离子交换高压液相色谱法HPLC的介绍
使用离子交换高压液相色谱HPLC(high pressure liquid chromatography)来测定糖化血红蛋白(HbA1c)的百分含量目前被认为是分析HbA1c的金标准。采用HPLC方法工作的全自动糖化血红蛋白分析仪器,仪器快速、简便、精巧、准确等特点,受到越来越多用户的欢迎。 色谱分析是一类利用混合物的各组分在不同相上的分配差别,在两相物质相对运动过程中,将混合物中的各种成分分离开的一种分析技术。液相色谱是以液体或固体为固定相,以液体为液相的色谱法的总称。色谱法又叫色层或层析,这一技术在生命科学研究中用于生物活性物质的分析;生物活性物质是以混合物形式存在,人类血液中的蛋白质有上千种,只有把混在一起的被测蛋白分离出来,才能准确测定;在HbA1c的测定时,可以通过高精度HPLC,将HbA1c从Hb中分离出来,才能得到准确的数值。在生命科学研究中,活性物质的分离主要应用的是液相色谱。......阅读全文
离子交换高压液相色谱法HPLC的介绍
使用离子交换高压液相色谱HPLC(high pressure liquid chromatography)来测定糖化血红蛋白(HbA1c)的百分含量目前被认为是分析HbA1c的金标准。采用HPLC方法工作的全自动糖化血红蛋白分析仪器,仪器快速、简便、精巧、准确等特点,受到越来越多用户的欢迎。
液相色谱法(HPLC)检测黄曲霉的方法介绍
HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素(例如:
高效液相色谱法离子交换分离原理介绍
(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流 动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中) (
液相色谱法(HPLC)检测黄曲霉毒素的方法介绍
HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。 该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素
高压液相色谱法的概念
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。
高压液相色谱法的特点
1、高压:液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa。2、高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于1h。
高效液相色谱法(HPLC)复核细则
一、对起草单位的要求:1.HPLC法用于药品的有关物质检查或含量测定时,需提供建立HPLC法的依据及参考文献。2.应对建立的方法进行论证,按照中国药典2000年版第二部凡例与附录收载的药品质量标准分析方法验证项下所列的要求进行试验。3.建立方法时,应考虑下列事项:①首选填料为十八烷基键合硅胶
离子交换高效液相层析实验_阳离子交换HPLC
实验材料蛋白质试剂、试剂盒磷酸钠NaCl仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1. 用10倍柱床的已脱气的水冼去柱子的贮存溶剂,并以10倍体积的高盐缓冲液在低pH洗硅胶类或聚合体IEX柱。2. 如按前述阴离子方案分离,那么应用磷酸钠和磷酸钠/NaCl缓冲液分离蛋白标准,采用以下液体进行梯度洗脱:
离子交换高效液相层析实验_阴离子交换HPLC
实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材交换柱实验步骤1. 在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2. 在室温平衡IEX柱,对4
高效液相色谱法HPLC实验结果的分析
高效液相色谱和气相色谱法(包括测定方法和计算方法)的定性和定量分析是相同的。定性分析采用纯物质控制的色谱鉴别方法,非色谱鉴别方法结合化学分析或其他仪器分析方法采集组分;定量分析采用峰高或峰面积内标法、外标法或归一化法进行定量,并与计算机结合作为现代分析方法对。定性分析色谱方法的定性分析的目的是确定每
高效液相色谱法使用的仪器高压泵的介绍
HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、高效分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效
HPLC高压输液泵日常保养
1. 使用高纯度试剂和HPLC级纯度的溶剂;流动相使用前必须经过过滤和脱气处理。 2. 实验开始前和实验结束后,用纯甲醇冲洗整个液体流路一定时间,可避免许多麻烦发生;不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中。 3. 平时应备有泵密封垫、单向阀、泵头装置、各式接头、保险丝等配件和工具,定期更换垫圈,需要时圆
液相色谱法术语概念离子交换剂
离子交换剂( ion exchanger)一种具有可交换离子的聚合电解质,能参与溶液中离子的交换作用而不改变其本身的一般物理特性。
液相色谱法术语概念离子交换容量
