实验室分析方法正相液相色谱法原理及发展
正相液相色谱(NPLC)是最常用的HPLC分离方法之ー。与RPLC相反,其固定相极性大于流动相,样品的保留值随流动相极性降低而增加。NPLC常用于分离中性和离子样品。一、原理与色谱柱推荐正相液相色谱为典型的液-固吸附色谱。溶质在柱中固定相上反复进行吸附-解吸过程,根据不同被测物在吸附剂上吸附作用的强弱进行分离。其分离机理如图1所示。图1 正相色谱机理溶质和固定相间的吸附作用包括:①溶质和溶剂分子对吸附剂表面特定位置的竟争作用,这使得溶剂组成的改变往往会引起分离情况发生很大变化;②溶质所带官能团与吸附剂表面相应的活性中心之间的相互作用,这种作用与溶质分子的几何形状有关,当官能团的位置与吸附中心匹配时,保留较强;反之,则保留较弱。溶质所带官能团的性质是决定其吸附作用的主要因素,若溶质分子所带官能团的极性强、数目多,则保留也强。不同异构体的相对吸附作用常有较大差异,因而,正相色谱法分离异构体比其他色谱法更为优越。固定相一般采用硅胶、氧......阅读全文
实验室分析方法质谱法的原理
使试样中各组分电离生成不同荷质比的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器,利用电场和磁场使发生相反的速度色散——离子束中速度较慢的离子通过电场后偏转大,速度快的偏转小;在磁场中离子发生角速度矢量相反的偏转,即速度慢的离子依然偏转大,速度快的偏转小;当两个场的偏转作用彼此补偿时,它们的轨道
正相层析的基本定义
中文名称正相层析英文名称normal-phase chromatography定 义固定相的极性大于流动相的一种液相层析类型。流动相极性越低,被分离的化合物在层析系统中的保留时间越长。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
正相色谱仪分类
正相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室正相色谱仪和工业正相色谱仪。2、按分离规模可分:微型正相色谱仪、小型正相色谱仪和大型正相色谱仪。3、按结构可分:台式正相色谱仪和落地式正相色谱仪。4、按功能可分:正相分析色谱仪和正相制备色谱仪。5、按用途可分:正相生物色谱仪、正相制药色谱仪、正相化工色
正相色谱和方向色谱
1、正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。 由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动
实验室分析方法高效液相色谱法的固定相的分类
(1)按固定相承受压力分:刚性固体:以二氧化硅为基质,可承受较高压力,表面可键合各种功能官能团---键合固定相,是目前应用最广泛的固定相。硬胶:主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中,由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成,可承受的压力较低。(2)按孔隙深度分:表面多孔型:基体是球形玻璃珠,在玻璃表面涂覆一层
实验室分析方法液相色谱的定量方法—定量方法
峰高和峰面积测量仅是对检测信号的一种响应该响应需同组分的浓度或者质量结合方可完成定量方法。无论在相同的还是不同的色谱条件下进行的试验,均要采取一定的手段加以校正,才可能得到准确的定量结果。主成分自身对照法、峰面积归化、内标法、外标法及标准加入法是HPLC定量分析中常用的校正技术。不加校正因子的主成分
实验室分析方法气相色谱固相萃取技术介绍
固相萃取法(Solid-phase Extraction,SPE)是一种较新的、发展很快的样品预处理方法。在本章介绍的所有样品预处理方法中,SPE也许是当前应用最为广泛的方法之22它是以液相色谱的分离机理为原理的抽提分离浓缩技术,采用高效、高选择性液相色谱固定相,利用样品组分在固定相和洗脱相之间的分
实验室分析方法气相色谱仪常用载气及性质
在气相色谱法中,流动相为气体,称其为载气。作为载气的气体必须是惰性气体(不与样品或固定相反应),气体扩散小,容易获得和纯化,且满足检测器要求。常用的载气为氢气、氮气、氦气、氩气;此外还有助燃的空气等。这些气体一般由高压钢瓶供气,需经过净化、稳压、流量控制和测量后进入气相色谱系统。常用载气的物化性质如
实验室分析方法气相色谱仪常用载气及性质
载气的纯度对于气相色谱分析至关重要,载气中的杂质是固定液降解和检测器噪声的主要来源。高纯度的载气可显著提高检测的灵敏度和重复性,延长色谱柱的使用寿命。载气纯度的要求与检测器、色谱柱的类型,分析对象和分析条件密切相关,建议在满足分析要求的前提下,尽可能选择高纯度的载气。通常来说,微量或痕量分析比常量分
正相键合相色谱仪简介
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相,以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪,简称键合相色谱仪。固定相极性比流动相极性强的键合相色谱仪称为正相键合相色谱仪。一、固定相:在载体表面键合含中等极性或较强极性的官能团,如氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二羟基等。二、流动相:以非极性
正相液相色谱是什么意思?
