HPLC是做什么的?原理?操作方法?

HPLC是高效液相色谱,英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。操作方法:如下图所示,溶剂贮器中的流动相被泵吸入,经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经测其压力和流量,导入进样阀(器)经保护柱、分离柱后到检测器检测,由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图,馏分收集器收集馏分,废......阅读全文

一根hplc色谱柱一般能用多久

这与很多因素有关,色谱柱本身的质量、进样夜干净程度、负荷量、保养等因素有关。如果保养得当,不是经常超负荷,用个一年半载没问题,不过你始终要知道色谱柱是一种耗材。

HPLC测定双黄连口服液黄芩苷含量

方案优势      本法快速准确,杂质分离完好,重现性好。              采用标准      国家相关保准          方法/原理/步骤      试验方法和结果 1 对照品液的制备 精密称取黄芩苷对照品20.60mg,置200ml量瓶中,加50%甲醇适量,置水

HPLC测定开光复明丸中黄芩苷的含量

开光复明丸为《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第3册收载品种[1],是由栀子、黄芩等18味中药组成的复方制剂,具有清热散风,退翳明目等作用。用于肝肺热盛引起爆发火眼,红肿痛痒,眼睑赤烂,云翳气蒙,羞明多眵。黄芩的有效成分为黄芩苷、黄芩苷元、二氢黄酮等黄酮类化合物,现代药理试验证明

半制备型hplc的最大上样量可以到多少

可以,但要考虑样品的极性大小选择适当的色谱柱和其它色谱条件,通常分析型HPLC进样一次可得到1mg样品;半制备型的HPLC视进样量而定,一般一次可得到不少于100mg的样品。选定合适的色谱条件是关键。

蒸发光散射检测器克服常见的HPLC检测难题

虽然蒸发光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年,但是对于许多色谱工作者来说,它仍是一个新产品。第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的,并在八十年代初转化为商品,八十年代以激光为光

方案15标准条件下肽段的反相-HPLC实验

实验材料通过蛋白质消化得到的肽段混合物试剂、试剂盒乙腈去离子水蛋白质标准品三氟乙酸(TFAHPLC级)仪器、耗材HPLC 层析系统带帽的聚丙烯试管反相层析柱实验步骤展开

HPLC六通阀进样器的使用及保养

六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。工作原理:1、手柄位进样(Load)位置时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量环充满后,多余样品从

食品中香兰素的高效液相色谱仪(HPLC)检测方案

  香兰素(Vanillin),又名香草醛,为一种广泛使用的可食用香料,可在香荚兰的种子中找到,也可以人工合成,有浓烈奶香气息。广泛运用在各种需要增加奶香气息的调香食品中,如蛋糕、冷饮、巧克力、糖果;还可用于香皂、牙膏、香水、橡胶、塑料、医药品。   目前还没有相关报道说香兰素对人体有害。但是

HPLC六通阀进样器的使用及保养

六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。工作原理:1、手柄位进样(Load)位置时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量环充满后,多余样品从

利用CORTECS实心核颗粒色谱柱进行HPLC梯度方法转换

简介将使用填充了大颗粒的大体积色谱柱的HPLC梯度方法转换至填充高效CORTECS 2.7 μm颗粒的小体积色谱柱,可轻松缩短分析时间、节省溶剂与样品消耗量,最终节约成本。在转换HPLC梯度方法时,可通过适当调整方法条件和选择相当的色谱柱填料来避免对色谱分离性能的影响。下述应用纪要展示了针对阿巴

做HPLC为何会出现“胖”峰和平头峰?怎样避免?

用比流动相强度大的大体积样品进样,通常会损害色谱图的质量,而出现“胖”峰和平头峰。应遵循下列规则选用溶剂溶解样品: a.最好用流动相溶解样品进样; b.用大体积弱溶剂溶解样品,如,反相色谱中用水溶解样品进样,主要缺点是每次进样后在色谱图的开头出现大的负峰,有时还波及到样品峰; c.需要时

有效规避HPLC使用过程中的问题(一)

  对高效液相色谱(HPLC)仪的生命周期进行风险评估的真正意义是什么?如何帮助用户解决操作色谱仪过程中遇到的问题,从而使其在性能认证(PQ)过程中被发现或在操作认证(OQ)过程中避免?本文会一一说明并助您探寻PQ与OQ在生命周期设计认证(DQ)阶段所起的作用。   GxP法规实验室必须对色谱仪

用HPLC进行分析时保留时间发生漂移如何解决?

