噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超声仪5 ml锥形离心管Sorvall 离心机（或相当的离心机）150 cm2 组织培养瓶实验步骤实验试剂准备详见「其他」。1. 将重悬的重组噬斑置于含有冰水的杯状超声仪上，以最大的功率超声 20～30 s。2. 每个噬斑取 250μl （1/2） 感染 12 孔组织培养板中汇片生长的单层细胞。培养 1～2 h，每隔 15 min 轻轻摇动一次。3. 用 1 ml 含有合适筛选试剂的完全 MEM-2.5 培养基覆盖细胞。3 .1 对于 XGPRT 筛选，含有 1/400 体积的 10 mg/ml MPA、1/40 体积的 10 mg/m......阅读全文
噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料 重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。 实验材料 重悬重组噬斑 贴壁生长良好的
重组病毒噬斑筛选实验
实验材料 转染细胞溶解产物 BS-C-1／HuTK-143B／BHK-21／CEF 贴壁生长汇片的细胞 试剂、试剂盒
重组病毒噬斑筛选实验
实验材料转染细胞溶解产物BS-C-1／HuTK-143B／BHK-21／CEF 贴壁生长汇片的细胞试剂、试剂盒完全 2 × 噬斑培养基-5完全MEM-2.5培养基筛选试剂LMP 琼脂糖溶液5-溴脱氧尿苷溶液中性红溶液X-gal溶液X-gluc溶液干冰／乙醇仪器、耗材6孔 35 mm 组织培养板杯状超
重组病毒噬斑筛选实验
实验材料 转染细胞溶解产物BS-C-1／HuTK-143B／BHK-21／CEF 贴壁生长汇片的细胞试剂、试剂盒 完全 2 × 噬斑培养基-5完全MEM-2.5培养基筛选试剂LMP 琼脂糖溶液5-溴脱氧尿苷溶液中性红溶液X-gal溶液X-gluc溶液干冰／乙醇仪器、耗材 6孔 35 mm 组织培养板
噬菌体铺平板产生噬斑实验
实验方法原理 这种方法能从单个噬斑中分离出纯的噬菌体部落，而且可以对噬菌体母液进行浓度测定。实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 麦芽糖培养基仪器、耗材 平板微波炉试管加热器毛细管实验步骤 1. 在含0.2 %麦芽糖和10 mmol/L MgSO4的λ肉汤培养基培养大肠杆菌至饱和。加0.3 ml的大肠杆
噬菌体铺平板产生噬斑实验
连续稀释法 实验方法原理 这种方法能从单个噬斑中分离出纯的噬菌体部落，而且可以对噬菌体母液进行浓度测定。
噬斑的概念
噬斑是在固体培养基上由一个噬菌体复制增殖并裂解宿主菌后形成的溶菌空斑，不同噬菌体噬斑的形态大小不尽相同。通过噬斑计数，可以测定一定体积内的噬菌体单位数目，即噬菌体的数量。
噬菌体铺平板产生噬斑实验——连续稀释法
实验方法原理这种方法能从单个噬斑中分离出纯的噬菌体部落，而且可以对噬菌体母液进行浓度测定。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒麦芽糖培养基仪器、耗材平板微波炉试管加热器毛细管实验步骤1. 在含0.2 %麦芽糖和10 mmol/L MgSO4的λ肉汤培养基培养大肠杆菌至饱和。加0.3 ml的大肠杆菌培养液到
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。1．变性：加
多重－PCR－扩增实验
试剂、试剂盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物仪器、耗材 热循环仪实验步骤 一、材料1. 酶和酶缓冲液Taq 聚合酶许多 Taq 聚合酶都可以用；作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多数需要. 如果需要提高PCR 产物的特异性，应该使用热启动聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附带的
多重－PCR－扩增实验
多重PCR扩增实验可以用于：（1）在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物，或对有多个型别的目的基因进行分型，特别是用一滴血就可检测多种病原体；（2）多重PCR很适宜于成组病原体的检测，如肝炎病毒，肠道致病性细菌，性病，无芽胞厌氧菌，战伤感染细菌及细菌战剂的同时侦检；（3）多种病原体在同一反应管内
多重－PCR－扩增实验
实验方法原理 多重PCR（multiplex PCR），其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定。重PCR的特点有：①高效性在同一PCR反应管内同时
杆状病毒储液制备实验——噬斑试验测定滴度
实验材料对数生长期单层培养的 Sf 9 细胞试剂、试剂盒杆状病毒储液昆虫细胞培养液仪器、耗材琼脂糖顶层覆盖物台盼蓝顶层覆盖物（选用）60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱1.5 ml 带螺口盖的冻存管实验步骤1. 用含 10％ 胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约
噬斑形成单位的定义