正相液相色谱(NPLC)是最常用的HPLC分离方法之ー。与RPLC相反,其固定相极性大于流动相,样品的保留值随流动相极性降低而增加。NPLC常用于分离中性和离子样品。
正相键合相色谱仪简介
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相,以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪,简称键合相色谱仪。固定相极性比流动相极性强的键合相色谱仪称为正相键合相色谱仪。一、固定相:在载体表面键合含中等极性或较强极性的官能团,如氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二羟基等。二、流动相:以非极性
实验室分析方法质谱法的历史和发展
1898年W.维恩用电场和磁场使正离子束发生偏转时发现,电荷相同时,质量小的离子偏转得多,质量大的离子偏转得少。1913年J.J.汤姆孙和F.W.阿斯顿用磁偏转仪证实氖有两种同位素[kg1]Ne和[kg1]Ne阿斯顿于1919年制成一台能分辨一百分之一质量单位的质谱计,用来测定同位素的相对丰度,鉴定
实验室分析方法气相色谱酰化衍生化方法
酰化能降低羟基、氨基、巯基的极性,改善这些化合物的色谱性能,并提高这些化合物的挥发性,增加某些易氧化化合物的稳定性。当酰化时引入含有卤离子的酰基时,还可以提高使用ECD检测器的灵敏度。常用的酰化试剂有酰卤、酸酐和反应活性的酰化物。(1)乙酰化法:标准乙酰化法是将样品溶于氯仿中,与乙酸酐和乙酸在50℃
实验室分析方法液相色谱的定性方法介绍
液相色谱法作为一种重要的分离分析手段,具有能通过色谱柱分离复杂样品中不组分的能力,这种能力是任何其他分析方法所无法比拟的。对色谱柱分离后的组分进行。尽管液相色谱法包多定性及定量鉴定,是色谱工作者完成分析工作的一个重要环节。尽管液相色谱法包括多种模式,但无论采用何种模式,对样品进行定性及定量分析皆基于
实验室分析方法气相色谱酯化衍生化方法
(1)甲醇法:有机酸与甲醇在催化剂条件下加热,发生酯化反应,生成有机酸甲酯。一般采用三氟化硼作催化剂,通常将三氟化硼通入甲醇配制酯化剂,因为配置过程中以放热,有一定的危险性,现在也有商品化的三氟化硼甲醇溶液可直接购买使用。(2)重氮甲烷法:重氮甲烷可以与有机酸反应生成有机酸甲酯放出氮气。此法简便有效
实验室分析方法按照色谱模式分类的原理及应用范围
按照色谱模式分类的原理及应用范围模式固定相种类分离原理应用对象反相C18、C8、C4、C1、苯基溶质疏水性不同导致其在流动相和固定相之间分配系数的差异大多数有机物;多肽、蛋白质、核酸等生物大、小分子,样品一般溶于水中正相SiO2、CN、NH2溶质极性不同导致其在极性固定相上吸附强度的差异中、弱和非极
实验室分析方法气相色谱固相萃取技术固相萃取法
固相萃取的操作原理是将液态或溶解后的固态样品倒入活化过的SPE柱,然后利用抽空或加压使样品进入SPE柱的固定相。利用固定相和样品组分间的相互作用实现对目标组分的富集和对样品基质的去除。为提高处理效率,可以采用SPE歧管真空装置同时处理多个样品。一般地,SPE在分离步骤中保留感兴趣的组分和类似的其他组
固相萃取柱的原理及使用方法
固相萃取柱(英文, 简称SPE column,或Solid Phase extraction Cartridges,简称SPE cartridges)是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。主要应用于各种食品、农畜产品、环境样品以及生物样品中目标化合物的样品前处理。固相萃取
Ⅱ相代谢稳定性研究原理及实验方法
Ⅱ相代谢稳定性研究原理及实验方法1 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容,它不仅决定了创新药物制剂研发的成败,而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而,药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用,研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药物代谢研究
