相差显微镜常见问题分析

相差显微镜使用中的几个问题:(1)相位倒转 当n’<n或n’>n时得到象的明暗反差正好相反,称为相位倒转。当相位差δ=0时是无法识别的,随着δ的增大反差变大,当δ继续增大到某一值后会出现相位倒转。用90%高吸光值(高反差)物镜时,这个转变值约为0.55λ,用70%标准吸光值的物镜时约为0.33λ。较高吸光值的物镜应该用于分辨较小的光程差。(2)晕轮和渐暗效应 在相差显微镜成象过程中,某一结构由于相位的延迟而变暗时,并不是光的损失,而是光在象平面上重新分配的结果。因此在黑暗区域明显消失的光会在较暗物体的周围出现一个明亮的晕轮。这是相差显微镜的缺点,它妨碍了精细结构的观察,当环状光阑很窄时晕轮现象更为严重。相差显微镜的另一个现象是渐暗效应,指相差观察相位延迟相同的较大区域时,该区域边缘会出现反差下降。(3)样品厚度的影响 当进行相差观察时,样品的厚度应该为5μm或者更薄,当采用较厚的样品时,样品的上层是很清楚的,深层则会......阅读全文

相差显微镜常见问题分析

相差显微镜使用中的几个问题:(1)相位倒转 当n’n时得到象的明暗反差正好相反,称为相位倒转。当相位差δ=0时是无法识别的,随着δ的增大反差变大,当δ继续增大到某一值后会出现相位倒转。用90%高吸光值(高反差)物镜时,这个转变值约为0.55λ,用70%标准吸光值的物镜时约为0.33λ。较高吸光值的物

相差显微镜常见问题

(1)相位倒转 当n’n时得到象的明暗反差正好相反,称为相位倒转。当相位差δ=0时是无法识别的,随着δ的增大反差变大,当δ继续增大到某一值后会出现相位倒转。用90%高吸光值(高反差)物镜时,这个转变值约为0.55λ,用70%标准吸光值的物镜时约为0.33λ。较高吸光值的物镜应该用于分辨较小的光程差。

相差显微镜使用中的问题分析

1、样品厚度的影响 当进行相差观察时,样品的厚度应该为5μm或者更薄,当采用较厚的样品时,样品的上层是很清楚的,深层则会模糊不清并且会产生相位移干扰及光的散射干扰。   2、盖玻片和载玻片的影响 样品一定要盖上盖上盖玻片,否则环状光阑的亮环和相板的暗环很难重合。相差观察对载玻片和盖玻片的玻璃质量也有

相差显微镜

   相差显微镜(phasecontrast microscope)由P.Zernike于1932年发明,并因此获1953年诺贝尔物理奖。这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞。    相差显微镜的基本原理是,把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各

相差显微镜

(一)相差显微镜的特点    相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。  光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化。因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以分辨。然而,由

水质分析常见问题

15、测总磷,洗衣液稀释100倍,加热后水样变黄色,对测量结果有没有影响?答:消解后如果水样没有颜色,则不干扰实验结果。水中有颜色的物质会在消解时被消解成无色的,不影响测量结果。16、连华5B-3F水质测定仪如何恢复出厂设置?答:仪器在关闭的状态,一手按住“校正”键,一手打开开关,待屏幕上显示“99

水质分析常见问题

24、测定cod用密封管消解行不行?答:可以的,但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧,在颠倒摇匀的时候,可能会让溶液洒出,导致测值结果不准,甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体,此种水样不可密封消解,如水里的次氯酸根太高,消解时会释放出大量氯气,密封消解会导致消解

水质分析常见问题

26、配总磷过硫酸钾,由于不好溶,加塞子水浴加热到了10秒左右,塞子不是很紧,过硫酸钾还能使用吗?答:如果进水不建议使用,可以做标准溶液试一试。过硫酸钾不好溶可以多搅拌或超声,不建议加热,控制不好温度过高后会导致过硫酸钾失效。另过硫酸钾最佳保存温度25-30℃,冷藏容易结晶。27、用3B做甲醛之前做

水质分析常见问题

13、请问做氨氮实验时,为什么加入N3试剂出现大量白色浑浊,加入N2试剂后下层红色上层青色不断有小气泡上升?答:钙镁离子高,应做絮凝沉淀预处理。水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质,影响氨氮的测定。因此,在分析时需做适当的处理。对较清洁的水,可采用絮凝沉淀发;对污染严重的水或工业废水,则用蒸馏法消除

水质分析常见问题

08、请问BOD营养盐有黄色不溶物正常吗?答:正常,营养盐配好是淡黄色不完全溶解的溶液,用前需摇匀。09、请问N2试剂前一天配出来没什么问题,为什么放一天后变棕黄色变浑?答:N2试剂配好后应转移到聚乙烯瓶中密封、避光、低温储存。如果放到矿泉水瓶内,时间稍长会出现变质。如果未密封保存,空气中的有机气体

