动物细胞培养的基础培养基的介绍

细胞培养基成分复杂,包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异,这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖,有时也会使用半乳糖代替,这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸(尤其是L-谷氨酰胺)和丙酮酸盐也可作为碳源。 除了营养成分,培养基也会帮助维持培养体系的pH和渗透压。pH的维持依靠一种或多种缓冲液体系,最常见的包括CO2/NaHCO3、磷酸盐和HEPES等,血清也可以作为完全培养基的缓冲液。酚红作为pH指示剂加入培养基中,可通过颜色变化监测pH变化。......阅读全文

哺乳动物细胞的细胞培养

  实验室设计  细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒

概述动物细胞培养的基本过程

  取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触

简述动物细胞培养技术的应用

  (1)生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。  (2)利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点,可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞,以供植皮所需。  (3)培养的动物细胞用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性。

动物细胞培养的基本概念

高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不

动物细胞培养的培养条件简介

  1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。  2、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)  3、血清和血浆 (提供

关于动物细胞培养反应器—搅拌桨的改进介绍

  搅拌桨的形式对细胞生长的影响非常大,这方面的改进主要考虑如何减小细胞所受的剪切力。有人对搅拌桨的形式作了改进,并在反应器内加装了辅件,实验证明改进后的反应器适用于对剪切力敏感的细胞进行高密度培养。反应器采用了一个双螺旋带状搅拌桨,顶部的法兰盖上安装了3块表面挡板。每块挡板相对于径向的夹角为30°

关于动物细胞培养反应器的基本信息介绍

  动物细胞体外培养时,生物反应器是整个培养过程的关键设备,为细胞提供了一个适宜的生长环境,使之快速增殖并形成所需的生物组织制品。由于动物细胞在其形态结构、培养方法以及所需的力学环境等方面均不同于微生物细胞,因而传统的微生物反应器显然已不适用于动物细胞大规模培养,特别是组织工程的需要,促使新型生物反

动物细胞培养主要仪器

一、洁净间摆放的仪器(一)提供细胞培养环境的仪器l.CO2培养箱指能精密控制并提供恒温、恒湿、洁净、恒定CO2浓度的仪器,利用该仪器可使用培养皿、多孔板((6-96孔板)、培养方瓶等进行细胞培养。根据容积大小,有60-190L台式,也有上下堆叠落地式。根据通气状况,一般通CO2和空气,也有3气(CO

动物细胞培养——基本练习

实验方法原理这部分是一名实习生或学生应当首先接触的内容。大部分是简单易懂并易于操作的,为了使实验比较有趣,操作方案和备选方案以相互参考的方式详细列出。每一个操作方案中材料部分的指定数量见操作说明,但可以按比例调节。表2.1中黑体部分的练习是必需的。首先有必要参观介绍组织培养的设施,这可以使实习生.见

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗生...

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗生...

许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月(即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上)。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

如何选择适合自己实验细胞的培养基

天然 VS 合成培养基在动物细胞体外培养实验中,可使用天然培养基(Natural medium)或是合成培养基(Synthetic/Artificial medium) (表1)。● 天然培养基(Natural medium)源于动物体液或组织分离提取,营养成分丰富且各项条件与体内环境相似,所以培养

哺乳动物细胞的细胞培养温度

  维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度;不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能

动物细胞培养的相关内容

  动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。  细胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。

动物细胞培养——水的准备与灭菌

实验方法原理目的纯水,火菌水的常规供应.训练目标在无菌区外正确地进行准备操作。了解水的纯化和制备过程的必要知识。监份:间断的。时间:30min.背景信息超纯水(UPW)的制备和灭菌(见 11.4节.图 5.17,图11.10)。示范材料和操作:准备1几作的监督人要讲解水纯化设备的原理和操作,并示范操

血清在动物细胞培养中的作用

  血清在动物细胞培养中起着多方面的作用:   ①提供细胞生存和增殖所必需的生长调节因子。   ②补充基础培养基中没有或量不足的营养成分。   ③含有一些可供贴壁细胞型细胞贴壁生长的基质成分。   ④提供载体蛋白,可结合维生素、脂质、金属离子等。   ⑤在一些情况下,中和毒性物质

关于动物细胞培养反应器—供氧方式的改进的介绍

  一般情况下搅拌式反应器还常伴有鼓泡,为细胞生长提供所需氧分。由于动物细胞对鼓泡的剪胞生长提供所需氧分。由于动物细胞对鼓泡的剪切也很敏感,所以人们在供氧方式的改进上做了许多工作。笼式供氧是搅拌式动物细胞反应器供氧方式的一种,即气泡用丝网隔开,不与细胞直接接触;反应器既能保证混合效果又有尽可能小的剪

基础培养基的用途是什么?

