实验室分析方法正相液相色谱法原理及发展

正相液相色谱(NPLC)是最常用的HPLC分离方法之ー。与RPLC相反,其固定相极性大于流动相,样品的保留值随流动相极性降低而增加。NPLC常用于分离中性和离子样品。一、原理与色谱柱推荐正相液相色谱为典型的液-固吸附色谱。溶质在柱中固定相上反复进行吸附-解吸过程,根据不同被测物在吸附剂上吸附作用的强弱进行分离。其分离机理如图1所示。图1 正相色谱机理溶质和固定相间的吸附作用包括:①溶质和溶剂分子对吸附剂表面特定位置的竟争作用,这使得溶剂组成的改变往往会引起分离情况发生很大变化;②溶质所带官能团与吸附剂表面相应的活性中心之间的相互作用,这种作用与溶质分子的几何形状有关,当官能团的位置与吸附中心匹配时,保留较强;反之,则保留较弱。溶质所带官能团的性质是决定其吸附作用的主要因素,若溶质分子所带官能团的极性强、数目多,则保留也强。不同异构体的相对吸附作用常有较大差异,因而,正相色谱法分离异构体比其他色谱法更为优越。固定相一般采用硅胶、氧......阅读全文

实验室分析方法高效色谱柱原理

高效液相色谱理论1、塔板理论①塔板理论介绍:塔板理论是 Martin 和 Synger 首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。这个理论假设:色谱柱内存在许多塔板,组分在塔板间隔(即塔板高度)内完全服从

正相液相色谱仪类型

正相液相色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分:实验室正相液相色谱仪和工业正相液相色谱仪。2、按分离对象的属性可分:有机化合正相液相物色谱仪和无机化合物正相液相色谱仪。3、按进样自动性可分:自动进样正相液相色谱仪和手动进样正相液相色谱仪。4、按固定相性质可分:硅胶固定相正相液相色谱仪和化学键合固定相正

什么是正相色谱法?

正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和

正相层析的概念和应用

中文名称正相层析英文名称normal-phase chromatography定  义固定相的极性大于流动相的一种液相层析类型。流动相极性越低,被分离的化合物在层析系统中的保留时间越长。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

正相色谱柱可以反冲吗

  液相色谱柱在使用过程中常见问题  液相色谱是一种高效的分析手段,液相色谱柱是色谱分析系统的“心脏”,由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被强保留物质污染。这些强保留物质通常难以洗脱,多次上样后,聚集在柱头端,堵塞筛板,甚至可能与填料发生相互作用导致填料变性,这会导致柱效下降,分离

何谓正相色谱和反相色谱

1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。应用特点:正相色谱一般用来分离中性化合物和离

关于SPE正相和反相萃取

固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE),也称固相提取,是一种基于液-固色谱分离,对目标化合物可以进行选择性吸附、选择性洗脱的前处理技术。根据其保留机制,作用力主要分为非极性相互作用、极性相互作用、离子交换作用(静电吸引力)。离子交换小柱针对的是可解离的带电物质,在农残、

实验室分析方法气相色谱固相微萃取固相微萃取法

固相微萃取(Solid Phase Micro-extrayon,SPME)是在固相萃取的基础上发展起来的一种新型样品预处理技术。它基于被萃取组分在两相间的分配平衡,将萃取、浓缩和解吸集为一体,其装置简单,便于携带,易于操作,快速灵敏,选择性高,样品用量小,重现性好,精度高,检出限低,无需溶剂或仅需

实验室分析仪器气相色谱检测器种类介绍及原理分析

一、光离子化检测器光离子化检测器(PID)对大部分的有机物都有响应,在烷烃等饱和烃存在时对芳烃与烯烃化合物有选择性。它是利用密封的UV灯发射的紫外线使色谱柱流出的电离电位低于紫外线能量的分子电离。灯的强度为8.3~11.7eV,最广泛采用10.2eV。在电场作用下产生电信号。检测限可为pg级,线性范

实验室分析方法气相色谱法(GC)方法介绍

是以气体为流动相的色谱分析法。

实验室分析方法液相色谱的定量方法—信号测量

HPLC不仅是一种分离手段,同时也是一种优良的定量分析技术。它不仅能够用于对样品(包括纯样品)中基本或主成分的定量,还能用于对中等浓度多组分混合物的分析以及基体中痕量(10-9或更低)杂质的浓度评价。精心设计行之有效的分析方法可以对主成分的分析在准确度和精密度两方面显示出较高的水平[精密度为±(1%

气相色谱法与高效液相色谱法的分离原理介绍

  分离原理:  1.气相:气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。  2.液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色

高效液相色谱法基本原理及结构组成

基本原理 液相色谱根据分离机理的不同可分为: 液固吸附色谱 液液分配色谱 离子交换色谱 离子对色谱法 分子排阻色谱(或凝胶渗透色谱) (一)液-固吸附色谱 流动相为液体,固定相为固体吸附剂,根据物质吸附作用的不同来分离物质。 (二)液-液分配色谱 流动相和固定

何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?

