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5端RACE升级版

实验概要完成这个RACE需要全套反转录系统,当然选一个好的反转录酶(无RNase H),dUTP,taq酶,Uracil DNA glycosylase ,还有这几条引物: Adapter A AUCUCGAGUUCGCGCCGGAUCC(T) 25 VN cDNA synthesis and adapter-A incorporationAdapter B AUAUGCACUGCCGCGUCUGAGGGGGGGG Cap finder adapter-B incorporation Primer A CUCGAGUUCGCGCCGGAUC Second-strand cDNA synthesis Primer B AUAUGCACUGCCGCGUCUGA &nb......阅读全文

RACE服务

这时我们可以根据基因的一段已知序列(或一段同源序列),利用3'-Race方法获得该基因的3'端序列,或者利用5'-Race方法得到该基因的5'端序列。服务流程:1、先由您提供背景资料,其中包括已知的DNA序列部分,RNA的情况,所扩增基因的估计长度,是否具有同源序列等

3'-RACE PCR

实验概要         This technique is used to obtain the 3'end of a cDNA, it requires some sequence information internal to the mRNA under study. The

RACE PCR简介

近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA

帽子转换 RACE 实验

试剂、试剂盒 寡核苷酸引物cDNA 文库HerculesHot-Start 聚合酶HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液dNTP 溶液TE反转录缓冲液RNasinSuperscript II 逆转录酶生物素标记的引物 Ptotal帽子发现接头引物poly(A)+RNA仪器、耗材 热

帽子转换 RACE 实验

这里介绍的方法,是用一个生物素化的引物来帮助纯化第一链产物。这些纯化技术是可以互换的。与之类似,使用这里所介绍的基于寡核苷酸-(dT) 的引物,在反转录的起始阶段使用的基因特异性引物(如上所述)也是可以互换的。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒寡核苷酸引物cD

帽子转换 RACE 实验

            试剂、试剂盒 寡核苷酸引物 cDNA 文库 HerculesHot-Start 聚合酶 HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液 dNTP 溶液

3’RACE 实验心得

引子:从06年12月份开始,断断续续做了一个多月的3’RACE,有了一些心得和体会。期间看了很多前辈们分享的经验,受益匪浅。在这里,我就自己的经历略作总结,希望能给像我一样的新人们有点启示,少走些弯路,不当之处欢迎指正。一、试剂盒的选择:3’RACE从原理上就能明白,它比5’RACE 要容易得多,所

RACE技术的原理和操作

近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA

RACE技术的原理和操作

近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA

SMARTTM 5'-RACE PCR的原理

SMARTTM 5‘-RACE的原理是先是利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以Oligo(dT)30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下,反转录合成标准第一链cDNA。利用该反转录酶具有的末端转移酶活性,在反转录达到第一链的5‘末端时自动加上3一5个(dC)残基,退