、分析超离心法、原子力显微镜、石英晶体微天平、电喷雾-差分电迁移率分析等。2. 不可溶聚集体一般来说,不可溶聚集体包括亚可见微粒(<100 μm)和各种形式的可见聚集体或颗粒。可见颗粒体/聚体的形貌取决于聚集机制和或实验条件(如溶液pH)。传统的检测亚可见微粒的方法是光屏蔽法,但其在检测半透明颗粒和特征尺寸小于2 μm的颗粒方面能力有限。流动成像分析因为其高的灵敏度、形态信息及可区分某些类型的颗粒而被广泛应用于聚集体的检测。......阅读全文

蛋白产物的检测方法

蛋白产物的检测一、组织蛋白的裂解提取:1.分别取-70℃保存的各组动物的样品(半个脑、0.5g肌肉),放入小离心管中,在冰浴上以PBS充分洗涤2次,除去残留血液。2.用无菌手术剪和镊子将大鼠肌肉剪碎(脑样品不用剪碎),放入另一小离心管中,于0℃以PBS充分洗涤,4℃,3000 rpm离心5分钟。3.

蛋白产物的检测实验

一、组织蛋白的裂解提取:1.分别取-70℃保存的各组动物的样品(半个脑、0.5g肌肉),放入小离心管中,在冰浴上以PBS充分洗涤2次,除去残留血液。2.用无菌手术剪和镊子将大鼠肌肉剪碎(脑样品不用剪碎),放入另一小离心管中,于0℃以PBS充分洗涤,4℃,3000 rpm离心5分钟。3.吸出上清夜,尽

甲胎蛋白的检测

为如此,医生们就把检测人体血液中的AFP作为诊断肝癌的重要依据,并把AFP称为“肝癌标志物”。检测AFP是诊断肝癌的一种简便、灵敏、快捷的方法,现认为它在发现早期肝癌方面有独一无二的价值,用AFP诊断肝癌的“专一性”仅次于病理学检查。 一般认为非癌症性肝病时AFP含量大多在500ng/ml以下,且为

活性G蛋白的检测

来自细胞外的信号绝大多数都是要通过分布于细胞表面的各种受体传导到细胞内部,从而引起细胞的生理反应,发挥相应的功能。细胞表面最大的受体家族就是G蛋白偶联的受体(G-Protein-Coupled Receptors, GPCRs)。编码GPCR的基因有1000多个,占人类基因组总数超过2%。G蛋白

本周蛋白的检测方法

加热沉淀凝溶蛋白在pH4.9的条件下,加热至40℃~60℃时出现沉淀,继续加热至90℃后又重新溶解。故可根据这一特点,用化学方法进行检测。这种加热沉淀法简便易行,但敏感度较低,也不能确定轻链的型别。免疫电泳用抗κ和λ型轻链抗血清进行免疫电泳分析。为提高检出率,尿标本宜先用聚乙二醇通过透膜浓缩。游离轻

冷球蛋白的检测

冷球蛋白的检测是临床医学检验技士/技师/主管技师考试复习需要了解的检验基础知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助! 冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质,在4℃时自发沉淀,加温至37℃时又可溶解,故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。取患者外周血,分离出血清置4℃冰箱中

尿蛋白的检测方法

  定性试验是用以筛选和粗略估计尿蛋白含量的方法。试验的方法有三种:试纸法、磺柳酸法和加热醋酸法。磺柳酸法和加热醋酸法都是根据浊度反应将无混浊或无沉淀定为阴性(一),将出现混浊或沉淀的定为阳性(+)。磺柳酸法操作简便,灵敏度高,可广泛用于普查,但其对白蛋白的灵敏度高于球蛋白,且影响因素较多,易造成假

共振质量测试法在生物制药开发中的应用(二)