正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。正相色

何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?

正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。正相色

何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?

正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。正相色

HPLC基础知识(一)

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I.概论     一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和

高效液相色谱法的历史发展

  高效液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、高效和高灵敏度的分离测定。高效液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的高效液相色谱仪,其自动化程

液相色谱仪的正相色谱柱的使用保存方法

清洗:正己烷:水(10:90)冲洗1个小时。保存:正己烷:水(10:90)冲洗1个小时(半个小时亦可)后,用正己烷:水(90:10)或纯正己烷冲洗1个小时。至于活化就不太清楚了,一般液相色谱柱不像气相色谱柱一样需要活化,当然不排除一些特殊色谱柱需要。

挥发酚中的正干扰物质及去除方法

  对于挥发酚的测定能产生正干扰的物质主要是硫化物和亚硝酸盐。其中硫化物采用酸化曝气的方法,具体操作为:取10ml样品于样品管中,加入0.1 ml浓磷酸,放入超声清洗仪超声5 min后,用移液管加入3-5滴浓度为1 g/L的硫酸铜溶液,放入超声清洗仪超声5 min后,上机检测即可。   如果样本中

固相微萃取的应用及发展

  应用  在环境样品检测中的应用  固相微萃取法最早的应用就是在环境样品的检测中,至今其在环境样品的微量元素分析中仍发挥着巨大的作用。应用比较广泛的有固态(如沉积物、土壤等)、液态(饮用水和废水等)及气态(空气、香料和废气等)的样品分析。在固态样品中的应用有在底泥中丁基锡化合物的检测、土壤和沉积物

白酒气相色谱仪的工作原理及分析方法

(一)DNP柱直接进样法测定白酒中主要醇、酯成份白酒中醇和酯是主要香味成份。吸取原样品进行色谱分析,其优点是:操作简便,测定结果准确性高、快速;缺点是:极其微量的组分不易检出。1样品的配制●2%内标的配制:吸取2mL的内标--乙酸正丁酯于1OOmL的容量瓶中,(因内标物易挥发,可在瓶内先放少量酒精)

实验室分析方法气相色谱仪概述

气相色谱技术由于具有分离效率高、灵敏度高、分析速度快等优点,已被广泛用于能源、化工、制药、环境、食品等多个领域。自1955年 Perkin Elmer公司推出世界上第一台商品化气相色谱仪以来,经过60多年的不断发展,气相色谱技术已较为成熟,目前气相色谱仪新产品主要向网络化、模块化、优异的综合性能、便

实验室分析方法气相色谱用载体特性

1、应具有大的比表面积; 2、应具有化学惰性; 3、载体形状规则;4、要有较大的机械强度。

实验室分析方法气相色谱法(GC)气相色谱缺点

要求样品气化,不适用于大部分沸点高和热不稳定的化合物,对于腐蚀性能和反应性能较强的物质更难于分析。大约有15%-20%的有机物能用气相色谱法进行分析。

氨基柱在正相条件下不能检测还原糖是什么原理

还原糖会与填料上的氨基起反应的。分子结构中含有还原性基团(如游离醛基或游离羰基)的糖,叫还原糖。如如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。

实验室分析仪器核磁共振谱仪定义、发展及基本原理

核磁共振是指一个射频场引起有磁矩的原子核与外磁场相互作用而产生的磁能之间的跃迁。核磁共振波谱仪是基于核磁矩不等于零的原子核,在静磁场作用下,对稳定频率电磁波的吸收现象来研究物质结构的一种工具。分析工作者从共振峰的数和相对的强度、化学位移和弛豫时间等参数进行物质结构分析。一、核磁共振的定义核磁共振(n

实验室分析仪器气相色谱仪故障及排除方法二

故障现象可能的原因排除方法进样后不出峰(1)记录器或检测器没有工作(2)样品没气化(3)色谱柱断裂堵塞、管道漏气(4)注射器堵塞或漏气(5)气化室堵塞或吸附(6)柱温太低(1)检查记录器及信号线有无问题,检测器有无信号输出(2)升高气化温度(3)排除漏气及堵塞(4)修理或更换注射器(5)清理气化室,

实验室分析仪器气相色谱仪故障及排除方法六

故障现象可能的原因排除方法基线不能调零(1)基流太大(2)检测器或放大器有故障定常(3)TCD的桥臂不平衡(4)FID的喷口局部堵塞(5)信号线短路(1)排除造成基流大的原因(如气体不纯、固定液流失、燃烧气量过大)(2)检查检测器与放大器的参数和元件是否正常,改正参数或更换元件(3)更换TCD的加热

实验室分析仪器气相色谱仪故障及排除方法九

基线波动(1)炉温控制不当(2)载气控制不当(3)TCD电桥的电流不稳(4)使用氢气发生器时氢气波动过大(1)(2)采取相应措施(3)检查TCD的电源(4)调整氢气发生器的工作电流,控制产气与用气基本平衡