辣根过氧化物酶实验的HRP的活力测定
1、活力测定:测定k4值的方法操作如下: 取2个比色池(带盖,光程1厘米),按下表加入反应物 *酶液:将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。 加好反应物,摇匀,在470nm 读出OD值,为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中,即刻摇匀并记时,每隔30秒钟读数一次,约5分钟。并记下实验时的室温。 将所测样品的OD值减去相应时间对照的OD值,然后以OD值为纵坐标,时间为横坐标作图。得一直线,计算出平均每分钟光密度的增加值,即求出△x/△t,按公式⑻求出k4值。实际的实验值k4 = 2.2×10,k4 = 3.1×10,而k4 应当为3.3×10。该方法用于测定粗的无细胞提取液误差较大。 因为某些物质可干扰四邻甲氧基连酚的形成。 或不求k4值,而把在上述条件下,每分钟OD470增加0.001所需酶量定为1个HRP活力单位。 2、蛋白质含量的测定: 将酶液适当稀释后,......阅读全文
辣根过氧化物酶实验的HRP的活力测定
1、活力测定:测定k4值的方法操作如下: 取2个比色池(带盖,光程1厘米),按下表加入反应物 *酶液:将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。 加好反应物,摇匀,在470nm 读出OD值,为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中,即刻摇匀并记时
关于辣根过氧化物酶的HRP的活力测定的介绍
1、活力测定:测定k4值的方法操作如下: 取2个比色池(带盖,光程1厘米),按下表加入反应物 *酶液:将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。 加好反应物,摇匀,在470nm 读出OD值,为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中,即刻摇匀并记时
辣根过氧化物酶实验的HRP的制备的简介
⒈水提取: 称取 10斤用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在搅肉机中搅碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水在低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取一次,合并两次滤液,量总体积和度,0。
根系活力的测定实验
实验方法原理根据植物矿质吸收的理论,认为植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性,并假定这时在根系表面均匀地复盖了一层吸附物质的单分子层。因此能根据根系的某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。常用甲烯蓝作为被吸附物质,它的被吸附量可以根据溶液浓度的变化用比色法准确地测出。已知1毫克甲烯蓝成单分子层时占用1.
根系活力的测定实验
实验方法原理 根据植物矿质吸收的理论,认为植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性,并假定这时在根系表面均匀地复盖了一层吸附物质的单分子层。因此能根据根系的某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。常用甲烯蓝作为被吸附物质,它的被吸附量可以根据溶液浓度的变化用比色法准确地测出。已知1毫克甲烯蓝成单分子层时占用1
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、
辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒的应用
活化的过氧化物酶是辣根过氧化物酶(HRP),其天然碳水化合物(糖)已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活性过氧化物酶的这些羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂,如戊二醛偶联更有效,戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除
细胞计数及活力测定实验的实验原理
培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
细胞计数及活力测定实验
台盼兰染色法 实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞
细胞计数及活力测定实验
台盼兰染色法 实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞
细胞计数及活力测定实验
一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
种子生活力的剥皮法快速测定实验
实验方法原理此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料苹果柑桔玉
种子生活力的剥皮法快速测定实验
实验方法原理:此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料:苹果
种子生活力的剥皮法快速测定实验
实验方法原理 此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料 苹果柑
细胞计数和活力测定实验方法
器材和试剂: 1. 倒置相差显微镜,具有10×物镜;2. 标注体积刻度的试管(圆锥形底);3. 改良的Neubauer血细胞计数器;4. 计数器盖玻片;5. 袖珍管或等体积的塑料容器,如试管或离心管;6. 巴斯德吸管(短型和长型);7. 可调体积的微量加样器(100—250μl);8. 无菌枪尖;9
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理 吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也
血清ALP活力的测定
在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。1.血清ALP活性升高:见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移医学教育网整理、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。2.血清ALP活性降低:比较少见,主要见于呆小病,磷酸酶
血清ALP活力的测定
在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。 1.血清ALP活性升高: 见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移医学教育网整理、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。 2.血清ALP活性降低: 比较少见,主要见于呆
酶活力的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定。
酶活力测定的方法
酶活力测定的方法很多,如化学测定法、光学测定法、气体测定法等。酶活力测定均包括两个阶段:首先是在一定条件下,酶与底物反应一段时间,然后再测定反应体系中底物或产物的变化量。一般经过以下几个步骤:(1)根据酶催化的专一性,选择适宜的底物,并配制成一定浓度的底物溶液。所用的底物必须均匀一致,达到酶催化反应
荧光法测定种子生活力实验
实验方法原理 植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很
荧光法测定种子生活力实验
实验方法原理:植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很
荧光法测定种子生活力实验
实验方法原理植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很容
细胞计数及活力的测定
一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
酶的活力测定方法介绍
国内饲料酶的活力测定方法较为混乱,除淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶国家有轻工部标准外(植酸酶测定也有农业部标准),其它酶类测定各公司各行其是。国际生物化学联合会酶委员会对于酶活力一个单位(U)的定义是:在规定的条件下每分钟催化1μmol的底物使之转化生成反应产物所需的酶的量。而国内酶活的表示方法不一
酶的纯化与活力测定
酶的纯化与活力测定在酶学和酶工程的生产和研究中,经常需要进行酶活力的测定,以确定酶量的多少以及变化情况。酶活力测定是在一定条件下测定酶所催化的反应速度。在外界条件相同的情况下,反应速度越大,意味着酶的活力越高。1 酶活力测定的方法酶活力测定的方法很多,如化学测定法、光学测定法、气体测定法等。酶活力测