寡聚核苷酸定点诱变技术的基本原理
寡聚核苷酸定点诱变技术是由加拿大的生物化学家M.史密斯（1932）发明的。其基本原理如下：应用寡聚核苷酸进行DNA的定点诱变时，首先要把含有待突变的DNA片段克隆到MI3噬菌体载体中，MI3噬菌体的正链可以感染具有纤毛的细菌，并在细菌体内进行复制后，以出芽的形式形成新的带有正链DNA的噬菌体。而存留在菌体内的则是双链状态的复制型MI3。受MI3噬菌体感染的细菌生长速度减慢，在细菌培养皿上会形成透明的噬菌斑。......阅读全文
荧光原位杂交的基本信息
中文名荧光原位杂交外文名Fluorescence in situ hybridization简 写FISH工 程DNA分子杂交材 料荧光标记标志物特异寡聚核苷酸片段目 的检测该特异微生物种群的存在
荧光原位杂交技术的基本信息
中文名荧光原位杂交外文名Fluorescence in situ hybridization简 写FISH工 程DNA分子杂交材 料荧光标记标志物特异寡聚核苷酸片段目 的检测该特异微生物种群的存在
荧光原位杂交的基本介绍
中文名荧光原位杂交外文名Fluorescence in situ hybridization简 写FISH工 程DNA分子杂交材 料荧光标记标志物特异寡聚核苷酸片段目 的检测该特异微生物种群的存在
部分分解多肽两端有关的－PCR－法筛选－PK120－基因实验
实验方法原理 实验材料 PK-120试剂、试剂盒 Sephadex-50Gene Amp RNA PCR 试剂盒合成寡聚核苷酸抽提液酵母 tRNA仪器、耗材 PCR 扩增仪实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」1. 引物设计PK-120 部分分解多肽氨基酸序列中，最长序列 K-15，16 为引物设
部分分解多肽两端有关的－PCR－法筛选－PK120－基因实验
部分分解多肽氨基酸序列 20 个左右残基长度，用编码多肽两端的 PCR 引物进行 PCR 反应，能够检测 PCR 产物的长度，用此法得到的 cDNA 只有几十个碱基对，但它将成为后续筛选基因的重要突破口。实验方法原理实验材料PK-120试剂、试剂盒Sephadex-50Gene Amp RNA PC
部分分解多肽两端有关的－PCR－法筛选－PK120
基本方案 实验方法原理 实验材料 PK-120
Nature子刊：提高CRISPRCas9保真度
上海科技大学，中科院-马普计算生物学研究所，南京医科大学三处的研究人员合作发表了题为“APOBEC3 induces mutations during repair of CRISPR-Cas9-generated DNA breaks”的文章，证实了APOBEC在CRISPR/Cas9引发的同
基本方案2－基因组－DNA－的扩增
实验材料基因组DNA试剂、试剂盒4dNTP 混合物10 X PCR 扩增缓冲液寡聚核苷酸引物Taq DNA 聚合酶矿物油筛（子）琼脂糖DNA 分子大小标准参照物仪器、耗材聚丙稀微量离心管循环变温加热器实验步骤
PCR扩增制备目的基因
1．目的学会PCR操作的基本技术。2．原理是将待扩增的DNA模板加热变性，与其两侧互补的寡聚核苷酸引物复性，然后经过耐热的DNA聚合酶延伸。再进入下一轮变性—复性—延伸的循环，n次循环后DNA可被扩增（1+X）n倍。其中
简述探针标记方法
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同时在3´；端修复加入被标记核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀，多用于大分
探针标记方法的主要类型介绍
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸，同时在3´端修复加入被标记核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀，多用于大分子DNA标记，(>1000b
基因探针的标记方法介绍
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸,同时在3´端修复加入被标记核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀,多用于大分子DNA标记,(>100
生物质谱仪在核酸检测的应用
核酸检测的应用：核酸的分子生物学研究已经成为生命化学、分子生物学及医学领域中最具有活力的研究方向之一。通过现代生物质谱技术，我们不但能够得到寡聚核苷酸的分子质量，而且能够通过相关的技术得到它的序列信息。
如何计算引物的Tm值？
引物设计软件都可以给出Tm，与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。 长度为25base以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T) 对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为： Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+]
如何计算引物的Tm值？
引物设计软件都可以给出Tm，与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。长度为25base以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (GC%) –
自然子刊：揭示基因组编辑新机制
中国科学院上海生命科学研究院（人口健康领域）中科院-马普学会计算生物学伙伴研究所杨力研究组与上海科技大学陈佳研究组、南京医科大学沈彬研究组合作研究揭示了胞嘧啶脱氨酶（APOBEC）在CRISPR/Cas9引发的DNA断裂修复过程中产生突变的新机制，为进一步提高基因组编辑保真度提供了新思路。 C
