实验分析方法高效亲和色谱固定相的相关介绍

亲和色谱(AFC)是利用生物分子之间特异性相互作用实现分离的液相色谱分离模式亲和色谱是一种特异性的分离技术,这种特异性相互作用是活性生物大分子固有的特征,例如酶能与底物、抑制物、辅酶等结合;抗体能与互补的抗原相结合;凝集素能与细胞的表面抗原以及某些糖类相结合;激素能与蛋白及细胞受体形成复合物;基因可与核酸和阻遏蛋白相互作用等。亲和色谱以其极高的选择性不可替代地应用于复杂生物体系的分离分析中。传统亲和色谱多使用天然或合成高分子载体(葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶等),机械强度差,难以提高淋洗速度。高效亲和色谱采用可控孔径硅胶、可控孔径玻璃等无机基质,机械强度高且易于通过各种化学键合而増加配基牢度,具有很好的应用前景。有机聚合物基质主要有多糖型和高聚物型两大类。无机基质的主要缺陷为耐受pH值范围较窄(pH=2~8),并且残余硅羟基可造成非特异吸附而降低收率,甚至导致产品失活。按照亲和色谱配体性能即固定相所携带配体对被分离物质的选择性特征,可......阅读全文

液-—-固色谱法的相关介绍

  流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:  Xm + nSa ====== Xa + n

实验室分析方法气相色谱固相萃取技术介绍

固相萃取法(Solid-phase Extraction,SPE)是一种较新的、发展很快的样品预处理方法。在本章介绍的所有样品预处理方法中,SPE也许是当前应用最为广泛的方法之22它是以液相色谱的分离机理为原理的抽提分离浓缩技术,采用高效、高选择性液相色谱固定相,利用样品组分在固定相和洗脱相之间的分

实验分析方法反相色谱的固定相强极性化合物分离

在较强极性化合物反相色谱分离中,由于流动相有机溶剂的比例相对较低,固定相表画的烷基链会发生一定程度的收缩,使得化合物的保留时间不稳定或分离效果变差。 Waters公司采用三步反应制备了包埋氨基甲酸酯的C8、C10、C12、C14、C16和C18系列固定相, 其他公司等也采用低酸度的超纯硅胶微球为基质

有关高效液相色谱分析的相关介绍

  系统适用性  按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求;或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子.  色谱柱  在选定的条件下,注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液,记录色谱图,量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t(R

高效液相色谱仪固定相的分类

高效液相色谱仪固定相的分类有多种。一、按承受压力能力分类:1、刚性固体:刚性固体以二氧化硅为基质,可承受 7×108~1×109Pa 的高压,可制成直径、形状和孔隙度不同的颗粒。如果在二氧化硅表面键合各种官能团,可扩大应用范围。目前使用最广泛的固定相。2、硬胶:硬胶由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成,可

高效液相色谱仪固定相的基质

      高效液相色谱仪固定相的基质有陶瓷性质的无机物基质和有机聚合物基质。一、无机物基质:        无机物基质主要有硅胶和氧化铝。  1、硅胶:        硅胶是HPLC填料中使用zui普遍的基质。(1)特点:    1)强度高,刚性大,容易控制孔结构和比表面积,在溶剂中不容易膨胀。 

实验室分析方法亲和色谱法原理及发展

亲和色谱(AFC)作为一种特异性分离技术,基于生物分子的活性特征,以其极高的选择性不可替代地被应用于复杂生物体系中特定组分的分离。一、原理与色谱柱推荐亲和色谱基于生物分子固有的特异性相互作用进行样品的高选择性分离。特异性相互作用包括醇能与底物、抑制物、辅酶等的结合:;抗体与抗原的结合:凝集素与细胞表

固相萃取方法的相关介绍

  固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从20世纪80年代中期开始发展起来的一种样品前处理技术。它是通过固体吸附剂的选择性吸附和洗脱将液体样品(固体样品也可制成液体样品)中的目标化合物与干扰化合物分离,以达到富集、分离净化样品的目的。SPE是一个包括液相和固相的物理

实验室分析方法高效液相色谱法概念介绍

高效液相色谱法 (HPLC, high performance liquid chromatography)具有高分离效能的柱液相色谱法。

实验室分析方法高效色谱柱原理

高效液相色谱理论1、塔板理论①塔板理论介绍:塔板理论是 Martin 和 Synger 首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。这个理论假设:色谱柱内存在许多塔板,组分在塔板间隔(即塔板高度)内完全服从

