关于比浊法的基本原理的介绍
比浊法的主要依据是悬浊液中的颗粒对光线的散射的性质。当一束光线通过悬浊液时,液体中颗粒的大小若小于入射光相应减弱。在一定条件下散射光的程度(或透射光减弱的程度)和悬浊液中颗粒的数量成比例关系。其变化可用下式表示:[3] 其中,I为透射光强度,为入射光强度,b为光径,为浊度。上式和比尔定律公式相似,故比色的程度方法,标准曲线制备,计算公式以及仪器等,同样都适用于比浊法。 当光束通过一含有悬浮质点的介质时,由于悬浮质点对光的散射作用和选择性的吸收,使透射光的强度减弱。 在分析时,必须先做工作曲线,以s对已知散射物的浓度c作图。显然,比浊法和比色法所依据的原理是相同的,实验方法也相似。通常,比色计或分光光度计都可用于比浊分析。也有专门用于比浊分析的仪器,即浊度计或比浊计。 采用这种光散射测量技术必须注意: ①该法适合于分析混浊度较大的样品,光束通过试样后,透射光强度应有显著减弱。I0与I相差较大,则测量误差较小。 ②在......阅读全文
免疫比浊法的注意事项及方法分类
注意事项 抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在 沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2
细菌浓度的简单确定法:麦氏比浊法
麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。麦氏比浊管的配比如下: 管 号 (McFarland)0.5123450.25%BaCl 2 ( ml )0.20
细菌浓度的简单确定法:麦氏比浊法
麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。 麦氏比浊管的配比如下: 操作方法:1、轻摇标准试管。2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直
细菌浓度的简单确定法:麦氏比浊法
麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。 麦氏比浊管的配比如下: 操作方法:1、轻摇标准试管。2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直
比浊测定的方法作用
中文名称比浊测定英文名称nephelometry test定 义一种定量检测抗原的试验。即抗原与抗体在液相中结合而形成可见的复合物,在测定仪中光线〔激光或红外光〕照射下,发生光散射〔散射比浊〕或光通量减少〔透射比浊〕。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
抗原抗体结合动态测定方法—免疫比浊法的基本信息介绍
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。 其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应
从免疫学基本原理到免疫比浊技术的应用
一谈到免疫学,离不开的就是抗原和抗体,之前简单谈过有关医学免疫学和抗体的制备技术,今天详细介绍抗原抗体的知识以及免疫比浊技术的应用。抗原(Antigen, Ag)是刺激机体产生免疫应答的物质,这里面有应答两个字比较重要,“应”是指抗原刺激机体产生免疫应答产物--抗体或免疫效应细胞,“答”是指相应抗原
乳糜微粒的免疫透射比浊法注意事项
① 关于抗血清:比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯,这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中,apoA-Ⅰ抗血清效价极低,选购试剂
免疫比浊法试验时的注意事项有哪些?
