HPLC是做什么的?原理?操作方法?
HPLC是高效液相色谱,英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。操作方法:如下图所示,溶剂贮器中的流动相被泵吸入,经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经测其压力和流量,导入进样阀(器)经保护柱、分离柱后到检测器检测,由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图,馏分收集器收集馏分,废......阅读全文
HPLC法测定奥美拉唑肠溶片的含量
HPLC法测定依诺沙星软膏的含量,中国抗生素杂志,高效液相色谱法测定奥美拉唑肠溶片的含量翁水旺沙吉达(福建省药品检验所福州郑丽清(福建医科大学附属协和医院福州酸盐缓冲液(pH7.6)乙腈(75:25),检测波长设定在302nm线性范围为进样量0.10Pg~为100.1%,RSD=1.19%本方法快速
HPLC常见问题和解决方法压力不断上升
压力不断上升原 因解决方法1、流速设定过高1、调整流速设定2、柱前筛板堵塞2、a、在允许情况下反冲色谱柱b、更换筛板c、更换色谱柱3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀3、a、使用恰当的流动相b、冲洗色谱柱4、色谱柱选择不当4、选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏5、清洗或更换进样阀6、柱温过低6、提高温度
Alliance-HPLC高效液相色谱溶剂管理是如何的?
Alliance HPLC高效液相色谱该单元的溶剂管理系统最多对四路色谱溶剂进行脱气并以精确的比例混合,并无脉动地平稳输送溶剂; Alliance HPLC高效液相色谱有下述特征: 仅配备两个入口阀的串行流路可降低复杂性,并大程度缩短故障停机时间 自动化溶剂压缩性(无错溶剂
高效液相色谱(High-Performance-Liauid-Chromatography,HPLC)
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想,然而直到六十年代后期,由于各种技术的发展,高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱(HighSpeed Liquid Chromatography),高压液相色谱(High Parss-ure Lipuid
SPEDISC富集HPLC检测水体中多环芳烃
前言: 多环芳烃是在自然界中广泛存在的一类有机污染物。即使短时间暴露接触多环芳烃也会损害人体的红细胞,抑制人体免疫系统。若长时间接触可损害人体生殖系统并有相当强的致癌或致突作用。它们在各种水体中似乎都存在,但它们在水中含量低,种类多,快速而准确地对其定性定量直是分析化学重要研究领域。 SPE
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1、Dry Prime,呵呵,既然流动相都干了,那流路大概也干了进行dryprime的操作步骤如下1.轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡.2.在灌注排液阀出口插上一支注射器,然后打开排液阀(反时针旋转半圈).不要将注射器固定在排液阀上,而要用手将其贴紧阀的出口.3.选择DryPrime,然
液相色谱(HPLC)荧光检测器工作原理简介
液相色谱荧光检测器是由双路固定波长荧光检测器的中压泵浦灯发出的连续光通过半反射半透镜分成两束再经过测量池和参比池特别是大约10%的激发光被反射到参考细胞和相应的光电倍增管上液相色谱参比池有利于消除流动相发射的背景荧光和外界影响,参比光路也有利于消除光源波动的影响约90%的激发光被激发光滤光器分离,并
HPLC结合复合模式色谱柱检测极性有机酸
近年来,有机酸的使用在制药和食品领域越来越普遍, 在制药领域,常用的有机酸主要有乙酸、三氟乙酸 、甲酸等,常被作为有机合成的原料,而三氟乙酸(TFA)随着大量使用和排放,在水体中广泛存在,植物会随土壤和水浓度增加而富集TFA,且由于其持久性和缺乏挥发性,难以从植物组织中消除。三氟乙酸对水生生物有
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办?
