基因扩增实验的相关内容介绍
1.PCR热循环仪 2. 移液器（0.1-2.5μL）3.PCR板 实验 试剂 1．10×缓冲液：500mmol/LKCI、100mmol/LTriS·HCI(pH8.3，室温）、15mmol/LMgCl2 2.dNTPMix：2.5mmol/LdATP、2.5mmol/LdCTP、2.5mmol/LdGTP、2.5mmol/LdTTP 3.Tag酶5U/μL： 4.DNA模板1ng／μL： 5.引物1 6.引物2 7.引物溶液 浓度2uM 实验步骤 1．在200ulEppendorf管内配制20ul反应体系 2．按下述程序进行扩增 94℃预变性3min；94℃变性30s；58℃退火30s；72℃延伸1min30s30cycle；72℃延伸4min；4℃ pause 注意事项 1． 引物设计应具有 特异性，依靠引物设计软件进行引物设计；引物分装成多管，不宜反复冻融多次； 2．PCR反应的各种成份......阅读全文
基因扩增的概念
基因扩增是指某一个特定基因的拷贝数选择性地增加而其它基因的拷贝数并未按比例增加的过程。
关于真核生物的基因调控—基因扩增的介绍
另一种改变基因数量而调节基因表达的方式称为基因扩增。基因扩增是细胞短期内大量产生出某一基因拷贝的一种非常手段。某些脊椎动物和昆虫的卵母细胞能够专一性地增加编码核糖体RNA的DNA(rDNA）序列。例如非洲爪蟾(Xenopus laevis）的卵母细胞中的rDNA的拷贝数可由平时的 1500急剧增
基因扩增产物分析方法介绍
PCR扩增DNA片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可帮助判断扩增产物的大小,有助于扩增产物的鉴定,点杂交除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产物的大小,增加检测的特异
全基因组扩增技术介绍
研究人员通常会在下游分析中遭遇DNA样本量有限或不足的问题。QIAGEN的全基因组扩增技术通过以包括单细胞在内的小量样本或珍贵样本扩增获得基因组DNA，解决此类难题。REPLI-g Kit能够准确地复制原始DNA样本，不会造成偏差，扩增后的DNA可以直接应用于广泛的遗传学分析。什么是全基因组扩增(w
实验室基因扩增诊断的质量保证
基因扩增诊断实验室质量保证涉及整个基因扩增检测的所有阶段,即测定分析前的标本采集处理、测定中的核酸提取、扩增和产物分析以及测定后的结果报告等。1、污染(1)污染的来源 在实际工作中,常见有以下几种污染类型:PCR 片段的污染(产物污染);天然基因组 DNA 的污染;试剂污染(贮存液或工作液)以及交
多药抗药基因的表达实验——PCR扩增法
多药抗药基因的表达实验主要用于肿瘤治疗研究。实验方法原理大多MDR细胞膜上出现MDR-1基因及其基因产物P-糖蛋白过度表达。 多药抗药基因的表达实验是通过反转录和PCR的方法来检测这些特定基因的过度表达。实验材料RNA试剂、试剂盒PBS氯仿异丙醇萘酸异硫氰酸肽十二烷基肌酸钠构橼酸钠乙酸钠二疏基乙醇乙
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃
基因扩增实验室检测项目及意义
owtext .5pt" width=221>尖锐湿疣同上渗漏出液，破溃组织单纯疱疹病毒DNA感染 （HSV）疱疹感染，优生优育全血，分泌物，脑脊液 项目临床意义标本种类 EB病毒DNA定量检测（EB） 鼻咽癌早期筛查，恶性淋巴瘤传染性核细胞增多症 血清，鼻咽拭子 肺炎 支原
临床基因扩增检验实验室标本扩增产物分析区的污染防治
下述操作在本区内进行:扩增片段的测定。 核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法,即PCR-ELIS
什么是基因扩增？基因扩增的应用和技术优势
又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域
关于基因扩增技术的基本信息介绍
基因扩增技术又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学
详述PCR仪（基因扩增仪）的分类介绍
PCR仪（基因扩增仪）的类型：PCR仪（基因扩增仪）的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则，结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备，下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PC
三种PCR基因扩增仪的介绍
1. 金属模块式PCR基因扩增仪 此类扩增仪可用于普通0.5ml管、薄壁管DNA扩增和原位DNA扩增，其核心为铝或不锈钢加热块，上面分布数量不等的样品管孔，采用电阻加热、压缩机制冷、半导体调制温度或电子调制温度。该机体积小，升降温速度快，样品基座温度准确、均一度高，自动化程度高，扩增程序容量
临床基因扩增检验实验室样本的处理办法
(一)标本的采集 常用于基因扩增检测的临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。采血液等样本时,应使用一次性密闭容器,如真空采血管。当使用非密闭采样系统时,如尿、分泌物和骨髓的采样,必须注意防止来自采样者的皮屑或分泌物的污染。采样时必须戴一次性手套。