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在 沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2、应维持反应
胶乳颗粒增强比浊法在医学检验中的作用
目前,体液标志蛋白的检测方法主要采用免疫学方法,以酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay,ELISA)、放射免疫测定(Radioimmunoassay,RIA)和胶体金层析法(俗称“金标”)这几种方法为主。ELISA方法虽然在临床上使用了近二十年,但它依然
免疫比浊测定的影响因素
抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。当抗原过量时,形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,这就是高剂量钩状效应。当抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。在反应体系中需保持抗体适当过量,如形成抗原过量则造成测定
比浊测定的作用和原理
中文名称比浊测定英文名称nephelometry test定 义一种定量检测抗原的试验。即抗原与抗体在液相中结合而形成可见的复合物,在测定仪中光线〔激光或红外光〕照射下,发生光散射〔散射比浊〕或光通量减少〔透射比浊〕。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
免疫比浊测定概述
免疫比浊测定(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现
抗原抗体结合动态测定方法—免疫比浊法的发展历程
1、早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等。 2、上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。 3、70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵
麦氏比浊管的使用方法等介绍
【使用方法】 1、 轻摇标准试管。 2、 无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。 3、 以无菌操作向被测定试管加入无菌蒸馏水,直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。 【计算被测培养物试管的浓度】: 1、0.5号麦氏浊度标准管约相当于1.5×10^8个细菌/
免疫比浊测定的注意事项
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过
免疫透射比浊分析的原理
透射比浊法的基本原理是测定一定体积的溶液通过的光线量,当光线通过时,由于溶液中存在的抗原抗体复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射光的减少,测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。原理:抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合物(IC),当光线透过反应溶液时,由于溶液内复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透
免疫比浊测定法的种类
1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成
纳米免疫比浊检测技术
目前,体液标志蛋白的检测方法主要采用免疫学方法,以酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)、放射免疫测定(Radio immunoassay,RIA)和胶体金层析法(俗称“金标”)这几种方法为主。ELISA方法虽然在临床上使用了近二十
麦氏比浊管简介
在微生物学中,通过比对溶液浊度,麦氏比浊管常用来校对细菌悬浮液至某个特定浓度。例如在医药学领域常见的微生物抗药物敏感性试验中,用来测量最小抑菌浓度。 最初的麦氏比浊管是通过混合特定浓度的氯化钡和硫酸,从而形成硫酸钡悬浮液。例如0.5号麦氏比浊管是由0.05毫升1%氯化钡溶液加9.95毫升1 %
比浊法相关术语简介
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。 这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强
抗原抗体结合动态测定方法—免疫比浊法的注意事项
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊法测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2、应维持反应
透射比浊法(turbidimetry)测定血清C3含量
1、原理血样本中C3与抗C3血清在液相中反应,比例合适时形成可溶性免疫复合物。聚乙二醇(PEG6 000)可沉淀其免疫复合物,使溶液的透光率(T)下降。免疫复合物的量与C3和抗C3量呈函数关系,当固定抗C3浓度时,免疫复合物的形成量主要取决于样本中C3的含量,并与其呈正相关。故通过检测溶液吸光度
关于纸层析法的基本原理介绍
纸层析法依据极性相似相溶原理,是以滤纸纤维的结合水为固定相,而以有机溶剂作为流动相。由于样品中各物质分配系数不同,因而扩散速度不同,从而达到分离的目的。 试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的
免疫透射比浊法的仪器工作过程是怎么样的?
工作过程:1.将待检标本和抗原参考品作适当稀释。2.将待测标本和标准抗原溶液(5个浓度抗原标准品)与适当过量的抗血清混合,在一定条件下,抗原抗体反应完成后,在340nm处测定各管吸光度。3.按方程进行曲线拟合,制备剂量-反应曲线,由计算机处理,计算出抗原浓度。
免疫透射比浊分析的实验要求
实验要求:1.溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足够大,分子太小则阻挡不了光线的通过。2.溶液中抗原抗体复合物的数量要足够多,如果数量太少,溶液浊度变化不大,对光通量的影响不大。3.透射比浊是依据溶液中颗粒形成或增加而使透射光减弱的原理来定量检测抗原,检测仍需抗原抗体反应的温育时问,检测时间较长。4.
免疫比浊测定的影响因素有哪些?
1.抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。 形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,这就是高剂量钩状效应。当抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。 在反应体系中需保持抗体适当过量,如形成抗原过量则造成测
免疫比浊分析的影响因素有哪些?
1.抗原抗体比例 2.抗体的质量:R型抗体是免疫比浊法的理想试剂,而且要特异性和亲和力好,纯度和效价高。 3.增浊剂的使用 4.入射光光源和波长 5.结果报告中的计量单位 6.伪浊度:非抗原抗体特异性结合形成的浊度,称为伪浊度,可导致抗原检测结果假性升高。伪浊度形成的原因包括:①混浊标
速率散射比浊法检测补体C3、C4
补体(complement,C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统,约占血清球蛋白总量的10%。补体在血清中的含量相对稳定,不因免疫应答而增加,仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分,按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。补体是一个复杂的反应系统,除了溶解细胞和
免疫比浊测定注意事项
免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。3、易受到脂血的影响。