实验室分析方法高效液相色谱理论色谱分离原理
根据分离机制不同,高效液相色谱可分为四大基础类型:分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色谱。①分配色谱法:分配色谱法是四种液相色谱法中应用最广泛的一种。它类似于溶剂萃取,溶质分子在两种不相混溶的液相即固定相和流动相之间按照它们的相对溶解度进行分配。一般将分配色谱法分为液-液色谱和键合相色谱两类。液-液色谱的固定相是通过物理吸附的方法将液相固定相涂于载体表面。在液-液色谱中,为了尽量减少固定相的流失,选择的流动相应与固定相的极性差别很大。a.液-液色谱:按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。正相色谱法:采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与氰基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正己烷、环己烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。反相色谱法:一般用非极性固定相(如C18、C8);流......阅读全文
实验室分析方法高效液相色谱理论色谱分离原理
根据分离机制不同,高效液相色谱可分为四大基础类型:分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色谱。①分配色谱法:分配色谱法是四种液相色谱法中应用最广泛的一种。它类似于溶剂萃取,溶质分子在两种不相混溶的液相即固定相和流动相之间按照它们的相对溶解度进行分配。一般将分配色谱法分为液-液色谱和键合相色谱两类。液
实验室分析方法高效液相色谱理论速率理论
①液相色谱速率方程:1956年,荷兰学者 Van Deemter 等人吸收了塔板理论的概念,并把影响塔板高度的动力学因素结合起来,提出了色谱过程的动力学理论——速率理论。它把色谱过程看作一个动态非平衡过程,研究过程中的动力学因素对峰展宽(即柱效)的影响。后来 Giddings 和 Snyder 等人
实验室分析方法高效液相色谱理论塔板理论
①塔板理论介绍:塔板理论是 Martin 和 Synger 首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。这个理论假设:色谱柱内存在许多塔板,组分在塔板间隔(即塔板高度)内完全服从分配定律,并很快达到分配平衡
高效液相色谱塔板理论
1.塔板理论的基本假设塔板理论是Martin和Synger首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。塔板理论的基本假设为:1)色谱柱内存在很多塔板,组分在塔板间隔(即塔板高度)内完全服从分配定律,并很快达
实验室分析方法高效液相色谱分离模式的选择
高效液相色谱拥有众多分离模式,建立液相色谱分离方法的第一步即是根据样品种类选择合适的分离模式。理论上,任何一种化合物的性质都可以构建相应的分离模式。图1所示为一个蛋白质分子。根据其分子量、帯电性质、生物活性、溶解性能等性质,可以分别构建凝胶色谱、离子交换、亲和色谱、反相色谱等分离模式,用于其与其他化
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以
高效液相色谱原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
高效液相色谱原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
高效液相色谱原理
采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测
高效液相色谱原理
色谱法是一种分离技术,试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动,称为固定相; 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。 当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质
高效液相色谱原理
采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测
高效液相色谱原理
高效液相色谱(HPLC)的原理:以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以
超高效液相色谱提高色谱分离能力
通过超高效液相色谱(ACQUITY UPLC)提高色谱分离能力并减少溶剂用量 在当今的经济形势下,需要以较少的资源实现更多成果,而“快速”是分析化学领域内经常听到的一个主题。液相色谱法已成为药物分析、环境监测、食品检验和水质监测等领域内众多定量及定性分析的主要工具。通过ACQUITY UP
高效液相色谱的主要类型及分离原理
高效液相色谱的主要类型及分离原理根据不同的分离机理,高效液相色谱可分为以下主要类型:1.液-液分配色谱(液-液分配色谱)和化学键合相色谱(化学键合相色谱)流动相和固定相都是液体流动相和固定相不应相互溶解(极性不同,应避免固定液体的损耗),流动相和固定相之间应有明显的界面。当样品进入色谱柱时,溶质分布
色谱技术方法高效液相色谱
高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,
高校液相色谱分离原理
分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离,分离过程是一个分配平衡过程。高效液相色谱主要有4种,下面分别描述一下。1、液-固吸附色谱。固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强,K值越大保留时间越长。2、液-液分配色谱。顾名思义,它是将固定液涂在担
高效液相色谱的液固分离简介
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm 式中
高效液相色谱分离模式的选择
基于样品的一般性质选择分离模式的基本原则。
高效液相色谱如何计算分离度
不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工
高效液相色谱如何计算分离度
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高效液相色谱如何计算分离度
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高效液相色谱如何计算分离度
分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工作站都会自动给出,你可以向以前做过的人咨询一下应该怎么设置。分离度又称分辨率,为了判断
高效液相色谱如何计算分离度
不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工
高效液相色谱如何计算分离度
不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工
常见高效液相色谱的分离类型
常见高效液相色谱法按其分离原理可以分为液-固吸附色谱法、正相液-液分配色谱法、反相液-液分配色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。以下对这几种高效液相色谱法进行简介: 1.高效液相色谱法:在液固吸附色谱法中,流动相为液体,并使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根
高效液相色谱如何计算分离度
分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工作站都会自动给出,你可以向以前做过的人咨询一下应该怎么设置。分离度又称分辨率,为了判断
高效液相色谱定性方法
与气相色谱相比,高效液相色谱定性的难度更大。HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此,在高效液相色谱分析过程中,对定性分析方法提出了更高的要求。 (1)利用检测器的选择性进
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对静止的固
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对