离子交换高效液相层析实验_阳离子交换HPLC

实验材料蛋白质试剂、试剂盒磷酸钠NaCl仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1. 用10倍柱床的已脱气的水冼去柱子的贮存溶剂,并以10倍体积的高盐缓冲液在低pH洗硅胶类或聚合体IEX柱。2. 如按前述阴离子方案分离,那么应用磷酸钠和磷酸钠/NaCl缓冲液分离蛋白标准,采用以下液体进行梯度洗脱:20 min 以上的0%~80%磷酸钠/NaCl缓冲液线性梯度或用复含梯度:0 min 时10%磷酸钠/NaCl,15 min 时60%,20 min 时80%,并保持5 min,然后在10 min 以上的时间回复到10%外,在进行下次层析前,保持10%缓冲液15 min。......阅读全文

离子交换高效液相层析实验_阳离子交换HPLC

实验材料蛋白质试剂、试剂盒磷酸钠NaCl仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1.  用10倍柱床的已脱气的水冼去柱子的贮存溶剂,并以10倍体积的高盐缓冲液在低pH洗硅胶类或聚合体IEX柱。2.  如按前述阴离子方案分离,那么应用磷酸钠和磷酸钠/NaCl缓冲液分离蛋白标准,采用以下液体进行梯度洗脱:

离子交换高效液相层析实验_阴离子交换HPLC

实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材交换柱实验步骤1.  在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2.  在室温平衡IEX柱,对4

离子交换高效液相层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材 交换柱实验步骤 1.  在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2.  在室温平衡IE

离子交换高效液相层析实验

阴离子交换HPLC 阳离子交换HPLC             实验材料 蛋白质 试剂、

阳离子交换层析介绍

中文名称阳离子交换层析英文名称cation exchange chromatography定  义利用不同分子在所设计的条件(如pH、离子强度等)下,携带电荷情况不同,与阳离子交换剂结合的强度不同,可以用不同的条件洗脱出不同的组分的一种层析法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

Hamilton阳离子交换高效液相色谱柱系列应用

 Hamilton的PRP-X200阳离子交换高效液相色谱柱能快速、高分辨率分离碱金属和碱土金属。不到五分钟即可完全溶解碱金属和铵,不到四分钟即可分离出碱土阳离子。由于流动相状态各不相同,每种阳离子都单独成组,消除了组间的相互干扰。· 更改流动相中的甲醇含量,可以提高或者降低碱金属离子的分辨率。PR

离子交换层析实验离子交换层析技术

离子交换层析实验可应用于:(1)分离纯化蛋白质;(2)分离氨基酸;(3)分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。实验方法原理离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的

离子交换层析实验

基本方案 离子交换层析介质和层析柱的选择             实验材料 蛋白质 试剂

离子交换层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 离子交换缓冲液仪器、耗材 离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤 1.  配制离子交换层析缓冲液,安装好层析柱,但以离子交换层析缓冲液取代其中的凝胶过滤缓冲液。 2.  用起始梯度的缓冲液溶解含蛋白质混合物的样品。3.  弃去柱床上部的大部分缓冲液,并将样品加在凝胶的顶

离子交换层析实验

离子交换层析技术             实验方法原理 离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离

阳离子交换层析的概念和原理

中文名称阳离子交换层析英文名称cation exchange chromatography定  义利用不同分子在所设计的条件(如pH、离子强度等)下,携带电荷情况不同,与阳离子交换剂结合的强度不同,可以用不同的条件洗脱出不同的组分的一种层析法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

InnovationTM高效强阳离子交换液相色谱柱为基因工程提升...

InnovationTM高效强阳离子交换液相色谱柱为基因工程提升效率基因工程是当前科技发展最为迅速的领域之一,随着基因组学和分子工程学的发展,特别是“人类基因组计划”的初步完成,标志着基因工程发展到一个新的历史阶段,更展示出基因产业的巨大潜力。然而在基因产业,尤其是基因药物产业中其成本的70%甚至更

离子交换层析实验(四)

六、实例: 复杂蛋白质混合物的分离采用离子交换层析分离复合蛋白质混合物的一个典型例子就是从乳清中分离蛋白质。它可以进行一定程度的工业化放大,但也可作为一个廉价的检测体系用于离子交换剂的评价。实际上, 我们也已经通过这种蛋白质混合物来比较不同供应商所提供的离子交换剂的吸附能力(Hahnetal.,

离子交换层析实验(三)

