实验室分析仪器液相色谱仪分离条件选择的注意事项

1、流动相由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此,每次开始检测新样品时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般调至保留时间为6~15min 为宜)。所以建议第一次检验时少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,注意充分平衡柱。流动相滤过后,注意观察有无肉眼能看到的微粒、纤维;有则重新滤过。尽量采用不是弱电解质的甲醇-水流动相。2、样品配制塑料容器常含有高沸点的增塑剂,可能释放到样品溶液中造成污染,而且还会吸留某些药物,引起分析误差。某些药物特别是碱性药物会被玻璃容器表面吸附,影响样品中药物的定量回收,因此必要时应将玻璃容器进行硅烷化处理。3、记录时间第一次测定时,应先将空白溶剂、对照品溶液及供试品溶液各进一针,并尽量收集较长时间的图谱(如 30min 以上),以便确定样品中被分析组分峰的位置、分离度、理论塔板数及是否还有杂质峰在较长时间内才洗脱出来,确定是否会影响主峰的测定。4、进样量药品标准中常标明......阅读全文

薄层色谱的分离原理、条件选择和操作方法

一、薄层色谱概念最常用的薄层色谱也属于液-固吸附色谱。同柱色谱不同的是吸附剂被涂布在玻璃板上,形成薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一端点样,竖直放入一个盛有少量展开剂的的有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂层,借毛细作用向上移动。与柱色谱过程相同,经过在吸附剂和展开剂之间的多次吸附-溶解作用,将混合物中各

实验室仪器工作条件的选择

一、分析线 原子吸收强度直接正比于谱线振子强度和处于基态的原子数。从灵敏度的观点出发,通常选择由基态向第一激发态跃迁的共振吸收线做分析线,这是因为由基态向第一激发态跃迁的共振线具有最大的振子强度,而且,在3000℃以下,处于基态的原子数近似地等于总原子数,这也就是说,由基态向第一激发态跃迁的共振线一

毛细管电泳分离条件选择流程

分离条件的选择是毛细管电泳中最重要但也是最难之处。不同的专业研究工作者可能会有各自不同的选择策略和流程,我们提出如下九步选择流程,仅供参考: 第一步,尽可能多地了解分离样品的类型、来源、组成及其性质; 第二步,根据样品的可能性质和来源,选择分离模式,若无样品信息可先选CZE; 第三步,根据样品性质确

液相色谱仪色谱分离选择性的改善方法

液相色谱仪分析中,通过向流动相中加入改性剂调节pH值和调节流动相的溶剂极性强度,可以改善分离的选择性。一、向流动相中加入改性剂调节pH值:1、抑制溶质离子化:反相液相色谱中,常向含水流动相中加入酸、碱或缓冲溶液,使流动相的pH值控制在一定数值,抑制溶质离子化,减少谱带拖尾,改善峰形,以提高分离选择性

实验室分析仪器液相色谱分离条件中的化学键合固定相

化学键合固定相将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。1、键合相的性质固定相又分为两类,一类是使用最多的微粒硅胶,另一类是使用较少的高分子微球。后者的优点是强度大,

实验室离心机分离条件的确定

实验室离心机分离效果除与离心机种类和离心方法等因素有关,离心机转速、分离时间、分离温度和介质溶液PH值等条件也至关重要。一、离心机转速:离心力大小取决于转子的转速和离心半径。在说明离心条件时,低速离心通常以转子每分钟的转数(rpm)表示。在高速离心,特别是超高速离心时,往往用相对离心力(RCF)表示

实验室离心机分离条件的确定

       实验室离心机分离效果除与离心机种类和离心方法等因素有关,离心机转速、分离时间、分离温度和介质溶液PH值等条件也至关重要。一、离心机转速:        离心力大小取决于转子的转速和离心半径。在说明离心条件时,低速离心通常以转子每分钟的转数(rpm)表示。在高速离心,特别是超高速离心时,