蛋白质聚集体的定量测量 起初,蛋白质聚集体处于二聚体水平,此后直径一路攀升到数十微米,高于这一范围上部的聚集体通常采用流量式显微镜来测量。共振质量测量可应用于低于流式显微镜测量范围的领域,包括那些粒径在亚微米至几微米、以及不易通过其他方法评估定量评估测量的粒径。这也是免疫原性的影响之处,以及新的监管

共振质量测试法的生物应用

RMM技术用于蛋白质聚体的预测和测量 预测和测量蛋白质聚集,是生物制药配方中的一个重大难题。共振质量测试法——一种新型的分析方法,可以方便地研究蛋白质的聚集。 共振质量测定技术 共振质量测量主要是依靠一个可以检测质量变化的机械共振结构。质量增加或减少,可以使结构的共振频率上升或下

多角度光散射(MALS)检测器工作原理及性能特点(三)

以马尔文的Viscotek SEC-MALS 20为例,较新的MALS检测器都已重点采用垂直样品池,以突破横向样品池设计固有的局限性。在这种结构中,流动相和激光彼此垂直,并且和横向系统一样可以容纳多个测量角度,但这种设计可以使小角度测量具有更大的物理空间,从而提高了准确测量的概率。 图3:在垂直

北大白凡组解释持留菌耐药的新机制

  病原菌在抗生素或其他胁迫下常常采用休眠策略以过渡极端环境,这一类休眠的亚分类菌被成为持留菌(persister)。例如结核杆菌持留菌在病变组织内可形成硬结灶或结核结节,在机体抵抗力低下时可再次发生继发性肺结核。近年来,关于持留菌形成的具体机制和应对策略已成为微生物研究领域的热点。  在2016年

血浆白蛋白的检测意义

  临床上肝功能检测白蛋白的意义是根据白蛋白检测结果可对某些疾病进行判断。一般情况下,白蛋白增高主要见于血液浓缩而致相对性增高,如严重脱水和休克、严重烧伤、急性出血、慢性肾上腺皮质功能减低症。白蛋白降低常见于肝硬化合并腹水及其他肝功能严重损害(如急性肝坏死、中毒性肝炎等)营养不良、慢性消耗性疾病、糖

蛋白质的检测方法

分别向甲、乙两支试管加入3毫升蛋清稀释液和清水,再依次向两支试管中加入双缩脲试剂A液和B液。观察甲、乙两试管中溶液发生的颜色变化。上述的演示实验结果表明,双缩脲试剂与蛋白质呈现紫色反应。

调整基因编码蛋白的检测

实验步骤             展开

本周蛋白的检测方法介绍

  1、加热沉淀  凝溶蛋白在pH4.9的条件下,加热至40℃~60℃时出现沉淀,继续加热至90℃后又重新溶解。故可根据这一特点,用化学方法进行检测。这种加热沉淀法简便易行,但敏感度较低,也不能确定轻链的型别。  2、免疫电泳  用抗κ和λ型轻链抗血清进行免疫电泳分析。为提高检出率,尿标本宜先用聚乙

蛋白质的检测原理

 图2半微量法测蛋白不论常量、半微量以及微量定氮法它们的原理都是一样的。1 消化:样品与硫酸一起加热消化,硫酸使有机物脱水。并破坏有机物,使有机物中的C、H氧化为CO2和H2O蒸汽逸出,而pro则分解氮,与硫酸结合成硫酸铵,留在酸性溶液中。2 消化过程中:在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物

调整基因编码蛋白的检测

实验步骤             展开

冷球蛋白检测的意义

  冷球蛋白属于一种病理性蛋白,人体内含量比较少,如果有升高,多提示有自身免疫性疾病或者肿瘤。其中Ⅰ型冷球蛋白升高,可以见于骨髓瘤、淋巴瘤等血液系统肿瘤。Ⅱ型冷球蛋白升高可以见于类风湿关节炎、干燥综合征、血管炎、淋巴增殖性疾病;Ⅲ型冷球蛋白升高可以见于系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征、链球菌