五、离子交换层析柱的操作以下是离子交换层析柱操作的一般性步骤。此外还需要一些专用步骤以确保离子交换剂在使用时保持稳定。这些步骤如下:’(1) 加载盐溶液;(2) 平衡层析柱;(3) 蛋白质上样;(4) 洗去未结合物质;(5) 洗脱;(6) 再生;(7) 消毒处理。一般操作条件如表 22.2 所 TK

离子交换层析实验(二)

三、结合条件根据离子交换平衡的一般性原理,很显然,应在很低的盐浓度条件下对蛋白质进行上样 (图 22.1)。盐浓度也必须适当地调节,这具体取决于离子交换剂配体的密度。通常推荐的盐浓度为 1 〇?100_〇 l/L 的缓冲液,其电导率相应为 1?4mS/cm。来源于细菌培养物的一般性原料或细胞

离子交换层析实验(一)

一、实验原理离子交换层析用于蛋白质分离的原理的最简单解释是,基于带相反电荷分子间的相互吸引力。蛋白质表面所带的电荷取决于其 Pl 和环境 PH。构成离子交换剂的基础介质通常为多孔珠形式,可以为蛋白质的吸附提供足够大的表面积。固定于基础介质上的带电配基可以带正电荷也可以带负电荷。为提高介质的结

反相高效液相层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1.  用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂,梯度从100%有机溶剂到100%水,流速1 ml/min,持续15 min 以上。 2.  以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用1

反相高效液相层析实验

多肽和蛋白质的分离             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

离子交换层析实验离子交换层析介质和层析柱的选择

实验步骤1.  离子交换凝胶的选择依据:(1)根据蛋白质的pH只稳定范围。蛋白质在等电点pI以上pH稳定时选择阴离子交换凝胶介质,在pI以下pH的稳定时,则选用阳离子交换凝胶介质。(2)根据特分离蛋白质的分子大小。分子量在10 000~100 000 0 Da 的蛋白,选用如DEAE-Sephace

离子交换柱层析分离核苷酸实验_离子交换层析法

本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法,掌握离子交换柱层析的分离原理和方法,熟练掌握紫外吸收分析方法。实验方法原理本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离

离子交换层析

   离子交换层析利用含有能与周围介质进行离子交换的不稳定离子的不溶 性基质来分离分离物质。   1、离子交换基质Adams 和Holnes 有1935 年通过酚、甲醛和磺酸缩 聚成不溶性树脂,制成了第一个人工合成的离子交换材料。从此以后,人工 合成的离子交换树脂日见增多(多数是从芳香族化合物合成

离子交换柱层析法(层析实验简介)概略

一、    原理:有些高分子物质含有一些可以分离的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-  —————  R-NH3CL+OH-这类高分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由

离子交换层析法浓缩蛋白实验

实验方法原理 离子交換层析可用于浓缩蛋白质溶液。因为大多数蛋白质的等电点均低于 8, 所以它们可在 pH 值为 8 的弱离子强度溶液中被阴离子交换树脂吸附。用离子强度大的溶液可简单的将它们洗脱下来,达到浓缩的目的。实验材料 蛋白质溶液仪器、耗材 离子交换树脂层析柱实验步骤 1. 准备离子交换树脂,装

离子交换层析实验——基本方案

离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒离子交换缓冲液仪器、耗材离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤1.

离子交换层析法浓缩蛋白实验

            实验方法原理 离子交換层析可用于浓缩蛋白质溶液。因为大多数蛋白质的等电点均低于 8, 所以它们可在 pH 值为 8 的弱离子强度溶液中被阴离子交换树脂吸附。用离子强度大的溶液可简单的将它们洗脱下来,达到浓缩的目的。

离子交换层析法浓缩蛋白实验

实验方法原理离子交換层析可用于浓缩蛋白质溶液。因为大多数蛋白质的等电点均低于 8, 所以它们可在 pH 值为 8 的弱离子强度溶液中被阴离子交换树脂吸附。用离子强度大的溶液可简单的将它们洗脱下来,达到浓缩的目的。实验材料蛋白质溶液仪器、耗材离子交换树脂层析柱实验步骤1. 准备离子交换树脂,装配层析柱

阳离子交换柱用什么冲液冲洗

阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗,阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗,除去交换性能强的盐,然后用水、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有机物)、甲醇、水依次冲洗。

关于高效液相色谱的离子交换的原理介绍

  (Ion-exchange Chromatography)  IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流  动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:X-(溶剂中) (树脂

离子交换层析法

离子交换层析法(ion exchange chromatography,简称IEC)是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性、极性,也就是所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离

离子交换层析法

离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处