实验室分析方法高效液相相色谱仪的组成
高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统。......阅读全文
实验室分析方法高效液相相色谱仪的组成
高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统。
高效液相层析的结构组成
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、．分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。 1．进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2．输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l
实验室分析仪器高效液相相色谱仪流动相的脱气方式
流动相使用前必须脱气。常用的脱气方法有:低压脱气法(电磁搅拌、水泵抽空,可同时加热或向溶剂吹氮气)、吹氦气脱气法和超声波脱气法等。
高效液相色谱的流动相选择方法
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
高效液相和超高效液相的区别
超高效液相系统耐压更高，可以以更高的流速进行分析，并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高，即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的，高效液相色谱具有更细的流动相传输管路，内径更细的色谱柱，从而使死体积变小，理论塔板数更高，分析时间更短。超高效就是
高效液相制备色谱仪类型
高效液相制备色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分：化验室高效液相制备色谱仪和工业高效液相制备色谱仪。2、按灵敏性可分：微量高效液相制备色谱仪和痕量高效液相制备色谱仪。3、按结构可分：台式高效液相制备色谱仪和落地式高效液相制备色谱仪。4、按分离特点可分：高效高效液相制备色谱仪、高压高效液相制备色谱仪和
实验室分析方法气相色谱法（GC）气相色谱仪的组成
气相色谱仪的组成气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、温控系统、记录系统。
高效液相色谱定性方法
与气相色谱相比，高效液相色谱定性的难度更大。HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多，同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下，同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此，在高效液相色谱分析过程中，对定性分析方法提出了更高的要求。 （1）利用检测器的选择性进
实验室分析方法高效液相色谱仪液相色谱柱保护柱选择
在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样
实验室分析方法高效液相色谱理论速率理论
①液相色谱速率方程：1956年，荷兰学者 Van Deemter 等人吸收了塔板理论的概念，并把影响塔板高度的动力学因素结合起来，提出了色谱过程的动力学理论——速率理论。它把色谱过程看作一个动态非平衡过程，研究过程中的动力学因素对峰展宽（即柱效）的影响。后来 Giddings 和 Snyder 等人
实验室分析方法高效液相色谱分离模式的选择
高效液相色谱拥有众多分离模式,建立液相色谱分离方法的第一步即是根据样品种类选择合适的分离模式。理论上,任何一种化合物的性质都可以构建相应的分离模式。图1所示为一个蛋白质分子。根据其分子量、帯电性质、生物活性、溶解性能等性质,可以分别构建凝胶色谱、离子交换、亲和色谱、反相色谱等分离模式,用于其与其他化
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高压、高速、近代液相色谱，通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法，到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面，现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
实验室分析方法气相色谱仪气路系统组成
气路系统组成包括气源、净化器和载气流速控制;常用的载气有:氢气、氮气、氦气。
实验室分析方法高效液相色谱理论塔板理论
①塔板理论介绍：塔板理论是 Martin 和 Synger 首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔，把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程，即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。这个理论假设：色谱柱内存在许多塔板，组分在塔板间隔（即塔板高度）内完全服从分配定律，并很快达到分配平衡
实验室分析方法高效液相色谱理论色谱分离原理
根据分离机制不同，高效液相色谱可分为四大基础类型：分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色谱。①分配色谱法：分配色谱法是四种液相色谱法中应用最广泛的一种。它类似于溶剂萃取，溶质分子在两种不相混溶的液相即固定相和流动相之间按照它们的相对溶解度进行分配。一般将分配色谱法分为液-液色谱和键合相色谱两类。液
色谱技术方法高效液相色谱
高效液相色谱 （HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)．进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)．有一段时间没用，或者换了
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)．进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)．有一段时间没用，或者换了
高效液相色谱的流动相要点
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1）由强到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或缓冲溶液）进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍规则：每减少10％的有机溶剂（甲醇或乙腈）的量，保留因子约增加３倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况
实验室分析方法高效液相色谱的定性定量分析方法
一、定性分析在高效液相色谱中,常用的定性分析有下列五种方法。1、利用已知标准样定性由于每一种化合物在特定的色谱条件下有其特定的保留值,如果在相同的色谱条件下,被测物与标样的保留值相同,则可初步认为被测物与标样相同。2、利用紫外和荧光光谱定性由于不同的化合物有其不同的紫外吸收或荧光光谱,对检测池中的待
实验室分析仪器高效液相相色谱检测系统介绍
作用——用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的组成和含量变化的装置。紫外-可见吸收检测器、光电二极管阵列检测器、示差折光检测器、荧光检测器、电化学检测器。
实验室分析仪器高效液相相色谱分离系统介绍
色谱柱是实现分离的核心部件。由柱管和固定相组成。柱管为直型不锈钢管。一般色谱柱长5~30 cm,内径4~5 mm,凝胶色谱柱内径3~12 mm,而制备色谱柱内径则可达25 mm。一般淋洗溶剂在进入色谱分离柱之前,先通过前置柱。HPLC柱的填料颗粒粒径一般约为3~10 mm,填充常采用匀浆法。色谱柱的
实验室分析仪器高效液相相色谱概念梯度洗脱
用两种(或多种)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定程序连续改变流动相中溶剂的配比和极性,通过流动相中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。(1)高压梯度(内梯度)特点是先加压后混合。将溶剂用高压泵增压以后输入色谱系统的梯度混合室,加以混合后送入色谱柱。(2)低压梯度(外梯度)特点是先
实验室高效液相色谱仪液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应
高效液相蛋白质色谱仪种类
高效液相蛋白质色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分：实验室高效液相蛋白质色谱仪和工业高效液相蛋白质色谱仪。2、按功能可分：分析型高效液相蛋白质色谱仪和制备型高效液相蛋白质色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分：正相高效液相蛋白质色谱仪和反相高效液相蛋白质色谱仪。4、按灵敏性可分：微量高效液相蛋白
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混