Ames试验的基本介绍

污染物对人体的潜在危害,引起人们的普遍关注。世界上已发展了百余种短期快速测试法,检测污染物的遗传毒性效应。B.N.Ames等经十余年努力,于1975年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验(亦称Ames试验)已被世界各国广为采用。该法比较快速、简便、敏感、经济,且适用于测试混合物,反映多种污染物的综合效应。众多学者有的用Ames试验检测食品添加剂、化妆品等的致突变性,由此推测其致癌性;有的用Ames试验检测水源水和饮用水的致突变性(比如,美国派斯净水器就通过了Ames试验),探索较现行方法更加卫生安全的消毒措施;或检测城市污水和工业废水的致突变性,结合化学分析,追踪污染源,为研究防治对策提供依据;有的检测土壤、污泥、工业废渣堆肥、废物灰烬的致突变性,以防止维系生命的土壤受致突变物污染后,通过农作物危害人类;检测气态污染物的致突变性,防止污染物经由大气,通过呼吸对人体发生潜在危害;用Ames试验研究化合物结构与致变性的关系,......阅读全文

Ames试验的基本介绍

  污染物对人体的潜在危害,引起人们的普遍关注。世界上已发展了百余种短期快速测试法,检测污染物的遗传毒性效应。B.N.Ames等经十余年努力,于1975年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验(亦称Ames试验)已被世界各国广为采用。该法比较快速、简便、敏感、经济,且适用于测试混合物,反映多种污染

Ames试验的步骤和方法介绍

  Ames试验的常规方法有斑点试验和平板掺入试验。  1.菌株鉴定 用于测试的菌株,需经基因型和生物学性状鉴定,符合要求才能投入使用。  目前推荐使用的一套菌株是TA97、TA98、TA100和TA102。鉴定前先进行增菌培养。为鉴定结果可靠,需同时培养野生型TV菌株,作为测试菌基因型之对照。增菌

Ames试验的类型

  Ames试验是由由美国加利福利亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室在1975年建立的鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验,从建立到后来的不断完善,现在Ames试验被广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。为了对Ames试验有更多的了解,特收集整理了网上的资料,对Ames试验的类型进行

Ames试验的目的和原理

  鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株,在含微量组氨酸的培养基中,除极少数自发回复突变的细胞外,一般只能分裂几次,形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后,大量细胞发生回复突变,自行合成组氨酸,发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经

Ames检测法的试验方法

  首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物,能大大增强鼠肝脏酶系的活性,4天后杀鼠取肝组织,捣碎后离心制备肝酶(S9)悬液,然后将待测产物和S9一级沙门氏菌的组氨酸突变株混合后倒平板,若能产生回复突变的待测产物则可判定为诱变物。

Ames检测法的原理及试验方法

  原理  化学物质引起的诱变往往不是直接的,它要经过生物的消化吸收,特别是高等生物的肝脏中的有关酶的作用再起作用。而且,诱变剂仅仅改变突变频率,而不直接影响突变方向,所以同样的诱变剂也能导致回复突变。  实验方法  首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物,能大大增强鼠肝脏酶系的活性,4天后杀鼠

Ames检测法的定义

  通过考察加入待测试剂后进行培养的微生物是否发生回复突变,来检测待测试剂是否有致癌性的一种方法。

Ames检测法的原理

  化学物质引起的诱变往往不是直接的,它要经过生物的消化吸收,特别是高等生物的肝脏中的有关酶的作用再起作用。而且,诱变剂仅仅改变突变频率,而不直接影响突变方向,所以同样的诱变剂也能导致回复突变。

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(二)

6.10  菌株鉴定用和特殊用途试剂 6.10.1  组氨酸—生物素平板成分:琼脂粉 15g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20mL20%葡萄糖 20mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) 10mL灭菌0.5mmol/L生物素溶液 6mL配制:高压灭菌琼脂和水后,将灭菌20%葡萄糖,