水质分析常见问题

水质分析常见问题水质分析又称水化学分析。即用化学和物理方法测定水中各种化学成分的含量。水质分析过程中常见的问题有哪些呢?01、BOD缓冲剂液化了还能用吗?答:BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象,这是正常情况,不影响使用。02、我们测氨氮,是以氮元素计还是以铵根离子计?答:氨氮是指水中以游离氨和铵

水质分析常见问题

11、请问定量器为什么吸不起来?答:定量器内有两个玻璃柱,吸液时弯头附近玻璃柱会将底部封死,溶液会吸上来;排液时下面玻璃柱会将底部封死让溶液从弯头排出。两个玻璃柱相当于两个单向阀。新定量器使用时吸不上来就是弯头附近玻璃柱底部没完全密封,可用手指轻弹几下或用洗耳球将溶液吸到弯头玻璃柱处就可以了。12、

水质分析常见问题

24、测定cod用密封管消解行不行?答:可以的,但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧,在颠倒摇匀的时候,可能会让溶液洒出,导致测值结果不准,甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体,此种水样不可密封消解,如水里的次氯酸根太高,消解时会释放出大量氯气,密封消解会导致消解

水质分析常见问题

19、含氯酸钠废水COD如何检测?答:含氯酸钠废水的COD检测水样的原水COD很高,用户使用了氯酸钠来处理,氯酸钠具有氧化性,能降低COD,但这种废水,使用正常方法无法检测,经过查找资料及连华技术人员的建议,我们进行了方法测试,找到解决方案。1)取2.5ml水样,加入4.8ml的E试剂,注意速度不要

芯片常见问题分析

1 芯片实验和定量PCR的优劣比较?   基因表达谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究,定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。 2 在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存?   可以抽干冷冻保存一年。 3 可否用DNA和芯片杂交?   不可以,因为芯片上的样品是cDNA而真核基因D

水质分析常见问题

21、BOD缓冲剂液化还能用吗?答:BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象,这是正常情况,不影响使用。22、仪器测总氮时空白和标液正常,测水样显示(9999)什么原因?答:仪器测标样没问题,仪器一般不会有问题,可能是水样浓度太高需要稀释,总氮直测范围0.05-10mg/L,275nm波长下的吸光度尽

eds分析常见问题

  Q1:能谱的缩写是EDS还是EDX?  开始的时候能谱的缩写有很多,比如EDS,EDX,EDAX等。ED就是Energy Dispersive,后面因为X-ray Analysis和Spectrum这几个词的不同用法,导致了缩写的不同。而且相应的汉译也有很多,比如能量色散谱,能量散射谱等等。不过

水质分析常见问题

05、做总磷实验时,过硫酸钾结晶了,影响检测结果吗,该怎么解决?答:过硫酸钾配制时较难溶解,使用超声波帮助其溶解。如果没有超声波,尤其是冬季室温较低,可以加热使其溶解(温度不能超过60℃,否则过硫酸钾会分解),放冷后会有析出,因为溶液为过饱和,再加热溶解是可以使用的,不影响总磷的测定。06、请问在做

倒置相差显微镜

倒置相差显微镜组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物台之上,用于观察培养的活细胞,具有相差物镜。倒置相差显微镜具有两个其他显微镜所不具有的功能:①将直射的光(视野中背景光)与经物体衍射的光分开;②将大约一半的波长从相位中除去,使之不能发生相互作用,从而引起强度的

相差显微镜概述

  相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位指在某一时间上,光的波动所达到的位置。一般由于被检物体(如不染色的细胞)所能产生的相差太小,肉眼很难分辨,只有在变相差为振幅差(明暗差)之后才能被区分。相差决定于 光波所通过介质的折射率之差及其厚度,等于折射率与厚度的乘积之差(

相差显微镜简介

  相差显微镜是荷兰科学家Zernike于1942年发明的,用于观察未染色标本的显微镜。主要用于观察未经染色的标本和活细胞。  活细胞和未染色的生物标本,因细胞各部细微结构的折射率和厚度的不同,光波通过时,波长和振幅并不发生变化,仅相位发生变化(振幅差),这种振幅差人眼无法观察。而相差显微镜通过改变

了解相差显微镜

相差显微镜的基本原理是,把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了1/4λ(波长),如果再增加或减少1/4λ,则光程差变为1/2λ,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减下,提高反差。在构造上,相差显

相差显微镜概述

  光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化,因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以分辨。然而,由于细胞各部分的折射率和厚度的不同,光线通过这种标本时,直射光和衍射光的光程就会有差别。随着光程的增加或减少,加快或落后的光波的

相差显微镜介绍

(一)相差显微镜的特点      相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。     光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化。因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以

测序常见问题及其分析

  1、PCR 产物测序时出现重叠峰   问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序   结果移码)   解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE   纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进

测序常见问题及其分析

  1、PCR 产物测序时出现重叠峰   问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序   结果移码)   解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE   纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进

PH计常见问题分析

常见问题及解决方案1.同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2.同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台 pH计的校正条件不一样(如,不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一

PCR克隆常见问题分析

    1、克隆PCR产物的最优条件是什么?    最佳插入片段:载体比需实验确定。1:1(插入片段:载体)常为最佳比,摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶,插入片段共10ul。室温保温1小时,或4℃过夜。在

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400