关于聚合酶的研究成果介绍
新兴纳米技术的一个诱人之处就是它可以识别核酸是否可作为一种用途多样的有效实验平台，以应用于建造那些更为复杂的生物医学工具。有多种特定的功能基团能以共价键的形式联接到核苷上，而核苷又依次通过几种化学反应组装成链状物。一方面这是一种耗费劳动的过程，但在另一方面，一些科学家正通过此种过程来检验自然产生
怎么计算Tm值
引物长度，碱基组成，引物使用缓冲的离子强度有关。长度为25mer以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size公式中，Siz
什么是上游引物和下游引物
虽然这个问题很简单，但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物（引物就是单链寡聚核苷酸，基因扩增需要从引物开始），同理，下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。具体示意如下：（上下两条长线代表DNA模板）5'-----------------------
用循环测序法检测突变实验
实验材料血液或者其他来自待测个体的 DNA 材料试剂、试剂盒乙酸钠异丙醇TE 缓冲液分子质量标记物寡聚核苷酸测序引物多聚核苷酸激酶反应缓冲液多聚核苷酸激酶双脱氧核苷酸Taq DNA 聚合酶10 X 循环测序反应缓冲液矿物油终止液仪器、耗材热循环仪和管子实验步骤展开
关于探针标记方法的介绍
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同时在3´；端修复加入被标记核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀，多用于大分
怎样将dna中的RNA祛除
去除DNA中的RNA应该用RNaseA（RNA水解酶A）以下资料来自百科：RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对核糖核酸有水解作用，但对脱氧核糖核酸则不起作用。核糖核酸酶A 在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的
基因的PCR扩曾反应（聚合酶链式反应）
实验原理： 聚合酶链式反应（PCR，polymerase chain reaction）实质是体内DNA复制的体外模拟。当双链DNA变性为单链以后，DNA聚合酶以单链DNA为模版，并利用反应混合物中的四种dNTP，以与模板互补的寡聚核苷酸链为引物，合成新的DNA互补链。新合
DNA测序非同位素银染色法
SILVER SEQUENCETM DNA测序系统是一种无放射性的序列分析系统，它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。 银染提供了一种对于放射性或荧光法来说更加快速，廉价的替代方法。测序结果可以在同一天内得到；电泳完成后经90分钟就可读序，这是常规的放射性测序法做不到的。 此外，SILVER S
非同位素银染测序系统操作技术
Promega公司的SILVER SEQUENCETM DNA测序系统是一种无放射性的序列分析系统，它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。银染提供了一种对于放射性或荧光法来说更加快速，廉价的替代方法。测序结果可以在同一天内得到；电泳完成后经90分钟就可读序，这是常规的放射性测序法做不到的。 此外
DNA测序的方法非同位素银染色法的原理
SILVER SEQUENCETM DNA测序系统是一种无放射性的序列分析系统，它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。 银染提供了一种对于放射性或荧光法来说更加快速，廉价的替代方法。测序结果可以在同一天内得到；电泳完成后经90分钟就可读序，这是常规的放射性测序法做不到的。 此外，SILVER SEQ
为什么pcr的时候，DNA模板浓度高了，会有拖尾
因为pcr利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。DNA模板纯度不纯的时候，会对PCR起抑制作用。PCR反应中，模板只要1ng就可以，所以模板浓度不要太高。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)。并混入限量
什么是染色体分选？
染色体分选(chromosome sorting)，用流式细胞计分选特定的染色体，基本过程与细胞分选相似。不同的是，要用带有荧光标记的DNA探针同特异染色体结合，使待分选的染色体带上标记。在染色体分选中，使用的探针是同所感兴趣染色体互补的寡聚核苷酸，这种探针也可同荧光染料偶联。将结合有荧光染料的探针
全自动核酸蛋白分析仪概述
全自动核酸蛋白分析仪是一种用于基础医学、临床医学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器，于2014年10月21日启用。 快速分析多达96个样本，无需人工介入 采用安全、操作简单的即用型预制胶 可检测到浓度低至0.1 ng/µl的核酸，结果可靠 标准化、准确的分析，分辨率可达3–5 bp 界面友好
杨振军：异核苷修饰的干扰RNA和核酸适配体作用机制研究
10月31日，2014（第二届）非编码RNA学术研讨会继续在上海好望角大饭店（中科院上海学术活动中心）如火如荼地进行。 来自北京大学药学院的教授杨振军介绍了异核苷修饰的干扰RNA和核酸适配体作用机制研究。利用D-/L-异核苷修饰寡聚核苷酸，首先形成异核苷修饰的干扰RNA，改变修饰位点的局部构象