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(一)

鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验,Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation Assay)于 1975年建立并不断发展完善,目前已被世界各国广为采用,已经成为毒理学实验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用,该验灵敏、

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(三)

12  数据处理和结果判断记录受试物各剂量组、空白对照(自发回变)、溶剂对照以及阳性诱变剂对照的每皿回变菌落数,并求平均值和标准差。如果受试物的回变菌落数是溶剂对照回变菌落数的两倍或两倍以上,并呈剂量-反应关系者,则该受试物判定为致突变阳性。受试物经上述四个试验菌株测定后,只要有一个试验菌株,无论在

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(四)

试验设计及受试物的特殊处理1) 剂量设计 决定受试物最高剂量的原则是受试物对试验菌株的毒性和受试物的溶解度。对于纯的化学物质,一般最低剂量为每平皿0.2 μg,最高剂量为 5 mg,或溶解度允许,或饱和浓度,或对细菌产生最小毒性浓度。对于毒性很低、摄入量很大的定型产品,可根据其溶解度和对细菌

Ames检测法的定义及原理

  定义  通过考察加入待测试剂后进行培养的微生物是否发生回复突变,来检测待测试剂是否有致癌性的一种方法。  原理  化学物质引起的诱变往往不是直接的,它要经过生物的消化吸收,特别是高等生物的肝脏中的有关酶的作用再起作用。而且,诱变剂仅

糖发酵试验的基本介绍

  糖发酵试验是测验微生物具有不同的利用各种碳源的能力,其原理在于不同微生物具有不同的酶系。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等),有些细菌只产酸不产气。

关于呼气试验的基本介绍

  呼气试验是进行呼吸肌张力、呼气流速、重复呼吸试验进行的并根据试验结果判断是否有呼吸系统病变的检查方法。  重复呼吸试验:  正常值:氧容积百分比男性8.62±0.13,女性8.96±0.14;二氧化碳容积百分比男性8.33±0.98,女性7.83±0.10。所测得肺泡氧浓度9.5mv%,说明换气

关于狄克试验的基本介绍

  狄克试验试是利用链球菌感染后机体可产生特异性抗体(抗红疹毒素抗体),抗体一旦产生即具有免疫力,此时如皮下注射红疹毒素,便不再产生皮疹的原理进行的一种试验。因此,利用皮下注射红疹毒素后局部反应,可了解受试者对链球菌的免疫能力。

锡克试验的基本介绍

  锡克试验是调查人群对白喉是否有免疫力的皮内试验,其原理是外毒素和抗毒素的中和反应。皮内注射毒素后24-48h反应阴性时,说明体内有抗毒素,对白喉有免疫力。皮肤出现红肿等阳性反应时表明体内无抗毒素,无免疫力。另外,锡克试验尚可用于检查白喉预防接种后的免疫效果。

CO呼气试验的基本介绍

  CO呼气试验法可分为重复呼吸式CO呼气试验法和开放呼气式CO呼气试验法。重复呼吸式CO呼气试验法需要戴头套、操作复杂、受试者体验差,在临床上很少用,开放呼气式CO呼气试验法无需戴头套、操作简便、受试者“一气呵成”,快捷准确,且可动态检测RBCS [5] 。已被美国儿科学会和中华医学会推荐为新生儿

试管凝集试验基本介绍

  试管凝集试验为半定量试验方法,在微生物学检验中常用已知细菌作为抗原液与一系列稀释的受检血清混合,保温后观察每管内抗原凝集程度,通常以产生明显凝集现象的最高稀释度作为血清中抗体的效价,亦称为滴度。在试验中,由于电解质浓度和pH不适当等原因,可引起抗原的非特异性凝集,出现假阳性反应,因此必须设不加抗

