DNA连接酶黏端和平端的区别
黏端和平端的区别:用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割DNA,产生的DNA片段的末端不是平齐的。......阅读全文
蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验4
方案4 浓缩聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质点实验实验材料包含目的蛋白的二维电泳凝胶点试剂、试剂盒丙烯酰胺混合物(30%)琼脂糖 50g L考马斯亮蓝染色液脱色液平衡缓冲液10 X 聚丙烯酰胺电泳缓冲液浓缩胶仪器、耗材巴氏滴管聚丙烯管Protean II xi 2-D 电泳槽(Bio-Rad)注射器试管管式
气管节段切除端端吻合术麻醉处理病例分析
患者,男,53岁,160cm,60kg,ASAⅡ级,因“呼吸困难半年余,气促加重”入院。患者于9个月前因全身多处火焰烧伤后出现气管狭窄,曾行气管切开术。3个月前在外院行颈部瘢痕松解术。患者可平卧,RR18次/分,HR85次/分,BP132/88mmHg。头颈部、上肢、胸背部烧伤后植皮状态,头颈活动度
蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验5
方案5 磷酸化多肽的固相微量测序实验实验材料放射性标记的多肽试剂、试剂盒碳二亚胺试剂偶联缓冲液甲醇-水多肽溶剂S3 (氯丁烷 正丁醇)闪烁液仪器、耗材ATZ-收集器加热块小滴管Mylar 聚酯薄膜蛋白质测序仪闪烁计数器Sequelon-AA 试剂盒测试管实验步骤1.将放射性标记的肽段在小试管中溶解于
蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验6
方案6 羧基端序列分析实验实验材料利用一维或二维聚丙烯酰胺凝胶分离的蛋白质或溶液中的蛋白质试剂、试剂盒乙酸酐 二甲基吡啶烷基化乙内硫酰脲 (ATH) 氨基酸标准品溴甲基萘的乙腈溶液考马斯亮蓝(R250)二异丙基乙胺(DIEA)的庚烷溶液乙酸乙酯甲醇N-甲基咪唑的乙腈溶液异氰酸苯酯的乙腈溶液哌嗪硫氰酸
药典要求的封端色谱柱能改非封端色谱柱吗
气相吗??可以根据沸点进行分离啊,比如THF和DMSO的沸点就相差很多,气相上是可以分离的很好的 但是如果2个东西的沸点接近,但是极性有差别,比如醇和卤代烃,那么就需要用极性柱了
提高平端连接的效率
1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。2、在体系中加一点切载体的酶,只要连接后原来的酶切位点消失。这样可避免载体自连,应该可以大大提高平端连接的效率。3、足够多的载体和插入片段是最重要的 。我认为也不一定,要看片段具体情况而言,有时载体和片段浓度过高,容易产生线性化产物,不利于环化的。4
细胞化学词汇3′端
中文名称:3′端英文名称:3′-end定 义:DNA或RNA单链带有游离3′-羟基或其磷酸酯的一个末端。一条核酸链通常从5′端到3′端书写。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇凹端
中文名称:凹端英文名称:recessed terminus定 义:由限制性核酸内切酶产生的黏性末端的限制片段中的非突出端的DNA部分。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇5′端
中文名称:5′端英文名称:5′-end定 义:DNA或RNA单链带有游离5′-羟基或其磷酸酯的一个末端。一条核酸链通常从5′端到3′端书写。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
肢端黑子病例分析
1.病历摘要患者男,51 岁。双手掌、手指伸侧多发黑斑 3 年 余,渐增大增多,表面无破溃史,无瘙痒、疼痛感,于 2016 年 12 月来我科就诊。患者自三四年前双手掌、手 指多处开始出现黑色斑点,随后逐渐增多,斑片面积增 大,无痒痛感,数年内曾就诊于多家医院,都未给予明 确诊断,因担心
肢端黑子病例分析
1 病历摘要患者男,51 岁。双手掌、手指伸侧多发黑斑 3 年 余,渐增大增多,表面无破溃史,无瘙痒、疼痛感,于 2016 年 12 月来我科就诊。患者自三四年前双手掌、手 指多处开始出现黑色斑点,随后逐渐增多,斑片面积增 大,无痒痛感,数年内曾就诊于多家医院,都未给予明 确诊断,因担心
细胞化学词汇平端
中文名称:平端英文名称:blunt end定 义:DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3端
实验材料 限制性内切核酸酶 T4 噬菌体 DNA 聚合酶 模板 DNA 试剂、试剂盒 醋酸氨
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3端
实验材料 限制性内切核酸酶T4 噬菌体 DNA 聚合酶模板 DNA试剂、试剂盒 醋酸氨乙醇酚氯仿T4 噬菌体 DNA 聚合酶缓冲液dNTP 溶液仪器、耗材 Sephadex G-50 离心柱水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液醋酸氨(10 mol/L)乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3端
实验材料限制性内切核酸酶T4 噬菌体 DNA 聚合酶模板 DNA试剂、试剂盒醋酸氨乙醇酚氯仿T4 噬菌体 DNA 聚合酶缓冲液dNTP 溶液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱水浴实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液醋酸氨(10 mol/L)乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲液适当的