大豆蛋白的检测方法

应是气体组分的分类提法。干基就是以物料中去掉水份来算的,而湿基是以含有实际水份来算的。为什么要设两个基准?就是各种物料含水量不一样,然后就设定一个干基,统一到不含水分的情况下来衡量各种组分的含量。另附:干基、湿基与高位、低位发热量关系■ 干基发热量废弃物不含水份之实际发热量,称干基发热量;代号: H

BCA蛋白检测方法的原理

原理简介BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作

M蛋白的检测与鉴定

 一、M蛋白的基础知识  M蛋白是浆细胞或B淋巴细胞单克隆大量增殖时所产生的一种异常免疫球蛋白,其氨基酸组成及排列顺序十分均一,空间构象、电泳特征也完全相同,本质为免疫球蛋白或其片段(轻链、重链等)。由于它产生于单一克隆,又常出现于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤病人的血或尿中,故称M蛋白。这

表达蛋白检测实验

实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性(细胞内)蛋白的,如果重组蛋白是分泌到培养基中的,可按注解中的步骤操作。实验材料 生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒

表达蛋白检测实验

免疫印迹法 免疫沉淀法 点印迹法             实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是

冷球蛋白检测

冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质,在4℃时自发沉淀,加温至37℃时又可溶解,故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。取患者外周血,分离出血清置4℃冰箱中,一般在24~72h出现沉淀,若1周仍不出现沉淀者方可判断为阴性。如形成沉淀,再置37℃温育使其复溶,也可将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析

共振质量测试法在生物制药开发中的应用(一)

预测和测量蛋白质聚集,是生物制药配方中的一个重大难题。Lisa Newey-Keane博士描述了一种新型分析方法,可以方便地研究蛋白质的聚集。 由于在药物研发总体经费支出中,生物分子研究工作所占的比重越来越大,因此分析测试在迅速发展的生物制药行业受到广泛关注。这些分子开发不仅成本高昂,而且受到严格监

微流成像图像法颗粒分析技术助力颗粒表征

《梓梦科技》微流成像颗粒分析系统采用高频成像检测器对动态连续的样品中的颗粒物进行静态的图像捕获,获取一系列的数据照片,并通过软件对颗粒物进行形态学参数描述和计数分析,根据形态学参数可对颗粒进行大致分类,比如蛋白聚体、硅油、气泡、纤维等。蛋白质药物易于形成可见或亚可见(在显微镜下可见)的聚集体,从而影

新突破!HPLC分析mRNA聚集体新方法:-大孔径SEC

DNA的发现是人类研究地球生命遗传本质的里程碑。地球上几乎所有生命,从病毒、单细胞微生物、低等真核生物、动植物、哺乳动物,乃至人类都使用DNA遗传物质进行细胞复制和生命繁衍。而mRNA的发现也是同样重要,它是DNA和基因产物的中间信使。随着mRNA新冠疫苗的成功,研究者正积极将mRNA技术用于肿瘤治

分析型超速离心技术在生物类似药聚体精准检测中的应用

近年来,生物药快速发展并在治疗一些疾病方面显示出明显的临床优势,随着原研生物药ZL到期及生物技术的不断发展,以原研生物药质量、安全性和有效性为基础的生物类似药的研发,对于提高生物药的临床可及性和降低研发成本具有重要的意义。2019年中国共有4款“国产”生物类似药获批上市1,还有多款处于上市申请和临床

不同的检测尿蛋白的方法

  1.试带法:必须使用标准合格的试带,并严格按照注意事项操作。  2.加热乙酸法:控制加酸量及盐类浓度,加酸过少、过多,导致远离蛋白质等电点时,可使阳性程度减弱。如尿液盐类浓度过低,又可致假阴性,此时可加饱和氯化钠溶液1~2滴后,再进行检查。  3.磺基水杨酸法:使用某些药物(如青霉素钾盐、复方新