关于冷热溶血试验的基本介绍

  冷热溶血试验,是模拟病人发病的体外试验,将病人的血液置于4℃冰箱中一些时候,再置于37℃室温中,由于葡萄糖分解产酸加速其红细胞的溶解,产生溶血。

葡萄糖耐量试验的基本介绍

  口服葡萄糖耐量试验是一种葡萄糖负荷试验,用以了解胰岛β细胞功能和机体对血糖的调节能力,是诊断糖尿病的确诊试验,广泛应用于临床实践中。具体试验方法是指给成人口服含75g无水葡萄糖的水溶液,儿童按每公斤体重1.75g计算,总量不超过75g,然后分别于0.5、1.0、1.5、2.0小时采血,测其血糖变

关于毒素皮肤试验的基本介绍

  毒素皮肤试验是用经过处理的毒素进行皮肤试验,如:破伤风抗毒素皮内试验、结核菌素试验等试验。  毒素皮肤试验阴性,即是注入毒素后观察48至72小时后观察注射部位的反应,如没有红肿,硬结或硬结小于5毫米为阴性。

关于酚妥拉明阻滞试验的基本介绍

  酚妥拉明阻滞试验(Regitin试验)是通过下述原理进行的,酚妥拉明(即苄胺唑啉)是一种α-肾上腺素能受体阻滞剂,可阻滞儿茶酚胺的α-受体效应,使因儿茶酚胺水平增高引起的持续性或阵发性高血压迅速下降。因此通过对酚妥拉明的反应,可以判断高血压与嗜铬细胞瘤的关系。

关于皮内试验的基本介绍

  将试验抗原与对照液各0.02~0.03ml用皮试针头分别注入皮内(不是皮下),使局部产生一个圆形小丘。当同时试验多种抗原时,相互间至少间隔4cm,以免强烈反应时互相混淆结果。皮内试验的敏感性比其他皮肤试验高,所用抗原应适当稀释,以免出现严重反应;当高可疑性抗原出现阴性结果时,应逐渐加大抗原浓度进

关于糖发酵试验的基本介绍

  糖发酵试验是测验微生物具有不同的利用各种碳源的能力,其原理在于不同微生物具有不同的酶系。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等),有些细菌只产酸不产气。

红细胞凝集试验的基本介绍

   指红细胞凝集的现象。有由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的红细胞凝集。  (1)由病毒而引起的凝集:G.H.Hirst(1941)发现流感病毒能使鸡的红细胞发生凝集,其后又发现其它各种病毒也能引起同样的红细胞凝集反应。即红细胞表面存在着对各种病毒的受体,病毒与受体结合,以红细胞为桥梁的结果而引起凝

杆菌肽敏感试验的基本介绍

  1、样品处理:取25g固体(或25mL液体)检样加入225mL灭菌生理盐水,制成混悬液。  2、吸取5mL混悬液接种至50mL葡萄糖肉浸液肉汤,或直接划线于血平板(如检样污染严重,可同时接种5mL至匹克氏肉汤),36℃培养24h,接种血平板,36℃培养24h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落,在血

关于束臂试验的基本介绍

  束臂试验是一种用于检查出血与凝血障碍的筛选试验。用加压方法部分阻断静脉回流后根据新出现的出血点的多少及大小来估计毛细血管的脆性,本试验又称毛细血管脆性试验,目的在于了解毛细血管的机能和结构,血小板的质与量,以及体液因素等有无缺陷。适应于原发性或继发性血小板减少性紫癜、遗传性毛细血管扩张症、坏血病

溶血空斑试验的基本介绍

  溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空

关于TRH兴奋试验的基本介绍

  TRH兴奋试验(TRHStimulationTest),合成TRH500μg静脉推注前、后测定TSH.正常情况下,TSH水平有5~25μu/ml快速上升,峰值在30分钟,120分钟恢复正常。原发性甲状腺功能减退上升过低。继发于垂体病变的甲状腺功能减退,缺乏或损害TSH对TRH的反应。TRH贮备缺