兰州化物所以代谢组学和高效液相色谱技术诊断痛风获进展
预防和治疗一直是人类防治疾病的重要手段，对于目前尚无有效治疗手段的疾病，如癌症、痛风和老年失忆症等，早期的预警和干预显得十分重要。近二十年来，利用现代分析技术和代谢组学策略来研究重大疾病的预警预报技术，是现代生命分析化学重要的研究领域之一。 中科院兰州化学物理研究所中科院西北特色植物资源化学重点实验室药物工艺标准课题组，近年来专注于利用高效液相色谱法（HPLC）、高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）技术，结合代谢组学等现代系统生物学理念，开展癌症、痛风和老年失忆症等重大疾病预警预报技术的研究。近期，该课题组以痛风疾病为研究对象，针对痛风临床检测指标单一、误诊率较高，以及潜伏时间长、发病无规律的特点，对人体血清和尿液中的全部代谢物质进行代谢靶标分析和代谢轮廓分析。结果表明：目前临床以尿酸为指标诊断痛风的方法，尚不能完全区分痛风和非痛风、高尿血症和急性痛风患者。 研究发现，除尿酸外，血清中的肌酐和色氨酸，尿液......阅读全文
反相高效液相色谱2
方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一
高效液相色谱的优势
高效液相色谱（High Pe-rformance Liauid Chromatography，HPLC）的主要优点是：⑴分辩率高于其它色谱法；⑵速度快，十几分钟到几十分钟可完成；⑶重复性高；⑷高效相色谱柱可反复使用；⑸自动化操作，分析精确度高。根据分离过程中溶质分子与固定相相互作用的差别，高效液相色
反相高效液相色谱6
方案6 计算机辅助方法优化梯度条件的 RP-HPLC 蛋白质分离实验实验材料HPLC 肽标准品蛋白质样品试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）磷酸磷酸二氢钠硫脲硝酸钠三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、配制流动相以
高效液相色谱知识（一）
一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)． 有一段时间没用
反相高效液相色谱4
方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验实验材料用于分析的肽或蛋白试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）2 -丙醇乙醇硝酸钠硫酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置离心机锥形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮气冷冻干燥机流动相过滤装置氦气制备型 HPLC 装置实验步骤一、
高效排阻液相色谱
高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱（ SEC），分子筛色谱，凝胶过滤等，生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法，填料具有一定范围的孔尺寸，大分子进不去而先流出色谱柱，小分子后流出。用于生物大分子分离的传统SEC填料主要是多糖聚合物软胶，只能在低压下作慢速分
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级）三氟乙酸（TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品（如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的，质量在 30~5
高效液相色谱的维修
一、仪器的安装对环境的要求１、 电源电压２２０V：有条件的情况下，最好使用照明电，此电压比较稳定,对仪器的性能稳定性较好，在没有办法的时候，必须要用动力线路供电时，就要采取相应的办法克服或减少由于电机频繁启动，停止运行时对电网电压波动的影响电机是感性负载，停止和启动能产生很强的干扰尖脉冲电压。
高效排阻液相色谱
实验材料 nrhTNF 试剂、试剂盒 氯化钠 PB 仪器、耗材
色谱技术方法高效液相色谱
高效液相色谱 （HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，
高效液相色谱的色谱柱
填料和流动相的组分应按各品种项下的规定，常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。在用
高效液相色谱和气相色谱的异同点
不同点：一、流动相不同：hplc为液体流动相，gc为永久性气体作流动相（通常叫做载气）二、进样器不同：高效液相为平头进样针，气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同：（1）气相色谱柱通常几米到几十米（气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以增加柱
高效液相色谱和气相色谱的异同点
不同点：一、流动相不同：HPLC为液体流动相，GC为永久性气体作流动相（通常叫做载气）二、进样器不同：高效液相为平头进样针，气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同：（1）气相色谱柱通常几米到几十米（气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以增加柱
安捷伦举办芯片液相色谱及蛋白质组学/代谢组学用户交流会
疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室第二届学术委员会研讨会 暨安捷伦第一届芯片液相色谱及蛋白质组学/代谢组学用户交流会成功举办 2007年秋，为了开发建立一套全新理念的，与临床研究紧密联结的整体化蛋白质组学研究平台，以实现科研及早期临床诊断、新药开发及个体化医疗的需求，安捷伦科技和西南
高效液相色谱的流动相选择方法
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
高效液相色谱对流动相的脱气
高效液相色谱对流动相的脱气脱气方式：在线脱气机脱气，前期流动超声波超声脱气； 系统中气泡的产生：流动相本身存在，梯度淋洗混合后放出气泡； 气泡的影响：存在于管路中，系统压力不稳定，实验结果有偏差；存在于单向阀中，易造成液体回流，流量不准确，甚至是不吸液；存在于检测器中，出现鬼峰，影响检测准确性。
高效液相色谱流动相的选择原则
高效液相色谱仪分析时流动相的选择原则：1 选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。作为分析流动相，应避免不必要的浪费，防止污染环境，危害身体健康。应该根据样哦数量，计算需要使用的溶剂体积，添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质，比如四氢呋喃在光照下就容易变质，甲醇或
高效液相色谱的流动相如何选择
由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争。因此，正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是：（1）溶剂对于待测样品，必须具有合适的极性和良好的选择性。（2）溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的
高效液相色谱流动相和固定相
液相色谱有正反之说，所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相：a.反相流动相：有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了，磷酸盐缓冲液，醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相：乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相：碳十八柱（C18）、碳八柱（C8）、苯基柱b.正相：氨基柱、氰
高效液相和超高效液相的区别
超高效液相系统耐压更高，可以以更高的流速进行分析，并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高，即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的，高效液相色谱具有更细的流动相传输管路，内径更细的色谱柱，从而使死体积变小，理论塔板数更高，分析时间更短。超高效就是
高效液相色谱的液固分离简介
流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（未进样时，所有的吸附剂活性中心吸附的是S)，可表示如下：Xm nSa ====== Xa nSm 式中
高效液相色谱与化学计量学方法联用
摘要:用邻苯二甲醛和N-乙酰-L 半胱氨酸作为柱前手性衍生化试剂,使用常规反相高效液相色谱法拆分DL-氨基酸对映体,对于不能达到基线分离的色谱峰,应用化学计量学方法计算分析,从而达到同时定量测定多种氨基酸对映体的目的.近年来氨基酸分析在生物化学、药学和临床研究上都有着广泛而重要的应用. 氨基酸的分离
高效液相色谱键合相色谱法简述
键合相色谱法是由液－液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上，克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解，及流动相通过色谱柱时的机械冲击，固定相不断损失，色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体
关于高效液相色谱的液液分配原理介绍
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱
高效液相色谱的液液分配的相关介绍
流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式： 式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm—溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。LLPC
高效液相色谱柱故障排除
高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组
高效液相色谱的测量方式
色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定.常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶很常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检
高效液相色谱柱的保养
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用