耐热DNA聚合酶的应用介绍
DNA序列测定中应用的耐热DNA聚合酶 1.Promega公司测序级TaqDNA聚合酶 是在TaqDNA聚合酶的基础上对它进行修饰,去除5'-3'外切酶活性,保证测序记过的高度准确性,可产生强度均一的测序条带,背景清晰。 2.Bca Best DNA 聚合酶 从Bacillus Caldotenax YT-G菌株中提纯,并使其5'-3'外切酶活性缺失的DNA聚合酶。它的伸长性能优越；可抑制DNA二级结构形成,可以得到均一的DNA测序带。 3.Sac DNA 聚合酶 从酸热浴流化裂片菌中分离,无3'-5'外切酶活性,可用于DNA测序,但测序反应中ddNTP/dNTP的比率要高。......阅读全文
DNA聚合酶的研究历史
1953年，沃森和克里克发表了经典论文，描述DNA的化学结构，而一些科学家对它的重要性提出了最初的质疑。两人在论文中提出，DNA的复制原理仍有待确定。当时，美国生物化学家阿瑟·科恩伯格正在密苏里州圣路易斯市的华盛顿大学微生物学系工作，他认可了这篇论文的重要意义。由此，他开始对机体合成核酸的过程产生了
DNA聚合酶的功能简介
DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是
关于DNA聚合酶的聚合作用的介绍
在引物RNA'-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。 酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有 催化作用。dNTP进入结合位点后，可能使酶的 构象发生变化，促进3'-OH与5&#
聚合酶链反应的常规应用介绍
用于治疗感染性疾病，肿瘤及遗传病。感染性疾病PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10~100基因拷贝，而目前病原体抗原检测方法一般需要105-7个病原体才可检测到。PCR对病原体的检测解决了免疫学检测的
DNA的化学检测项目介绍聚合酶链反应技术
聚合酶链反应技术介绍： 聚合酶链反应技术诊断幽门螺旋杆菌是否存在仅需微量的DNA，而不需要活菌存在(这不同于其他幽门螺旋杆菌检测方法)，它不仅可以检测胃内幽门螺旋杆菌，还可望检出胃以外部位，如牙斑、粪便内的幽门螺旋杆菌，还可用于流行病学调查，它的敏感性远远超过了其他方法，有利于确定细菌感染的来源及
DNA聚合酶的用途和缺陷
用途聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶扩增的PCR产物，3’末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基，而这个碱基几乎总是A，因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性，故可用T载体克隆。缺点无3’→5’阅读校正功能，在PCR扩增过程可引起错配，30次循环
可以DNA结合的酶聚合酶
聚合酶：聚合酶是从核苷三磷酸合成多核苷酸链的酶。它们通过向链上存在的先前核苷酸的3'-OH添加核苷酸起作用。因此，所有聚合酶都以5' - 3'方向起作用。DNA复制需要DNA依赖的DNA聚合酶，实现DNA序列的完美拷贝。有些DNA聚合酶具有校对功能，能够检测含氮碱基之间的错配
关于DNA聚合酶的历史简介
在50年代的中期，A. Kornberg和他的同事们就想到DNA的复制必然是一种酶的催化作用，于是决心分离出这种酶并研究其结构和作用机制。为了达到这个目的，他们分离的蛋白，然后加到体外合成系统中即 同位素标记的dNTP、Mg2+及模板DNA，经过大量的工作，于1956年终于发现了DNA聚合酶Ⅰ（
反义DNA的应用介绍
反义DNA 被广泛地应用于反义技术中用以“封闭”或“抑制”目的基因表达,被应用的反义DNA多采用化学合成法得到,长度一般在8～28bp,1978年Zamecnik首次利用13bp的反义DNA抑制劳氏肉瘤病毒(RSV)增殖。为了提高半衰期对天然结构反义DNA片断的加工和修饰也应运而生,相继出现了甲
什么是DNA聚合酶I？
DNA聚合酶I的二级结构以螺旋为主，可划分为A至R共18个螺旋肽段。螺旋肽段之间由非螺旋结构连接。其中H区与I区之间的无规则结构较长，有50个氨基酸残基，I螺旋与O螺旋之间由较大的空隙，可以容纳DNA链，而50个氨基酸的无规结构，就像一个盖子那样与I、O螺旋区共同把DNA链包围起来，使其向一个方
DNA聚合酶有什么作用
DNA作为遗传物质的基本特点就是能够准确地进行自我复制。在合成DNA时，决定其结构特异性的遗传信息来自其本身，必须由原来存在的DNA分子为模板来合成新的DNA分子。这种以自身DNA为模板，以脱氧核苷酸为底物催化合成新的DNA的酶称为DNA聚合酶。在微生物、植物和动物中都发现有这种酶，而且原核细胞和真
DNA聚合酶有什么作用
DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。DNA聚合酶的共同特点是：⑴需要提
什么是高温DNA聚合酶？
DNA聚合酶也称耐高温DNA聚合酶。1988年，Saiki从嗜热水生真菌Thermus aquatics YT-1株中分离得到，该菌株于1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离出。
DNA的化学检测项目介绍聚合酶链式反应
聚合酶链式反应介绍： 聚合酶链式反应是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。PCR技术类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。聚合酶链式反应正常值： 体内菌群的种类和比例正常，人体处于动态平衡健康状态。聚合酶链式反应临床意义：
Mlu－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Mlu DNA聚合酶英文名称Mlu DNA polymerase定 义来自藤黄微球菌(Micrococcus luteus)的DNA聚合酶。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
