关于密度梯度离心法的介绍
密度梯度离心法: 液体在离心时,其密度随转轴距离而增加。碱基GC 配对的双链DNA 片段密度较大,利用精密的密度梯度超离心技术可使切割适当片段的不同DNA 按密度大小分布开来。进而通过与某种放射性标记的mRNA 杂交来检验,分离相应的基因。非洲爪蟾rDNA.5sDNA 和海胆组蛋白基因就是这样分离得到的。密度梯度超离心技术不仅可以分离细胞中的DNA,也可以利用它分离到生物细胞中的某些目的基因的mRNA。一般细胞含mRNA 并不丰富,大多数细胞mRNA 只占总RNA 百分之几,mRNA 种类又非常多,各种mRNA 链长短不一,总mRNA 提取出来后,提取到铺在已预制了不同密度层次溶液介质的离心管中,人们可以利用密度梯度超离心技术将大小不同的mRNA 分离在不同密度层次上,然后可以根据所需的mRNA 的大小,在相应层次上提取。......阅读全文
关于密度梯度离心法的介绍
密度梯度离心法: 液体在离心时,其密度随转轴距离而增加。碱基GC 配对的双链DNA 片段密度较大,利用精密的密度梯度超离心技术可使切割适当片段的不同DNA 按密度大小分布开来。进而通过与某种放射性标记的mRNA 杂交来检验,分离相应的基因。非洲爪蟾rDNA.5sDNA 和海胆组蛋白基因就是这样分
关于密度梯度离心法的操作介绍
纯化病毒常用的方法是蔗糖密度梯度离心法,能得到比较纯的病毒。其过程如下: 1、将收集的组织或脏器或其他,用玻璃匀浆器充分研磨后制成悬液,经反复冻融3 次后,置 -20 ℃冰箱中,备用。 2、先以5000g离心15分钟后,获取上清夜,然后再20000g高速离心30分钟后取上清夜。 3、接着1
关于碳纳米管液相分离的密度梯度离心的介绍
密度梯度离心是一种分离细胞的常用方法。其原理是在离心管中加入惰性密度梯度介质,再加入样品溶液,样品在离心力的作用下分配到梯度中的特定位置,在密度梯度不同的区域形成区带.金属性和半导体性碳纳米管与表面活性剂的结合能力不同,在表面活性剂的溶液中,二者产生密度的差异,从而可以通过密度梯度离心实现分离。
关于酶法多肽的传统法介绍
传统获得肽的方法有很多。传统法主要有:酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法等。 ·酸法:用化学强酸催化蛋白质获得多肽的方法叫酸法,此法投资大、占地多、工艺复杂、污染大、分子量难以控制,产品有化学残留,难以形成功能,很难实现工业化生产,至今仍停留在实验室; ·碱法:用化学强碱催化蛋白质的方
密度梯度离心法试验的注意事项介绍
离心前将样品小心铺放在密度梯度溶液表面,离心形成区带。离心后不同大小、不同形状、有一定沉降系数差异的颗粒在密度梯度液中形成若干条界面清楚的不连续区带。再通过虹吸、穿刺或切割离心管的方法将不同区带中的颗粒分开收集,得到所需的物质。 1、梯度介质应具备足够大的溶解度,以形成所需的密度梯度范围。
关于密度梯度离心有关问题的补充说明(二)
(四)转头、离心管的选择l 转头选择:速率一区带(Rate-Zonal)沉降密度梯度离心:选择甩平转头及垂直管转头,大容量选择区带转头。 l 速率-区带上浮密度梯度离心,小容量以甩平转头为主,大容量用区带离心转头;其他各种型式转头(固定角,垂直管,小角度)也可以试用。等密度离心(Isopycin
关于密度梯度离心有关问题的补充说明(一)
(一)离心管及转头密度梯度制备① 手工制备;是主要的也是常用的方法i 阶梯形梯度制备:配置不同密度的梯度液(与离心温度相同),用带恒温装置的阿贝折射仪检测各密度层折射率用于检测密度的正确性,按照由浓至稀薄的顺序分层铺在离心管中;再在梯度液上部或底部铺样品。ii 线性梯度手工制备:把连续梯度分成(5~
关于电泳法—纸电泳法的操作介绍
(1) 纸电泳法— 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0)。取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g,加水4000ml,使溶解。 (2) 纸电泳法— 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜,次日取出,用水漂洗至洗液的pH值不