  基础培养基(basic medium)  基础培养基:含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐,调节 pH7.2~7.6,经灭菌处理后,即为基础液体培养基;如再加入0.3%~0.5%的琼脂,则为基础半固体培养基;加入1%~2%的琼脂,则

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...3

许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月(即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上)。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...4

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

动物细胞培养—清洗与灭菌

实验概要本实验介绍了用于细胞培养的各种器皿的清洗与消毒,有助于掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和滤过除菌法的操作,了解化学消毒法的使用方法。实验原理清洗与消毒是组织培养实验的第一步,是组织培养中工作量最大,也是最基本的步骤。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞养不好与清洗

动物细胞培养——单层细胞的换液

实验方法原理目的给单层细胞换新鲜培养纂。应用用于给快速生长的培养物在传代之间更换培养基,或从一种类型培养基换成另一种培养幕,训练目标加强无菌操作技巧.介绍细胞维持的一个基本原理,即在持续培养周期中更换培养基。让实习生观察培养基并明白耗竭培养基的特征.例如细胞密度和(或)pH降低,并观察有没有污染.r

动物细胞培养——pH标准色阶的制备

实验方法原理目的制备一系列色阶,与实验室通常使用的比色卡很相似,含有简单的培养基或带酚红的盐溶液,调节其pH范围使之包含培养中常见的pH范围。应用在制备培养墓以及换液或传代前川于参照估计pH。训练目标熟悉酚红作为pH指示剂的使用.用注射式过渡器灭菌。监督:开始时连续监督,在之后直到操作完成,可以减少

动物细胞培养基的成分有哪些

  动物细胞培养基有平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液等四种。  平衡盐溶液:  目前常用的平衡盐溶液有乳酸钠和复方氯化钠溶液(1.86%乳酸钠溶液和复方氯化钠溶液之比为1:2)与碳酸氢钠和等渗盐水溶液(1.25%碳酸氢钠溶液和等渗盐水之比为1:2)两种。  天然培养基:  天然培养基

发酵罐的分类和用于动物细胞培养的发酵罐介绍

发酵罐的分类:发酵工业上最常用的是通风搅拌罐。除了通风搅拌发酵罐外,其它型式的发酵罐如:气提式发酵罐,压力循环发酵罐,带超滤膜的发酵罐等。  典型发酵设备:种子制备设备、主发酵设备、辅助设备(无菌空气和培养基的制备)、发酵液预处理设备、粗产品的提取设备、产品精制与干燥设备、流出物回收,利用和处理设备

动物细胞培养的碳酸氢钠和缓冲液的介绍

  细胞的存活和生长,需要CO2同时也会产生少量CO2。在培养基中加入CO2可以与HCO3-形成平衡,所以很多种类的培养基会通过CO2/HCO3-体系平衡pH。CO2直接溶解在培养基中并形成H2CO3。随着细胞代谢并产生更多的CO2,培养基pH下降并导致下面的化学平衡向右移动:  H2O + CO2

什么是基础培养基

  培养基是人工配制的适合细菌生长繁殖的营养物制品, pH调节为7.2~7.6,经灭菌后备用。  基础培养基含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐,调节 pH7.2~7.6,经灭菌处理后,即为基础液体培养基;如再加入0.3%~0.5%的琼

动物细胞培养反应器—搅拌生物反应器的介绍

  搅拌生物反应器靠搅拌桨提供液相搅拌的动力,它有较大的操作范围、良好的混合性和浓度均匀性,因此在生物反应中被广泛使用。但由于动物细胞没有细胞壁的保护,因此对剪切作用十分敏感,直接的机械搅拌很容易对其造成损害,传统的用于微生物的搅拌反应器用作动物细胞的培养显然是不合适的。所以,动物细胞培养中的搅拌式