离子交换容量(ion exchange capacity)单位质量或体积的离子交换剂中含有可交换的离子的物质的量,以 mmol/g或 mmol/ml表示。
高压液相色谱(HPLC)系统组成(二)
四、检测器 检测器是HPLC仪的三大关键部件之一。其作用是把洗脱液中组分的量转变为电信号。HPLC的检测器要求灵敏度高、噪音低(即对温度、流量等外界变化不敏感)、线性范围宽、重复性好和适用范围广。 1.分类 1)按原理可分为光学检测器(如紫外、荧光、示差折光、蒸发光散射)、热学检测器(如吸附
hplc为什么最高压42mpa
42mpa=420bar,明显压力太高,对仪器和柱子都不好。要么管路发生堵塞要么柱子堵住了,建议换一台仪器,可以判断是哪个出问题。如仪器发生堵塞,可以不接柱子一般有机溶剂一半水长时间冲洗,或者把可以拆卸下来的管路拆下超声清洗,如果柱子问题,可以挽救的可能性不大了
高压液相色谱(HPLC)系统组成(一)
HPLC系统一般由 输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置 等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置
液相色谱法的特点和分类是什么
一、液相色谱法的特点液相色谱法是20世纪60年代末在经典液相色谱的基础上发展起来的一种现代色谱分析方法,历史上曾出现过不同的叫法,如高压液相色谱(HPLC)、高速液相色谱(HSLC)和高分辨液相色谱(HRLC)。就分离原理而言,HPLC与经典柱层析(色谱)没有本质的区别,但由于采用了高压输液泵、微粒
黄曲霉毒素检测方法液相色谱法(HPLC)
HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素(例如:
HPLC高压泵产品的多元化发展
产品的生命力在于市场的需求。如今的市场需求正是要求产品各有特色或特点,做到与众不同;正是以这一点,造就了液相色谱仪高压泵产品的多元化趋势。它的多元性主要体现在泵输液流速不同及系统耐压的要求不同。 随着HPLC的高压恒流泵技术的不断成熟,已在分析仪器领域得到广泛应用。根据应用不同,需要配备不同
液相色谱法检测人血浆甲氨蝶呤的浓度HPLC
甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是二氢叶酸还原酶抑制剂,是通过抑制细胞内二氢叶酸酶达到杀灭肿瘤细胞的作用。目前临床采用大剂量甲氨蝶呤配合亚叶酸钙解救(HD-MTX+CF)治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)。有研究表明,ALL患者MTX血药浓度与不良反应和疗效之间存在密切关系且个体差异大。
离子色谱法与高效液相色谱法(HPLC)的区别
离子色谱法的工作原理是离子交换平衡。离子色谱法中使用的固定相是离子交换树脂。离子交换树脂以固定的带电基团分布,能够游动配位离子。将样品加入离子交换色谱法时,若用适当的溶液洗去样品离子,则样品离子与能在树脂上游泳的离子交换,并连续进行可逆交换吸附吸收,最后达到吸附平衡。可检测离子:f-、cl-、no2
毛细管电泳法和液相色谱法的异同
利用高压直流电场驱动的带电粒子之间的迁移率和分配系数的差异,以毛细管为分离通道,实现了高性能无纺布的分离。这是继液相色谱(Hplc)之后的分析科学的又一重要进展,它将分析科学从微观提升到纳米级,这不仅使单细胞甚至单分子分析成为可能。蛋白质和酸性等生物物质的分析也有了一个新的转折点。与液相色谱法的
高效液相色谱仪特点
在经典色谱的基础上,高效液相色谱(HPLC)是以气相色谱法为基础的。技术上,将流动相转变为高压输送输送压力可达4.9Pa色谱柱用小粒径填料以特殊的方式填充,使柱效应比经典液相色谱(数万或数千米塔板)要高得多。同时,在色谱柱后面有一个高灵敏度的检测器,可以连续检测流出液。特点1.高压:液相色谱以液体为
高压液相色谱HPLC发展概况、特点及分类
一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法最早是由俄国
实验室分析方法超高压液相色谱法概念介绍
超高压液相色谱法(UPLC, ultrahigh pressure chromatography)与传统高效液相色谱法(HPLC)相比,其是在更高操作压力下进行分离的液相色谱法。
高效液相色谱检验法测定时泵压力上不去
高效液相色谱是现在食品实验室中应用非常广泛的一款仪器,但是还有很多小伙伴对它的原理、使用维护等知识不太了解。今天小编就从HPLC概述、工作原理、结构组成、常见故障及维护、HPLC应用等方面来给大家科普下HPLC的基础知识。1高效液相色谱法概述高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的
HPLC基础知识教程(一)
I.概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法
液相色谱制备基础知识(一)
制备液相色谱基础知识一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法
高效液相色谱知识(一)
一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法