中文名称噬斑形成单位英文名称plaque forming unit;pfu定 义表示活噬菌体数时所用的量词。在测定噬菌体滴度的实验中，一个活噬菌体在平皿中形成一个噬斑，称为1 pfu。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
cDNA－扩增和影印实验
实验方法原理 实验材料 保存于细菌中的克隆纯的、已测序确证的人 EST 序列试剂、试剂盒 LB 培养基超级肉汤培养基乙醇裂解液RNA 酶溶液缓冲液乙醇 乙酸溶液丁二酸酐1－甲基－2－吡咯烷酮硼酸钠仪器、耗材 离心机96 孔热循环仪水浴锅微量滴定板清洗仪实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具
cDNA－扩增和影印实验
实验方法原理 实验材料 保存于细菌中的克隆纯的、已测序确证的人 EST 序列 试剂、试剂盒
cDNA－扩增和影印实验
实验材料保存于细菌中的克隆纯的、已测序确证的人 EST 序列试剂、试剂盒LB 培养基超级肉汤培养基乙醇裂解液RNA 酶溶液缓冲液乙醇 乙酸溶液丁二酸酐1－甲基－2－吡咯烷酮硼酸钠仪器、耗材离心机96 孔热循环仪水浴锅微量滴定板清洗仪实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 将密
PCR基因扩增仪实验原理
技术应用实现快速高效均衡扩增检测由光开关阵列、自聚焦透镜和尾纤准直器及变增益微光O/E装置组成的MEMS有机整体，在以16位单片机为核心的电控装置管理下，能在毫秒级时间内完成多个标本快速均衡扫描检测，避免了机械扫描方式或CCD扫描方式引起的时间滞后或渐晕误差。实现标准样本的PCR热循环扩增及高通量实
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
在本方案所描述的反应中，差异 DNA 被选择性地扩增。每个实验至少应该有 4 个反应：①已消减的检测 DNA;②未消减的检测者对照（1-c);③反向消减的检测 DNA;④反向未消减的对照（2-c)。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂
大片段的精确扩增实验
用 10 对不同的引物扩增约 5kb 的片段，模板 DNA 是一样的，反应体系是 50ul, 对照中未加模板，含有单一引物。对于循环数较多（25〜40) 的反应，一般应设置一个没有模板或单引物对照。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒甜菜碱PCR 反应缓冲液TE
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶缓冲液PCR 反应缓冲液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品）3. 核酸和寡核苷
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶缓冲液PCR 反应缓冲液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品）3. 核酸和寡核苷酸DNA 样品（即方案 2 第 16 步中的各消减样品
噬菌体文库的扩增实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 MgSO4麦芽糖琼脂糖氯仿DMSOSM仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅实验步骤 1. 制备铺平板菌（1）2.5 ml 新鲜过夜培养的宿主菌液接种于250 ml 含0.2%麦芽糖和10 mmol/l MgSO4的LB培养液中。（2）在37℃恒温摇床剧烈摇荡2~4 h，
大片段的精确扩增实验
试剂、试剂盒 甜菜碱PCR 反应缓冲液TEN+BSA酶和酶缓冲液核酸及引物仪器、耗材 PCR 仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂灭菌水配制的下列试剂，储存在指定的温度条件下。(1) 5mol/L 甜菜碱（SigmaB-2629 或 SigmaB-2754)过滤灭菌，室溫保存。(2) 10X
大片段的精确扩增实验
试剂、试剂盒 甜菜碱 PCR 反应缓冲液 TEN+BSA 酶和酶缓冲液 核酸及引物 仪器、耗材
噬菌体文库的扩增实验
文库一旦包装就应该尽快进行扩增，它可以大大增加文库的拷贝数，但在扩增时由于克隆的生长速率不同，文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。文库一旦包装就应该尽快进行扩增，它可以大大增加文库的拷贝数，但
噬菌体文库的扩增实验
基本方案 实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒
临床基因扩增实验的概述
临床基因扩增实验又称PCR实验，是专门用来检验艾滋病、 乙型肝炎、禽疫病等病毒 感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些病毒含量不高的 感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有 灵敏度高、 特异性高、快捷、对 样品