单抗制备、血细胞纯化、细胞器分离的离心条件选择

通用离心机在各行业应用得非常广泛。目前在科研单位应用比较多的离心机产品有高速离心机、血液离心机、细胞离心机等,种类繁多,功能也不尽相同。不同试验需要不同的离心条件,经常需要对细胞悬液离心,以增加细胞浓度或洗除有关试剂,可调节的台式离心机就能满足大多试验的需求,那么本文简单介绍一下在单抗制备、血细胞纯

实验室分析仪器液相色谱仪器日常维护及注意事项

1.液相色谱中对流动相的要求①溶剂必须“干净”,在使用前需经过滤板除去颗粒杂质,必要时,在进样口再加一滤板,以除去可能由泵带来的颗粒。②必须控制吸附色谱中溶剂的含水量,过量水会使吸附剂活性降低,溶质保留值下降。③如需在一定pH值下操作,需定期测定流动相的pH值,大气中的CO2溶解在流动内将引起pH值

实验室分析仪器液相色谱仪手性柱使用注意事项

部分品牌手性柱(eg.YMCCHIRAL VEN手性柱)用纯乙腈保存,通常在反相条件下使用。当出现柱压增高、分离度降低与峰形变差时,需要进行必要的处理。)若为柱头污染,清洗程序如下:反接色谱柱,不接检测器,用流动相冲洗约20倍柱体积→用纯水冲洗约20倍柱体积→正接色谱柱,接或不接检测器,用纯水冲洗约

气质联用分析未知混合物成分及最佳分离条件的选择

气质联用分析未知混合物成分及最佳分离条件的选择  1.引言  GC/MS技术是化学工作者分离有机混合物常用的手段。色谱-质谱联用技术既发挥了色谱法的高分离能力,又发挥了质谱法的高鉴别能力。这种技术适用于做多组分混合物中未知组分的定性鉴别,可以判断化合物的分子结构,可以准确的测定未知组分的分子量,可以

速率方程对选择色谱分离条件有何指导意义

速率理论(又称随机模型理论) 1.液相色谱速率方程 1956年荷兰学者Van Deemter等人吸收了塔板理论的概念,并把影响塔板高度的动力学因素结合起来,提出了色谱过程的动力学理论--速率理论.它把色谱过程看作一个动态非平衡过程,研究过程中的动力学因素对峰展宽(即柱效)的影响. 后来Gidding

实验室分析仪器液相色谱仪常规操作步骤及注意事项

 液相色谱仪操作步骤: 1、打开电脑 2、打开主机、预热 3、进入仪器工作站,联机并设定仪器使用方法及仪器参数 4、启动泵的动力系统预处理(排气等) 5、检查是否漏夜、柱压是否正常 6、设置仪器方法,包括仪器的使用条件等 7、激活操作方法,等待仪器平衡、基线平直 8、仪器出现“Ready”后可进行样

PCR反应条件的选择

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。   温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链

ELISA试验条件的选择

1.固相载体的选择  载体的种类很多,其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是应用最广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作简便、用量小,适于大批检查。由于聚苯乙烯的工艺过程不够稳定,造成各批次差异较大

PCR反应条件的选择

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。  温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物

零水准的选择条件

根据质子条件表示式的合义零水准的选择应该是:1、凡是能和水产生质子传递的外来酸碱以及水本身都是零水准。即加到体系中的所有酸碱反应物,其量不论 多少都列入零水准。2、凡是能和外来酸碱和水质子传递的产物的产物都不应列入零水准。例如,一 元弱碱B水溶液的零水准是B和H2O。质子条件式只能是[H+]=[OH

质壁分离的发生条件

细胞泡液的浓度

质壁分离的发生条件

细胞泡液的浓度

气相色谱仪速率理论方程在分离条件选择中的应用

气相色谱仪速率理论方程为:H = A + B/u + Cu式中:A = 2λdpB = 2rDgC = Cm + Cs = 0.01k2/[(1+k)2]×dp2/Dm + q×[k/(1+k)2]×df2/Ds气相色谱仪色谱柱的填充均匀度、载体粒度、载气种类及流速、固定液液膜厚度和柱温等因素对柱效