Ⅰ相代谢稳定性研究原理及实验方法
Ⅰ相代谢稳定性研究原理及实验方法1 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容,它不仅决定了创新药物制剂研发的成败,而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而,药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用,研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药物代谢研究
实验室分析方法气相色谱固相萃取技术QuEChERS法
QuEChERS 意指Quick,Easy,Cheap, Effective, Rugged and Safe,即能满足“快速高效,容易操作,价格低廉,适用面广,而且安全”等要求的样品预处理技术。这本应是普遍适用于任何样品预处理方法的策略或要求,但当下已经成为专有名词,意指一种用于蔬菜、水果等含水
实验室分析方法高效液相相色谱仪的组成
高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统。
实验室分析方法气相色谱固相微萃取技术介绍
一、固相微萃取法固相微萃取(Solid Phase Micro-extrayon,SPME)是在固相萃取的基础上发展起来的一种新型样品预处理技术。它基于被萃取组分在两相间的分配平衡,将萃取、浓缩和解吸集为一体,其装置简单,便于携带,易于操作,快速灵敏,选择性高,样品用量小,重现性好,精度高,检出限低
酶标仪工作原理及未来发展
即酶联免疫检测仪,是酶恋免疫吸附实验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量。ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特
RCM成像的原理及发展
Marvin Minsky 于 1957 年发明了激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy, CLSM),由最初的单一 CLSM 发展到现在的双光子共聚焦显微镜、 多光子共聚焦显微镜、 活细胞共聚焦显微镜等多种细胞测量工具。 目前 CLSM 主要分为
实验室分析仪器液相色谱管路结构及使用方法
1.低压或负压管路尽量用粗的、塑料的管路,以聚四氟的居多。2.高压的管路尽量用细的、不锈钢或PEEK材料的管路。3.混合器出口到进样阀(或进样器)的管路、进样阀到色谱柱的管路、色谱柱到检测池的管路、检测池进液和出液的管路尽量用更细的,尤其是检测池前后的。这些管路并且越短越好。用于连接管路的管和接口由
实验室分析方法DCS系统工作原理
DCS系统即分布式控制系统,其实质是计算机技术对生产过程进行集中监视、操作、管理和分散控制的一新型控制技术。分布式操作系统的构成:作为一种纵向分层和横向分散的大型综合控制系统,它以多层计算机网络为依托,将分布在全场范围内的各种控制设备的数据处理设备连接在一起,实现各部分信息的共享和协调工作,共同完成
实验室分析方法高效色谱柱原理
高效液相色谱理论1、塔板理论①塔板理论介绍:塔板理论是 Martin 和 Synger 首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。这个理论假设:色谱柱内存在许多塔板,组分在塔板间隔(即塔板高度)内完全服从
什么是正相键合相色谱法
正相键合相色谱法 1. 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似,也是烷烃(常用正已烷等)加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似,但极性小于硅胶,即用相同的流动相及其它条件相同时,同一组分的保留时间将小于硅胶。许多