关于高层培养基的概述
固体培养基solid culture medium 的一种形式;制作时应趁热定量分装在试管内,直立凝固而制成的称为高层培养基, 高层培养基:这样接入菌种后虽然发育的面小了一点,但培养基的厚度增大,营养丰富,时间长些也不容易干燥、开裂。常用于保存菌种。 与高层培养基相对和并列的概念是:斜面培养基、平面培养基。斜面培养基制作时应趁热定量分装于试管内,并凝固成斜面的称为斜面培养基,用于菌种扩大转管及菌种保藏;固体培养基制作时趁热定量分倒在培养皿内,凝固成平面的称为平板培养基,用于菌种分离及研究菌类的某些特性。......阅读全文
关于高层培养基的概述
固体培养基solid culture medium 的一种形式;制作时应趁热定量分装在试管内,直立凝固而制成的称为高层培养基, 高层培养基:这样接入菌种后虽然发育的面小了一点,但培养基的厚度增大,营养丰富,时间长些也不容易干燥、开裂。常用于保存菌种。 与高层培养基相对和并列的概念是:斜面培养
培养基的概述
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。 培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌
液体培养基的概述
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。 液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养
无血清培养基的概述
无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。 无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。 用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘
细胞培养基本技术概述(一)
无菌操作基本技术 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或
细胞培养基本技术概述(五)
实验用品 1. 种类︰ 1.1. 细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与pasteur pipet 外,其它均为塑料无菌 制品。 1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等,依
细胞培养基本技术概述(二)
培养基 1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37 oC 水槽中温热。 2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。 3. 粉末培养基配制(以1 升为例): 3.1. 细胞培
细胞培养基本技术概述(六)
抗生素 1. 细胞库之细胞培养基不加抗生素 1.1. 培养自ATCC 引进之细胞株,培养基中不加抗生素。 1.2. 培养自其它实验室引进之细胞株,制作token freeze 前培养基须添加抗生素,待token freeze 通过污染测试后,大量培养时则不加抗生素。 2. 寄送活细胞时,须将培养液充
细胞培养基本技术概述(三)
血清 1. 血清必须贮存于–20 ~ -70 oC,若存放于4 oC,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2. 一般厂商提供之血清为无菌,不需再
细胞培养基本技术概述(四)
细胞传代培养 1. 细胞生长至高密度时,即须分殖至新的培养瓶中,一般稀释比例为1:3 至1:6,依细胞种类而异。 2. 材料: 2.1. 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
细胞培养基本技术概述(七)
冷冻细胞活化 1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/
概述无血清培养基的使用方法
血清仍是动物细胞培养中最基本的的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液。细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞
关于固体培养基形式—平板培养基的简介
培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。 平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定
关于固体培养基的形式—制作斜面培养基和平板培养基的介绍
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。 (1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。 (2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台
关于平板培养基的简介
培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。 平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定
关于发酵培养基的简介
发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生
关于培养基的那些事儿
对于培养基相信科研朋友们并不陌生,那您知道不同类型的培养基需要用不同方法贮存吗?一、商品化即用型培养基:应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行保存和使用。二、脱水合成培养基:对于脱水合成培养基,应保存有效的培养基目录清单,清单应包括以下内容:容器密闭性检查;2.记录首次开封日期;3.内
关于培养基的灭菌处理
要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使
关于孢子培养基的简介
孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基,对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长,产生较多优质的孢子,并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是: 第一,营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生
关于组合培养基的介绍
合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如。高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种
关于培养基的物理分类
液体培养基 80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。 固体培养基 一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。 半固体培养基 指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。 脱水培养基 又称
关于培养基的配置介绍
1.配料 配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。 2.溶解 淀粉溶解:少量冷水调成糊状 加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
关于增殖培养基的简介
增殖培养基是发酵过程或动植物细胞大量培养中供微生物或动、植物细胞的生长、繁殖或积累代谢产物,以合成生物化工产品所必需的营养基质。 培养基的选择应根据微生物生长代谢活动的需要,并有利于合成细胞物质和生物化工产品的生成。培养基中主要含有水、碳源(能源)、氮源、矿物质,有的还需要提供维生素等。在酶反
关于固体培养基的形式—斜面培养基的基本介绍
斜面培养基(agarslantculture-medium ):固体培养基(solid culture medium )的一种形式;制作时应趁热定量分装于试管内,并凝固成斜面的称为斜面培养基,用于菌种扩大转管及菌种保藏。 与斜面培养基相对和并列的概念是:平面培养基、高层培养基。固体培养基倒在培
关于固体培养基的形式—快速制作斜面培养基和平板培养基的介绍
有一种简捷快速制备斜面培养基的方法,现介绍如下: 制作培养基斜面,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。 1、将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。
关于半固体培养基的介绍
半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。 固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。 半固体
关于半合成培养基的简介
半合成培养基又称半组合培养基,指用天然原料加入一定的化学试剂配制而成的培养基。其中天然成分提供碳、氮源和生长素,化学试剂补充各种无机盐。 根据营养物质的来源,可将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。天然培养基虽然配制方便、营养丰富,但是它们的具体成分不清楚或不恒定;合成培养基虽然成
关于hat培养基的基本介绍
缺失这两种酶之一的细胞,在HAT培养基中,应该不能生存,只有发生融合或者其他情况下,才能使细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。 HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对£具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径(denovopathway)和中间合成途径(s
关于发酵培养基的基本介绍
发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,要求发酵培养基的组成应丰富、完全,碳、氮源要注意速效和迟效的互相搭配,少用速效营养,多加迟效营养;还要考虑适当的碳氮比,加缓冲剂稳定pH值;并且还要有菌体生长所需
关于增殖培养基的成分介绍
培养基的成分包括:碳源、氮源、矿物质,以及其他必需物质。这些成分通过生物反应过程,生成生物物质、生物化工产品,并放出CO2、H2O和热量。 培养基的成分还可以由发酵过程中所需的元素出发,如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要时还有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co