液相色谱仪的色谱条件

液相色谱仪的固定相、流动相和柱温等色谱条件对分析结果有着重要影响。一、固定相:采用小粒径、窄粒度分布的球形固定相,化学键合相,用均浆法装柱。二、流动相:采用低粘度流动相,流量一般为1mL/min。三、柱温:一般以25~35℃为宜。温度太低,流动相的粘度会增加。温度高,易产生气泡。

高效液相色谱仪选择缓冲盐的注意事项

在高效液相色谱中,酸碱缓冲液的分离对保持流动相的恒定ph值和提高保留时间的重现性具有重要意义。怎么选择缓冲液:Pka和缓冲容量溶解度紫外吸光度(使用UV检测器)挥发性(MS蒸发光散射检测器)离子对性质稳定性和仪器的兼容性根据上述理论流动相缓冲能力取决于缓冲盐的pKa缓冲盐浓度和流动相pH。当缓冲溶液

二手LC液相色谱仪如何改善分离的选择性?

(1)抑制溶质离子化:反相液相色谱中,常向含水流动相中加入酸、碱或缓冲溶液,使流动相的pH值控制在一定数值,抑制溶质离子化,减少谱带拖尾,改善峰形,以提高分离选择性。例如在分析有机弱酸时,常向甲醇-水流动相中加入1%甲酸(或乙酸、磷酸、硫酸),抑制溶质离子化,以获得对称的色谱峰。对于弱碱性样品向流动

实验室无火焰原子吸收光谱测定条件的选择

在无火焰原子吸收测定中仪器参数的选择,包括波长、光谱通带和灯电流的选样等原则和火焰原子吸收法相同。一、原子化器种类的选择一般中低温原子化元素选择普通石墨管原子化器,对于容易生成难熔碳化物的金素,如Ti、Zr、Hf、V、Nb、Ta、Mo、W、Si、B、Y、稀土、U、Th等,可选用热解石墨管或金属舟皿。

液相色谱仪检测条件

液相色谱仪是一种常用的分析仪器,由泵、收集器、检测器、层析记录系统、层析柱等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有GX、快速、灵敏等特点。液相色谱仪检测条件  液相色谱仪检测条件的确定包括Z佳波长的确定、Z佳波长的确定、流速的确定和色谱图检验等。  1、Z佳波长的确定:  利用紫外全波长扫描仪扫描

实验室分析仪器高效液相色谱仪的构造

系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,液相色谱在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的

实验室高效液相色谱仪流动相的溶剂选择

流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中, 溶剂应当易于除去,不干

菌种及培养条件的选择

 菌种及培养条件的选择    菌种的选择对冻干的效果也是很重要的,乳酸菌因种属的不同其抗冻能力也互不相同。如链球菌属抗冻能力较强,明串珠菌和乳杆菌则稍差一些。细菌在稍低于最适生长温度中培养,收集的细胞耐冻能力较强;或通过优化生长培养基提高细胞浓度,来降低细胞在冷冻干燥条件造成的损伤。此外,菌体收集时

荧光测定物理条件的选择

荧光测定可变因素比较多,只有选好条件才能获得满意的激发和发射光谱。由于样品和仪器各不相同,因此测定条件不能固定不变。应当寻找仪器最佳条件。  灯电流 光源灯电流不能超过测定范围,但为了提高测定灵敏度,可以调节灯电流到最大允许值。 波长扫描范围: 对已知光谱特性的样品,不需进行广泛扫描。在测试一个未知

原子吸收的测定条件选择

测定条件该如何选择1、分析线的选择:最适宜的分析线,应视具体情况由实验确定。实验方法:首先扫描空心阴极灯的发射光谱,了解有哪几条可供选择的谱线,然后喷入试液,根据吸收情况,选择不受干扰而且吸光度值适度的谱线作为分析线。2、狭缝宽度的选择:合适的狭缝宽度同样应通过实验确定,即将试液喷入火焰中,调节狭缝