PCR技术的反应特点介绍
特异性强 PCR反应的特异性决定因素为： ①引物与模板DNA特异正确的结合； ②碱基配对原则； ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性； ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合（复性）可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12）量级的起始待测模板扩增到微克（μg=-6）水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位）；在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即......阅读全文
热启动PCR技术的概况和特点
1.概述：尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃，聚合酶在室温仍然有活性。因此，在进行PCR反应配制过程中，以及在热循环刚开始，保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。热启动就是PCR仪达到变性温度再加入Taq DNA聚合酶，从而抑制一种基本成分延迟DNA合成。2.应用：如site-di
PCR（聚合酶链式反应）的反应方法介绍基本的PCR方法
由于各种PCR反应条件(如PCR扩增次数、温度、Taq DNA聚合酶的浓度、引物、氯化镁以及模板DNA)变异极大,应根据具体情况,对各种PCR反应条件进行相应调整。按以下次序,将各成分加入0.2 ml灭菌扩增管中:成分 体积 终
多聚酶链式反应技术（PCR技术）(2)
（2）反应增强剂：PCR反应中加入一定浓度的增强剂如1%～10%二甲基亚砜（DMSO）、5%～20%甘油、非离子去污剂、1.25%～10%甲酰胺和10～100 μg/ml牛血清白蛋白等可提高反应特异性和产量，有些反应只能在这些辅助剂存在时才能进行。（3）热启动PCR：如果PCR反应混合物置于低于Tm
多聚酶链式反应技术（PCR技术）(1)
多聚酶链式反应即PCR（polymerase chain reaction）技术，应用这一技术可以将微量目的基因（DNA片段）扩增一百万倍以上。PCR反应理论的提出和技术的完善对于分子生物学的发展具有特殊的意义，它以敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等优点迅速成为分子生物学研究中应
PCR技术－PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。
PCR技术－PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。
PCR技术－PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也
酶的反应特点介绍
1 高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高，使得反应速率更快;2 专一性:一种酶只能催化一种或一类底物，如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;3多样性:酶的种类很多，迄今为止已发现约4000多种酶，在生物体中的酶远远大于这个数量;4 温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的;5 活性可调
酶的反应特点介绍
1 高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;2 专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;3多样性:酶的种类很多,迄今为止已发现约4000多种酶,在生物体中的酶远远大于这个数量;4 温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的;5 活性可调
介绍PCR仪的分类与反应步骤
工作原理利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制的目的。反应步骤分别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热（至90~95℃）变性，
聚合酶链式反应（PCR）快速PCR技术与快速PCR仪的区别
快速PCR技术与快速PCR仪的区别。 1、模块升温和降温度时间 PCR仪一般会标明升温速度和降温速度,但标的大多是最大变温速度,也就是说是瞬间达到的速度。而与实验相关的平均升降温速度只有极少量厂家标明。以平均2度和4度(能做到平均升降温4度的仪器极少)来计算,从95度降到55度,分别是20秒
离子分子反应质谱仪的技术特点
技术特点 1) 利用三种低能级的源离子(Hg+、Xe+、Kr+)，避免了样品气体分子的碎片化 2) 具有优异的选择性，极大的消除了不同成分间的交叉干扰，特别适用于复杂混合物的实时连续动态检测 3) 能够同时检测ppb、ppm浓度级别的气体组分和百分比级别的气体组分，宽动态范围内的在线气体
主反应与副反应的特点介绍
非平衡组成的混合二甲苯转化为接近热力学平衡组成的二甲苯混合物是主反应之一，同时另一主反应是乙苯转化为二甲苯。在二甲苯异构化催化剂的酸性功能和金属功能上，通过主反应可以达到预期的异构化转化率和乙苯转化率。在主反应发生的同时，伴随着一系列副反应的发生，如乙苯自身、乙苯与二甲苯、二甲苯自身之间的歧化和烷基
Touchdown－PCR技术的概况和特点
1、定义：又称降落PCR.即选定一个温度范围，如50-35℃，每降1-2 ℃进行1-2个循环，然后在50度下进行15个循环。2.原理：随着退火温度的降低，特异性逐步降低，但特异性条带在温度较高时已经扩增出来，其浓度远远超过非特异性条带，随着退火温度的降低，特异性条带优先被扩增。 3.选择初始复
PCR的反应步骤
聚合酶链式反应在热循环设备中进行。PCR仪可以将反应管加热或冷却到每步反应所需的精确的温度。为防止反应体系中液体产生蒸气，通常在反应管上加盖加热的盖子（比加热板温度来的高），或者在反应体系表面加入一层石蜡油。一般PCR反应由20到35个循环组成，包括以下步骤[3]： 1 变性：利用高温（93