关于蒸馏法的相关介绍
基于两种同位素分子的挥发性(沸点)的差异,借助于加热液态同位素混合物来实现同位素分离的方法.当同位素混合物被加热并同时存在于气液两相时,易挥发的同位素分子又较多地存在于气相内,而难挥发的同位素分子则较多地存在于液相内.这样,在气相中就浓集了易挥发的同位素,而在液相中浓集了较难挥发的同位素.例如,
关于煮沸灭菌法的介绍
1、定义 是指将待灭菌物置于沸水中灭菌的方法。 煮沸时间通常为30-60分钟。该法灭菌效果较差,常用于注射器、注射针等器皿的消毒。必要时可加入抑菌剂,如三氯叔丁醇、甲酚、氯甲酚等,以提高灭菌效果。 2、注意事项 ①煮沸灭菌的器械必须完全泡在水中,不可露出水面,锅底要放纱布以防止震动; ②
关于吸附法的分析介绍
吸附法是利用多孔性的固体吸附剂将水样中的一种或数种组分吸附于表面,再用适宜溶剂、加热或吹气等方法将预测组分解吸,达到分离和富集的目的。吸附法是利用多孔性固体(吸附剂)吸附污水中某种或几种污染物(吸附质)以回收或去除这些污染物,从而使污水得到净化的方法。在污水处理领域,吸附法主要用于脱除水中的微量
关于层析法的历史介绍
1903年3月21日俄国植物学家茨维特(Michael Tswett,1872-1919)在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文,介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法,并首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值。1906年他在德国植物学
关于压榨法的分类介绍
根据压榨前物料是否进行热处理,压榨法可分为热榨和冷榨。根据残渣是否经浸提后再次压榨,可分为二次压榨法和一次压榨法。 1、压榨法—热榨 原料破碎后经过热处理,可以钝化酶的活性,同时也可抑制微生物的繁殖,保证果汁的质量。此工艺主要适用于核果类和浆果类水果的榨汁。此外,制造红葡萄果汁时,为提高色素
关于层析法的原理介绍
层析法利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异(溶解度、分子极性、分子大小、分子形状、吸附能力、分子亲合力等),使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。 层析法进行时有两个相,一个相称为固定相,另一相称为流动相。由于各组分所受固定相的阻力和流动相的推力影响不同,各组分移动速度也
关于中药干馏法的介绍
干馏法一般温度较高,多在120~450℃进行,但由于原料不同,各物裂解温度不一样,如蛋黄油在280℃左右;竹沥油在350~400℃左右;豆类的干馏物一般在400~450℃制成。药料由于高热处理,产生了复杂的质的变化,形成了新的化合物,如鲜竹、木材、米糠干馏所得的化合物是以不含氮的酸性、酚性物质为
关于果胶的盐析法的介绍
多价金属盐沉淀法,目前在生产上广泛采用。具体方法是:在果胶液中加入一定量的MgCl2、CuCl2或AlCl3然后用氨等调节pH,使之形成碱式金属盐,此碱式金属盐与果胶形成络合物沉淀出来,然后再经过脱盐漂洗和干燥得到果胶成品。具体流程是:橘皮残渣-复水-灭酶-漂洗-沥干-加酸萃取-过滤-加盐沉析-
密度梯度离心的离心原理
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
密度梯度离心的离心原理
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
等密度梯度离心的特点
有些密度相差不大的物质,用一般沉降的离心机是不能分离的,这时候就需要用到等密度梯度离心机进行分离,下面就分离特点分析如下:1.分辨率高,可分离密度差小到0.01-0.02毫克每立方厘米的两个组分。2.抗对流性、抗扰动性能好,能较好地抗温度变化及加减速引起的扰动。3.样品悬浮于梯度介质中不