实验室PCR基因扩增仪几大品牌的对比
PCR基因扩增仪在科研研究，教学，医学临床，检验检疫等机构起到了重大的作用，上海巴玖实业有限公司作为PCR基因扩增仪的专业供应商，可为大家提供各个品牌和规格的PCR基因扩增仪。上海巴玖小编来为大家分享实验室PCR基因扩增仪几大品牌的对比！品牌一、美国ABI美国ABI公司应用生物系统公司为基因分析蛋白
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
基因扩增技术的优点
特异性高首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从温泉水中分离到的水
基因扩增仪的用途
用于科研及临床的基因扩增 定性PCR基因扩增 荧光/酶免终点定量DNA基因扩增 基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增 适合国内外各种PCR试剂盒传染病类（各型肝炎病毒、结核杆菌、STD性传播疾病、优生优育、支原体、衣原体、寄生虫等）、肿瘤类（P53、幽门螺杆菌等）、科研类（遗传鉴定、细菌
天然基因扩增的概念
天然基因扩增，也称为染色体复制，或基因复制，是生物分子进化过程中产生新遗传物质的主要机制。它指的是任何含有基因的DNA片段的复制。
目的基因的PCR扩增
实验概要进行目的基因的PCR扩增实验原理PCR（聚合酶链式反应）是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括3个基本步骤：⑴变性：目的双链DNA片段在94℃下解链；⑵退火：两种寡核苷酸引物在适当温度（50℃左右）下与模板上的目的序列通过氢键配对；⑶延伸：在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适
基因扩增技术的定义
又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域
基因扩增技术的原理
PCR扩增DNA的原理是：先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链，然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物，即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段，一般需20-30个碱基对，过少则难保持与DNA
PCR基因扩增仪用途和特点介绍
聚合酶链式反应，简称PCR。聚合酶链式反应是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR基因扩增仪的用途：用于科研及临床的基因扩增定性PCR基因扩增荧光/酶免终点定
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。 实验材料 重悬重组噬斑 贴壁生长良好的
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料 重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材
噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超
基因诊断的扩增片段长度方法的介绍
多态性小卫星DNA和微卫星DNA的长度多态性可以通过PCR扩增后电泳来检出，并用于致病基因的连锁分析，这种诊断方法称为扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism，Amp-FLP）连锁分析法。PCR扩增后，产物即等位片段之间的差别有时只有几个核
临床基因扩增实验室设计有哪些要求
临床基因扩增实验室设计、建设SICOLAB区域划分要求：如下1、原则上，临床基因扩增实验室（标本前处理区、试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区）并有独立的通风系统、缓冲间。2、根据使用仪器的功能，区域可适当合并，例如使用实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核
临床基因扩增检验实验室工作规范（一）
为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，特制定本规范。一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为
临床基因扩增检验实验室工作规范（三）
(七)污染 在实际工作中，常见有以下几种污染类型：扩增片段的污染(产物污染)；天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液)以及标本间交叉污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。临床基因扩增检验实验室中污染的最主要来源是扩增产物的污染。由于一旦发生污染后，再围绕实验室来寻找污染源不仅