气固色谱仪分子筛固定相

气固色谱仪分子筛固定相是人工合成的碱及碱土金属的硅铝酸盐(沸石)多微孔晶体。一、分子筛类型:1、4A:(1)组成:硅铝酸钠(2)孔径:0.4nm2、(1)组成:硅铝酸钠钙(2)孔径:0.5nm3、10X:(1)组成:硅铝酸钠钙(2)孔径:0.8~1nm4、13X:(1)组成:硅铝酸钠(2)孔径:1

液固吸附色谱仪常用固定相归纳

液固吸附色谱仪常用固定相有硅胶、氧化铝、活性炭和聚酰胺等。一、硅胶:硅胶通式为SiO2•XH2O,具有多孔性硅氧烷交联结构。由于其骨架表面具有很多游离和键合活性状态硅醇基团,能通过氢键与极性或不饱和分子相互作用。硅胶的吸附能力与硅羟基数量有关。硅胶随着含水量的增加,其活性降低,若硅胶游离水达到17%

实验室分析方法气相色谱固相微萃取技术介绍

一、固相微萃取法固相微萃取(Solid Phase Micro-extrayon,SPME)是在固相萃取的基础上发展起来的一种新型样品预处理技术。它基于被萃取组分在两相间的分配平衡,将萃取、浓缩和解吸集为一体,其装置简单,便于携带,易于操作,快速灵敏,选择性高,样品用量小,重现性好,精度高,检出限低

实验室分析方法色谱柱固体固定相的概念和分类

指直接装填到色谱柱中作为固定相的具有活性的多孔性固体物质。固体固定相大体可分为三类:第一类是吸附剂。如:分子筛、硅胶、活性炭、氧化铝等;第二类是高分子聚合物。如国内的GDX型高分子多孔微球,国外Porapak系列等;第三类是化学键合固定相。在气相色谱中,通常是将固定液涂敷在载体表面上。采用化学键合固

实验分析仪器高效液相色谱仪的色谱柱的相关知识

色谱柱色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好、分析速度快等。市售的用于 HPLC 的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔炭等,其粒度一般为3μm、5μm、7μm、10μ

高效液相色谱法的固定相的分类

高效液相色谱法的固定相的分类 : (1)按固定相承受压力分:刚性固体:以二氧化硅为基质,可承受较高压力,表面可键合各种功能官能团---键合固定相,是目前应用最广泛的固定相。硬胶:主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中,由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成,可承受的压力较低。  (2)按孔隙深度分:表面多孔型

高效液相色谱仪液固吸附色谱法的介绍

  液固吸附色谱法中,固定相为固体吸附剂,根据各组分吸附能力差异而使组分得以分离。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,大多数用于非离子型化合物。吸附色谱固定相可以分为极性和非极性两大类。对流动相的要求为:  1) 选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性。  2) 选用的溶剂应有高纯度,以防所

高效液相色谱仪色谱柱固定相填料的特点

一、硅胶特点:        大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。  1、机械强度高,使柱反压较低。  2、表面通过化学改性(修饰),可形成具有不同官能团的键合相。  3、更换溶剂时填料大小不会变化。  4、在高pH值时会溶解。  5、表面呈酸性。  6、纯度不高的酸性硅胶(A型硅胶)可分离中性

高效液相色谱柱按色谱固定相基质的分类

   高效液相色谱柱的空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸内螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸内螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压环用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.

关于高效液相色谱的液—固分配原理介绍

  流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm式中:X

高效液相色谱法液—固分离原理介绍

  流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm  式中

反相高效液相色谱的固定相是什么

反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,

反相高效液相色谱的固定相是什么

反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。

反相高效液相色谱的固定相是什么

反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,

实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征

由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比

实验分析方法HPLC分离固定相基质的形态

目前HPLC分析中常用的几种形态的固定相如图1所示,主要包括全多孔微球、薄売型微球、灌流色谱固定相和整体材料,其中由于全多孔微球固定相具有能够很好地兼顾柱效、样品容量、使用寿命等众多理想的性质,应用最为普遍。图1 HPLC的微粒类型(a)全多孔微球;(b)薄壳型微球;(c)灌流色谱固定相;(d)整体

实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征

由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比

高效液相色谱流动相和固定相

液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰

高效液相色谱中固定相分类

高效液相色谱中固定相可分为正向色谱和反向色谱1 正相色谱法采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相)流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷)常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)2 反相

高效液相色谱仪固定相类型

高效液相色谱仪固定相类型有多种。一、液液分配色谱仪固定相:1、全多孔型载体:全多孔型载体是由氧化硅、氧化铝和硅藻土等制成的多孔球体。早期采用100um的大颗粒,表面涂渍固定液,性能不佳已不多见。现采用10um以下的小颗粒。2、表面多孔型载体(薄壳型载体):表面多孔型载体是20世纪60年代中期出现的载