等密度梯度离心的特点
有些密度相差不大的物质,用一般沉降的离心机是不能分离的,这时候就需要用到等密度梯度离心机进行分离,下面就分离特点分析如下:1.分辨率高,可分离密度差小到0.01-0.02毫克每立方厘米的两个组分。2.抗对流性、抗扰动性能好,能较好地抗温度变化及加减速引起的扰动。3.样品悬浮于梯度介质中不形
密度梯度离心的离心原理
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
关于过滤法的基本介绍
过滤,实质上是使废水通过具有微细孔道的过滤介质,在过滤介质的两侧压强不同,此压差即为过滤的推动力。废水在推动力作用下通过微细孔道,而微粒物质及胶状物质则被介质阻截而不能通过。介质截留的颗粒物质本身同样起过滤介质的作用,将此称为滤层或滤饼。随着过程进行,滤层逐渐增厚,水流的阻力也将增加,使水流量下
关于酶法多肽的起源介绍
酶法多肽一词最早起源于1996年,多肽科学家邹远东用生物酶催化蛋白质获得多肽取得了巨大成功。当年,人民日报海外版对外报道这一消息,引起了世界关注,之后的20年内,中国中央主流媒体相继将邹远东作为中国自主创新的重大典型予以报道: -2005年10月7日,中国共产党十六届五中全会在北京召开,胡锦涛
关于沉淀重量法的基本介绍
沉淀法是重量分析法中应用最广泛的一种方法,这种方法是以沉淀反应为基础,将被测组分转化成难溶化合物沉淀下来,再将沉淀过滤、洗涤、烘干或灼烧,最后称量沉淀的重量。根据沉淀的重量算出待测组分的含量。气化法是通过加热或在试样中加入一种适当的试剂与试样反应,使待测组分转化成挥发性产物,以气体形式排出,然后
关于细胞破碎的机械法介绍
1、高压匀浆破碎法(homogenization) 高压匀浆器是常用的设备,它由可产生高压的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出阀(discharge valve)组成,排出阀具有狭窄的小孔,其大小可以调节。细胞浆液通过止逆阀进入泵体内,在高压下迫使其在排出
关于免疫电镜法的相关介绍
免疫电镜法是指可在分子水平对细胞器等超微结构中的抗原组分进行定位的一种电子显微镜检测技术。电子显微镜,简称电镜或电显,是使用电子来展示物件的内部或表面的显微镜。高速的电子的波长比可见光的波长短(波粒二象性),而显微镜的分辨率受其使用的波长的限制,因此电子显微镜的分辨率(约0.2纳米)远高于光学显
关于静脉法胆道造影的介绍
静脉法胆道造影(Intravenous cholecystograpy and cholangiography)检查前准备:前一天晚餐吃脂肪餐,此后禁食,于次日上午检查,静注前须做造影剂的过敏试验。 静脉法胆道造影的检查步骤:静脉注入50%胆影葡胺(Meglumine lodipamide,B
关于溶胶凝胶法的基本介绍
1846年,法国化学家J.J.Ebelmen发现正硅酸酯在空气中水解时会形成凝胶,从而开创了溶胶-凝胶(Sol-Gel)化学的新纪元。所谓溶胶-凝胶法是以金属烷氧化物为先驱体,通过这种先驱体的水解与缩醇化反应形成溶胶,最后通过缩聚反应形成凝胶制品的一种方法。这是一种制备金属氧化物材料的湿化学方法
关于氧化还原法的介绍
氧化还原法是用氧化剂或还原剂去除水中有害物质的方法。例如,用氯、臭氧或二氧化氯氧化有机物(包括酚);用空气或氯将低价铁、锰氧化为高价铁、锰,使从水中析出。 概念 氧化还原法是用氧化剂或还原剂去除水中有害物质的方法。 应用 如在废水处理中用氯或漂白粉氧化氰根;用硫酸亚铁、二氧化硫或亚硫酸钠
关于电解重量法的基本介绍
电解法又称电重量法。重量分析法的全部数据都是由分析天平称量获得的,不需要基准物质或标准溶液进行比较。由于称量误差一般很小,如果分析方法可靠,操作细心,对常量组分的测定,通常能得到准确的分析结果,测定的相对误差一般不大于0.1%。但重量法操作繁琐,分析周期长,且不适用于微量分析和痕量组分的测定,因