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扩增片段长度多态性的方法

AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相边接,作为扩增反应的模板 DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DNA 基因再进行选择性扩增,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测获得的DNA扩增片段,根据扩增片段长度的不同检测出多态性。引物由三部分组成:与人工接头互补的核心碱基序列、限制性内切酶识别序列、引物3’端的选择碱基序列(1—10 bp)。接头与接头相邻的酶切片段的几个碱基序列为结合位点。该技术的独特之处在于所用的专用引物可在知道 DNA 信息的前提下就可对酶切片段进行PCR 扩增。为使酶切浓度大小分布均匀,一般采用两个限制性内切酶,一个酶为多切点,另一个酶切点数较少,因而 AFLP 分析产生的主要是由两个酶共同酶切的片段。AFLP 结合了 RFLP......阅读全文

扩增片段长度多态性的方法

AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相边接,作为扩增反应的模板 DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DNA

扩增片段长度多态性的概念简介

扩增片段长度多态性(AFLP)Amplified Fragment Length Polymorphism对基因组DNA进行双酶切,形成分子量大小不同的随机限制片段,再进行PCR扩增,根据扩增片段长度的多态性的比较分析,可用于构建遗传图谱、标定基因和杂种鉴定以辅助育种。

vWF III位点扩增片段长度多态性试验

【实验原理】扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphisms,Amp-FLP)根据PCR技术原理,针对靶基因座的侧翼序列设计一对特异性引物,采用适当的PCR 反应体系和热循环条件,可扩增出该基因座等位基因。PCR 产物经电泳分离、显带后,

限制性片段长度多态性(RFLP)分析

            实验方法原理 1. DNA 限制性内切酶具有识别特定的DNA 序列并在特定的部位切断DNA 双链的活性功能,DNA 分子由于突变(核苷酸的置换、插入或缺失)改变(或形成)了限制性内切酶识别序列,使DNA 限制性内切酶不能(或可以)将靶DN

限制性片段长度多态性(RFLP)分析

限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析技术是分子生物学的重要分析方法之一,用于检测DNA序列多态性。PCR-RFLP 是将PCR 技术、RFLP 分析与电泳方法联合应用,先将待测的靶DNA 片段进行复制扩增,然后应用DN

限制性片段长度多态性(RFLP)分析

限制性片段长度多态性(restriction fragment lengthpolymorphism,RFLP)分析技术是分子生物学的重要分析方法之一,用于检测DNA序列多态性。PCR-RFLP 是将PCR技术、RFLP 分析与电泳方法联合应用,先将待测的靶DNA 片段进行复制扩增,然后

限制性片段长度多态性(RFLP)分析

限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析技术是分子生物学的重要分析方法之一 ,主要用于(1)检测DNA序列多态性,(2)探索基因的多样性。实验方法原理1. DNA 限制性内切酶具有识别特定的DNA 序列并在特定的部位切断D

限制性片段长度多态性技术简介

限制性片段长度多态性(RFLP,Restriction Fragment Length Polymorphism)RFLP技术于1980年由人类遗传学家Bostein提出。它是第一代DNA分子标记技术。Donis—Keller利用此技术于1987年构建成第一张人的遗传图谱。DNA分子水平上的多态性检

限制性片段长度多态性技术原理

该技术是利用限制性内切酶能识别DNA分子的特异序列,并在特定序列处切开DNA分子,即产生限制性片段的特性,对于不同种群的生物个体而言,他们的DNA序列存在差别。如果这种差别刚好发生在内切酶的酶切位点,并使内切酶识别序列变成了不能识别序列或是这种差别使本来不是内切酶识别位点的DNA序列变成了内切酶识别

限制性片段长度多态性技术分类

DNA 结构在不同种类的生物体内存在着相当大的差异。随着对基因认识的不断深入,发现在同种生物的不同个体之间,尽管其蛋白质产物的结构和功能完全相同或仅存在细微的差异,但在DNA 水平却存在着差异,尤其在不编码蛋白质的区域以及没有重要调节功能的区域表现更为突出。DNA 顺序上的大多数突变是中性突变,即不