PCR的反应条件
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 1. 温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸3个温度点。在标准反应中，双链DNA在90~95℃变性，再迅速冷却至40~60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70~75℃，在 TaqDNA聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。
数字PCR检测技术介绍
数字PCR（Digital PCR-dPCR）技术是一种新的核酸检测和定量方法，又称单分子PCR，它的原理是将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中，在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ，实现“单分子模板PCR扩增”。 扩增结束后，通过阳性反应器的数目“数出”目标
PCR的特点
可靠性高，抗干扰能力强PLC用软件代替大量的中间继电器和时间继电器，仅剩下与输入和输出有关的少量硬件，接线可减少到继电器控制系统的1/10~1/100，因触点接触不良造成的故障大为减少。高可靠性是电气控制设备的关键性能。PLC由于采用现代大规模集成电路技术，采用严格的生产工艺制造，内部电路采取了先进
聚合酶链式反应(PCR)技术
原理聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction PCR)是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。它可以在体外特异地对目的基因进行大量扩增，其巧妙之处在预先设计合成二段分别与待测目的基因二端互补的引物，以起到指向定点的作用；再借助于DNA聚合酶催化的若干次扩增反应后，即可使特
PCR技术的临床应用的介绍
一、感染性疾病 PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10~100基因拷贝，而目前病原体抗原检测方法一般需要105-7个病原体才可检测到。PCR对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题，可判断
PCR技术的循环参数的介绍
1、预变性 （Initial denaturation） 模板DNA完全变性与PCR酶的完全激活对PCR能否成功至关重要，建议加热时间参考试剂说明书，一般未修饰的Taq酶激活时间为两分钟。 2、变性步骤 循环中一般95℃，30秒足以使各种靶DNA序列完全变性，可能的情况下可 缩短该步骤时
关于基因扩增技术—聚合酶链反应的特点介绍
1、高度敏感 理论上基因扩增技术—聚合酶链反应可以按2n倍数扩增DNA十亿倍以上，实际应用已证实可以将极微量的靶DNA成百万倍以上地扩增到足够检测分析量的DNA。能从100万个细胞中检出一个靶细胞，或对诸如病人口液等只含一个感染细胞的标本或仅含0.01pg的感染细胞的特异性片段样品中均可检测。
PCR－组装反应
试剂、试剂盒 氯化镁 Rockstart 缓冲液 three-reaction 主混合液 琼脂糖凝胶 仪器、耗材
PCR反应程序
1．常规程序将PCR反应所需的成分配置完后，在PCR仪上于94-96℃预加热几十秒至几分钟，使模板DNA充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于94℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度（一般50-60℃之间），一般保持30秒钟，使引物与模板充分退火；在72℃保持1分钟（扩增1kb
PCR反应程序
1．常规程序将 PCR 反应所需的成分配置完后，在 PCR 仪上于 94-96℃ 预加热几十秒至几分钟，使模板 DNA 充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于 94℃ 保持 30 秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度（一般 50-60℃ 之间），一般保持 30 秒钟，使引物与模板
PCR－组装反应
试剂、试剂盒 氯化镁Rockstart 缓冲液three-reaction 主混合液琼脂糖凝胶仪器、耗材 PCR 仪 PCR 管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯化镁,35 mmol/LRockstart 缓冲液（http://klentaq.com)three-reaction 主混合液
PCR－组装反应
试剂、试剂盒氯化镁Rockstart 缓冲液three-reaction 主混合液琼脂糖凝胶仪器、耗材PCR 仪PCR 管实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯化镁,35 mmol/LRockstart 缓冲液（http://klentaq.com)three-reaction 主混合液82ul
催化反应特点的介绍
一种催化剂只能选择性地加速特定的反应，从而可能使化学反应朝着几个热力学可能的方向之一进行。催化剂与反应物处于同一相的称均相催化反应(Homogeneous Catalytic Reaction)，处于不同相者称异相催化反应（或多相催化反应）(Heterogeneous Catalytic Rea
游离基反应的特点介绍
1、游离基反应通常在气相或非极性溶剂的液相中进行。 2、游离基反应不受酸或碱的影响，但可被光或过氧化物等引发剂所引发和加速，被游离基抑制剂如分子氧、碘、氧化氮、苯醌或游离基本身所阻止。 3、游离基反应与离子型反应不同，它是一个链锁反应，其历程包括三个步骤：即游离基应的引发、游离基反应链的增长
糖酵解的反应特点介绍
1.糖酵解反应的全过程没有氧的参与。 2.糖酵解反应中释放能量较少。糖以酵解方式进行代谢，只能发生不完全的氧化。 3.糖酵解反应的全过程中有3个限速酶。在糖酵解反应的全过程中。有三步是不可逆反应。这三步反应分别由己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶3个限速酶催化。