Pfu－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Pfu DNA聚合酶英文名称Pfu DNA polymerase定 义存在于嗜热古菌(Pyrococcus furiosus) 的耐热DNA聚合酶，兼具5′→3′DNA聚合酶活性及3′→5′外切酶活性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
Mlu－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Mlu DNA聚合酶英文名称Mlu DNA polymerase定 义来自藤黄微球菌(Micrococcus luteus)的DNA聚合酶。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
Vent－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Vent DNA聚合酶英文名称Vent DNA polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。从极端嗜热细菌(Thermococcus litoralis)中提纯的耐热DNA聚合酶，有3′→5′外切酶活性。用此酶催化的PCR产物为平端。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（
Vent－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Vent DNA聚合酶英文名称Vent DNA polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。从极端嗜热细菌(Thermococcus litoralis)中提纯的耐热DNA聚合酶，有3′→5′外切酶活性。用此酶催化的PCR产物为平端。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（
Pfu－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Pfu DNA聚合酶英文名称Pfu DNA polymerase定 义存在于嗜热古菌(Pyrococcus furiosus) 的耐热DNA聚合酶，兼具5′→3′DNA聚合酶活性及3′→5′外切酶活性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
关于DNA聚合酶I的功能简介
1）通过核苷酸聚合反应，使DNA链沿5’→3’方向延长（DNA聚合酶活性） 2）催化由3’端水解DNA链（3’→ 5’核酸外切酶活性，用于切除错配的碱基） 3）催化由5’端水解DNA链（5’→ 3’核酸外切酶活性，用于切除引物） 4）催化由3’端使DNA链发生焦磷酸解 5）催化无机焦磷酸
DNA聚合酶的特性、用途和缺点
特性良好的热稳定性;70℃ 2h，残留90%活性;93℃ 2h，残留60%活性;94℃ 2h，残留40%活性。5'→3'聚合酶活性，对dATP有优先聚合活性;5'→3'外切酶活性;无3'→5'外切酶活性。用途聚合酶链反应(polymerase chai
Tth－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Tth DNA聚合酶英文名称Tth DNA polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。存在于嗜热细菌(Thermus thermophilus) 的耐热DNA聚合酶，有逆转录活性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
Tth－DNA聚合酶的基本信息
中文名称Tth DNA聚合酶英文名称Tth DNA polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。存在于嗜热细菌(Thermus thermophilus) 的耐热DNA聚合酶，有逆转录活性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
DNA聚合酶与复制的保真性
DNA复制的保真性是遗传信息稳定传代的保证。生物体至少有3种机制实现保真性：①遵守严格的碱基配对规律；②5’—3’聚合酶活性中心对底物的选择，使核苷酸的错配率仅为10-4~10-5；③3’—5’外切酶活性中心在复制出错时的即时校对，使错配率降至10-6~10-8。
Taq－DNA－聚合酶的基本信息
中文名称Taq DNA 聚合酶英文名称Taq DNA polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)的嗜热DNA聚合酶，可在74℃复制DNA，在95℃仍具有酶活力。该酶可在离体条件下，以DNA为模板，延伸引物，合成双链DNA。这个酶只有
Taq－DNA－聚合酶的基本信息
中文名称Taq DNA 聚合酶英文名称Taq DNA polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)的嗜热DNA聚合酶，可在74℃复制DNA，在95℃仍具有酶活力。该酶可在离体条件下，以DNA为模板，延伸引物，合成双链DNA。这个酶只有
T4DNA聚合酶的用途
(1)利用取代合成反应制备探针(2)标记具有平末端的或具有3’－隐蔽末端的DNA片段利用较强的3 ′→ 5 ′外切酶活性和 5′→3′聚合活性(3)用于DNA序列分析
DNA聚合酶及DNA连接酶的功能和区别
DNA聚合酶，以已有的核酸序列作为模板，将4种脱氧核苷酸（A、T、G、C）按照模板的碱基排列顺序，以“碱基互补原则”依次连接，聚合成为一条新的DNA链。 DNA连接酶，是将DNA片段上的缺刻连接起来的酶。 一、DNA聚合酶 （一）DNA聚合酶I DNA聚合酶I（DNA pol
聚合酶链反应构建重组DNA
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE无水乙醇DNA聚合酶CTP仪器、耗材 电泳仪离心机PCR仪实验步骤 1. 制备模板DNA，如DNA不是经氯化铯梯度纯化的，100℃煮沸10 min 以灭活核酸酶。 2. 制备寡核苷酸引物，若PCR产物要进行平端克隆，就应该对引物的5’端羟基进行磷酸化处理。 图一