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
HPLC柱验收测试时柱压过高原因分析
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因: ①拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查; ②把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查; ③将柱子的
绿绵科技AZURA®-(U)HPLC进入ANTOP专家评审阶段
ANTOP 2018正在火热进行中,多家科学仪器企业竞相参与了申报,经过广大网络用户踊跃参与和热情投票,北京绿绵科技有限公司的AZURA® (U)HPLC 液相系统申报“灵活组合的(U)HPLC”奖已率先进入专家评审阶段! AZURA® (U)HPLC 是KNAUER新一代的(U)HPLC液相
普瑞邦饲料中伏马毒素HPLC检测(一)
伏马毒素起因和特性伏马毒素主要是由串珠镰刀菌菌f.moniliforme和f.proliferatum在一定温度和湿度条件下繁殖所产生的次级代谢产物。直到1988年,南非和美国的研究人员才首次从霉变的玉米中分离出伏马毒素(fumonisins)b1。到目前为止,发现的伏马菌素有FA1、FA2、FB1
黄曲霉毒素检测方法液相色谱法(HPLC)
HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素(例如:
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
液相色谱法(HPLC)检测黄曲霉的方法介绍
HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素(例如:
选购HPLC时应考虑的几个常见问题(一)
HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。
hplc检测葡萄糖的吸收波长是多少nm
202nm。根据查询维普网得知,葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛分子具有共轭双烯结构,hplc检测葡萄糖的吸收波长是202nm。葡萄糖又称为血糖、玉米葡糖、玉蜀黍糖,甚至简称为葡糖,分子式C6H12O6,是自然界分布最广且最为重要的一种单糖,葡萄糖是一种多羟基醛。
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
HPLC四大常见故障及解决方法
【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 常见问题及解决方法 一、柱压问题 柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好
HPLC分析时峰面积差别很大的原因及解决
液相色谱分析中进样基线很好,保留时间能锁定,压力也稳定,但是峰面积差别很大,大概有2倍的差别,这种情况出现的原因可能是多方面的,建议采用以下方法解决: 1 调换一根新色谱柱,如果情况一样,则排除柱子的原因。 2 将在线过滤器拆下,用超声波清洗,如果结果一样,说明与在线过滤器无关。 3 考虑是不
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
沃特世携最新ACQUITY-Arc系统参展HPLC-2015
分析测试百科网讯 2015年9月21-25日,第43届国际HPLC及相关技术学术会议在北京国际会议中心召开。本届会议上,沃特世携ACQUITY Arc、ACQUITY UPC2、ACQUITY QDa等多款最新仪器及解决方案参展。沃特世展台 ACQUITY Arc
离子色谱与高效液相色谱(HPLC)有什么不同
离子色谱和HPLC本质上是一样的,结构几乎一样,只是离子色谱用于测试阴阳离子,液相色谱用于测试有机物,色谱分离系统有些差异,IC用离子交换柱,LC用吸附柱。
HPLC压力波动较大原因分析及解决方法
1、管道中有气体,流动相脱气不充分。解决方法:流动相继续脱气或改变脱气方法(如在线脱气等)。2、单向阀、泵密封损坏。解决方法:更换单向阀和泵。3、流动相粘度变化引起压力波动。解决方法:改用溶剂梯度洗脱。
HPLC分析样品时出现倒峰是怎么回事
最主要是和你的样品有关,再者就是和你的流动相有关。比如说样品溶剂用的不是乙腈,有时出再这样的问题,再者是你的流动相和你的样品本身问题,有一些盐类也经常这样我们遇到这样的问题多是更换一下溶剂,不行再调整流动相,还不行就把波长调高就可以了,这在做HPLC时也很正常。
做HPLC或者紫外用DMSO做溶剂可以吗
做紫外的时候没有问题,拿dmso做参比就是了。做hplc的时候有点问题就是,dmso与流动相的相溶性问题,相容性不好,出的峰肯定很丑。
饲料中黄曲霉毒素检测方案—HPLC法
黄曲霉毒素危害:黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液,动物饲料相关的产品中。其毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性,其中以B1毒性最大。当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪
HPLC常见问题和解决方法-泵漏液
泵漏液原 因解决方法1、单向阀松动1、a、拧紧单向阀(不必拧的过紧)b、更换单向阀2、接头松动2、拧紧接头(不必拧的过紧)3、混合器密封损坏3、a、更换混合器密封b、更换混合器4、泵密封损坏4、维修或更换泵密封件5、压力传感器损坏5、维修或更换压力传感器6、脉冲阻尼器损坏6、更换脉冲阻尼器7、比例阀
影响HPLC保留时间漂移因素有哪些?如何解决?
如若发生保留时间漂移,首先需要考虑流动相是否已使色谱柱达到充分的平衡。一般情况下,流动相平衡色谱柱需要10-20个柱体积;但如果流动相中有使用弱酸、弱碱、缓冲盐和离子对试剂,则需要更长的时间来平衡色谱柱。还有可能是流动相受到污染(水是最容易受到污染的流动相成分),存在于流动相中的小分子污染物会在
土壤和沉积物-多环芳烃HPLC的测定
本标准规定了测定土壤和沉积物中多环芳烃的高效液相色谱法。本标准适用于土壤和沉积物中16种多环芳烃的测定,包括萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、?、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并 (a)芘、二苯并(a,h)蒽、苯并(g,h,i)苝、茚并1,2,3-c,d) 芘。当取样量为10.0