  用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决?   关于漂移问题:   ①温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定;   ②流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等;   ③柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡;  

赛默飞四通道HPLC通过FDA许可

  分析测试百科网讯 临床实验室的LC-MS需要高通量的分离水平,现在有一种新型的四通道,高性能的液相色谱可以用来增加临床实验室的样品分离的通量和效率,  赛默飞的LX-4 MD HPLC被列入FDA的I类一般临床使用的医疗卫生器械,有四个平行的通道,可以同时四项分离在同一台仪器中,是一个单通道HP

HPLC日常维护之:谱图问题解决方法

  液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。  A、峰拖尾  B、峰前延  C、峰分叉  D、峰变形  E、早出的峰变形  F、早出的峰拖尾

打击瘦肉精的有力武器―Waters-breeze2-HPLC

    瘦肉精(Clenbuterol),是一种非常廉价的药品,用于减少脂肪增加瘦肉,让猪的单位经济价值提升,添加了瘦肉精的肉制品有很危险的副作用,重则会导致心脏病。目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂的药物,比如在中国造成中毒的克仑特罗。      针对这一现

海能-HPLC7000-检测白酒中的塑化剂

   塑化剂是一种环境荷尔蒙,其毒性远高于三聚氰胺,会造成免疫力及生殖力下降。对身体健康影响最大的是导致心血管疾病,其次是肝脏疾病、泌尿系统疾病,然后是生殖方面的疾病,比如损害男性生殖能力,促使女性性早熟,造成儿童性别错乱等。具有潜在的生殖毒性、致癌性、胎儿畸形和引起基因突变的的危害性,国家卫生部在

SCIEX可以租用啦!-1+1质谱租赁+HPLC租赁

  液相色谱-串联质谱联用技术,是一种专属性强,快速,灵敏高的现代化高级分析技术,可以提高每天的分析效率。  基本配置  质谱分析仪+HPLC  产品优势  门槛低:满足基本条件,支付租金即可使用  方案活:(方案灵活多样) 租赁期满(3年后)有良好的扩展性可满足各类用户需求  全保障:提

HPLC使用中常见的柱压问题及解决方法

  柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。   1 压力过高  

上海药检系统10台HPLC等药检仪器中标公告

  上海市上投招标公司受用户委托,就上海市食药检系统检测设备采购及服务项目招标事宜,于2011年7月28日组织专家评标,现经评标委员会评审,现将本次采购结果公布如下:  1.招标编号:SITEN-SX6-NE11144  2.中标情况:包号货物名称数量中标商名称中标金额(元)1摩尔分子超纯水仪等11

HPLC六通阀进样器的使用及保养

  六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。   工作原理:   1、手柄位进样(Load)位置时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量

非还原型蛋白和还原型蛋白反相hplc的不同

反向色谱是流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,它的洗脱能力就减小,因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。

非还原型蛋白和还原型蛋白反相hplc的不同

反向色谱是流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,它的洗脱能力就减小,因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。

半制备型hplc的最大上样量可以到多少

可以,但要考虑样品的极性大小选择适当的色谱柱和其它色谱条件,通常分析型HPLC进样一次可得到1mg样品;半制备型的HPLC视进样量而定,一般一次可得到不少于100mg的样品。选定合适的色谱条件是关键

液相色谱仪HPLC测定乳粉中维生素C

 维生素C是一种水溶性维生素,是人体必需营养素,严重缺乏会导致坏血病,因此它又被称为抗坏血酸。人体无法对维生素C进行合成,只能通过食物摄取。婴幼儿配方奶粉中的维生素对婴幼儿的健康成长尤为重要,尤其对无法进行母乳喂养、将配方奶粉作为主要营养来源的婴儿而言。本文对乳粉中维生素C的液相色谱法进行研究,对样

HPLC常见问题和解决方法接头处漏液

  压力波动原 因解决方法1、泵中有气体1、a、溶剂脱气b、从泵中除去气体2、单向阀损坏2、更换单向阀3、泵密封损坏3、更换泵密封4、脱气不充分4、a、溶剂脱气b、改变脱气方法(使用在线脱气法等)5、系统漏液5、确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动

蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南(六)

蛋白质在高温或高pH值下会降解。在胁迫条件下,最有可能发生的化学降解是酰胺侧链上的天冬酰胺转变为天冬氨酸或异天冬氨酸(图37)。天冬酰胺脱去酰氨基时,许多蛋白都会失去生物活性,但也有部分蛋白的生物活性不受影响。即使脱酰胺作用不造成生物活性的减弱,脱酰胺作用也是蛋白接触不利条件的指示。特定天冬酰胺残基

HPLC液相成分要求柱温高是什么原因?

  相同条件下升高柱温,会增大色谱柱的分离能力而提高分离度。

HPLC中峰的相对保留时间是怎么计算的

正常的,证明第二种流动相的柱效更好,计算一下分离度,也就是R可以知道分离度更好。是否有利于谱图的观察可以通过计算分离度得到,分离度越大越好,一般超过1.5就认为完全分离。柱效通过理论踏板数表示,表明你的柱子的对这个样品的分离能力。分离度R表明你的柱子对这两种样品的分离能力。