双脱氧ATP末端标记双链DNA的3突出端
实验材料 限制性内切核酸酶 小牛胸腺末端转移酶 模板 DNA 试剂、试剂盒 乙酸铵
用交换反应进行5突出端DNA分子的磷酸化
实验方法原理 T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应(Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5' 端 DNA 的快速方法。与正向反应不同的是,它无需 DNA
用交换反应进行5突出端DNA分子的磷酸化
T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应(Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5' 端 DNA 的快速方法。与正向反应不同的是,它无需 DNA 去磷酸化。正向反应在略偏酸性(pH 6.4)的咪唑缓冲液中进行,以刺激酶促去
用交换反应进行5突出端DNA分子的磷酸化
实验方法原理 T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应(Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5' 端 DNA 的快速方法。与正向反应不同的是,它无需 DNA 去磷酸化。正向反应在略偏酸性(pH 6.4)的咪唑
裴端卿组综述DNA去甲基化的级联调控模型
中国科学院广州生物医药与健康研究院裴端卿课题组综合近期体细胞重编程过程中TET相关DNA去甲基化的研究进展【1】和之前的相关研究,对细胞命运变化过程中的DNA甲基化模式重排过程和级联调控模型进行了调研,提出偶联TET进行DNA去甲基化可能是转录因子打开染色质的一种基本模式,该综述以The Bat
用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段标记双链DNA的3’端
实验材料 限制性内切核酸酶 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段 模板 DNA 试剂、试剂盒
用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段标记双链DNA的3’端
实验材料 限制性内切核酸酶大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段模板 DNA试剂、试剂盒 乙酸铵乙醇dNTP 溶液仪器、耗材 Sephadex G-50 离心柱水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液乙酸铵(10 mol/L )乙醇2. 酶和缓冲液适宜的限制性内切核酸酶大肠杆菌 DNA 聚
用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段标记双链DNA的3’端
实验材料限制性内切核酸酶大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段模板 DNA试剂、试剂盒乙酸铵乙醇dNTP 溶液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱水浴实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙酸铵(10 mol/L )乙醇2. 酶和缓冲液适宜的限制性内切核酸酶大肠杆菌 DNA 聚合酶 I
DNA连接酶(DNA-ligase)介绍
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA
单链突出端的定义
中文名称单链突出端英文名称overhang定 义双链核酸末端带有一个或多个未配对核苷酸的单链部分。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
肢端雷诺现象发生的机理
关于雷诺现象发生的机理,目前尚不十分清楚,综合各家学说认为有以下几种因素。 ①血管炎病变:在各种因素作用下,某些抗原与血管内皮细胞上的磷脂结合,在补体的作用下,损伤血管内皮细胞,形成血管炎,使血管壁增厚或管腔狭窄。在交感神经作用下,血管易发生痉挛、闭塞。 ②免疫功能紊乱:雷诺现象多见于结缔组
钩端螺旋体的简介
钩端螺旋体菌体纤细,长短不一,一般为6~20um,宽0.1~0.2um,具有细密而规则的螺旋,菌体一端或两端弯曲呈钩状,常为“c”、“s”等形状。在暗视野显微镜下可见钩体象一串发亮的微细珠粒,运动活泼,可曲屈,前后移动或围绕长轴作快速旋转。电镜下钩体为圆柱状结构,最外层是鞘膜,由脂多糖和蛋白质组
为什么要做封端处理?
一般常见的硅胶填料(没有经过封端处理),pH耐受性都在2-8之间,在碱性环境下,硅胶的Si-O-Si-O结构会被破坏而溶解。即使在pH5-7的环境中,硅胶表面的Si-OH也会电离。使得碱性化合物产生拖尾,严重影响分离效果。封端处理以后可以减少待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应,改善和保持较好的峰
5端RACE升级版
实验概要完成这个RACE需要全套反转录系统,当然选一个好的反转录酶(无RNase H),dUTP,taq酶,Uracil DNA glycosylase ,还有这几条引物: Adapter A AUCUCGAGUUCGCGCCGGAUCC(T) 25 VN cDNA synthesis and ad
肢端原位黑素瘤病例分析
主诉: 足部拇趾腹侧褐色斑疹 20 年,迅速增大 2 年 现病史: 患者右大拇趾腹起疹 20 余年。 逐渐长大,近 2 年增长迅速,且颜色变黑,故于 2016 年 9 月来我科就诊。 既往史、个人史及家族史: 无特殊。皮肤科检查: 右足大拇趾腹侧一黑色皮疹,面积约 1.5 cm×1.0 cm,表面较