基因芯片杂交结果中的常见问题汇总
基因芯片杂交结果中的常见问题问题可能原因解决方案杂交点模糊、毛边DNA浓度过高降低DNA探针浓度进行芯片的打印紫外交联时未能有效固化DNA检测紫外灯，将其能量值调试至合适值；将打印好的芯片置80℃烤2~4h。杂交时盖片移动杂交时将盖片放正，杂交过程中避免其移动；预先用水和普通载玻片练习放置盖玻片。没有进行封闭，或封闭不完全用琥珀酸酐进行封闭各点形状不规则打印针头折断或弯曲检查打印针头，更换已弯曲的针头针头不干净清洁打印针头针头打印点后向上移动速度太快减少针头从打印点向上移动的距离约25%背景区出现荧光点样品核酸中掺入的荧光染料过多或过少每份样品核酸应含约20pmol/L的荧光染料；杂交前应检测样品核酸的特异活性，应达到平均每25~50个核苷酸含1个染料分子。样品核酸的荧光衰减荧光染料及标记好的样品核酸应避光保存芯片打印或杂交时污染了手套上的粉尘芯片制备和检测的所有过程中应使用无粉尘的手套芯片上沾染了空气中灰尘在无尘工作橱或环境中......阅读全文
基因芯片杂交结果中的常见问题汇总
基因芯片杂交结果中的常见问题问题可能原因解决方案杂交点模糊、毛边DNA浓度过高降低DNA探针浓度进行芯片的打印紫外交联时未能有效固化DNA检测紫外灯，将其能量值调试至合适值；将打印好的芯片置80℃烤2~4h。杂交时盖片移动杂交时将盖片放正，杂交过程中避免其移动；预先用水和普通载玻片练习放置盖玻片。没
基因芯片杂交结果中的常见问题
基因芯片杂交结果中的常见问题问题可能原因解决方案杂交点模糊、毛边DNA浓度过高降低DNA探针浓度进行芯片的打印紫外交联时未能有效固化DNA检测紫外灯，将其能量值调试至合适值；将打印好的芯片置80℃烤2~4h。杂交时盖片移动杂交时将盖片放正，杂交过程中避免其移动；预先用水和普通载玻片练习放置盖玻片。没
基因芯片杂交结果中的常见问题
基因芯片杂交结果中的常见问题问题可能原因解决方案杂交点模糊、毛边DNA浓度过高降低DNA探针浓度进行芯片的打印紫外交联时未能有效固化DNA检测紫外灯，将其能量值调试至合适值；将打印好的芯片置80℃烤2~4h。杂交时盖片移动杂交时将盖片放正，杂交过程中避免其移动；预先用水和普通载玻片练习放置盖玻片。没
基因芯片样品的准备及杂交检测
目前，由于灵敏度所限，多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程序的扩增，不过也有不少人试图绕过这一问题，如 Mosaic Technologies 公司引入的固相 PCR 方法，引物特异性强，无交叉污染并且省去了液相处理的烦琐； Lynx Therapeutics 公司引入的大规模并行固相克隆法（
移液器的常见问题汇总
检修常识常见问题原因解决方法移液器渗漏●使用了不合适的吸头●用原厂的吸头●吸头安装不正确●稳妥安装吸头●吸头圆锥磨损货污染●清洗安全圆锥●更换安全圆锥●活塞密封磨损或润滑剂不足●清洗并给垫圈重上润滑剂●更换垫圈●仪器损坏●送去维修移液性能规格超出给定范围●使用了不合适的吸头●用原厂的吸头测试●非标准
PCR常见问题汇总
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶
PCR常见问题汇总
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板
基因芯片的测序原理是杂交测序方法
基因芯片的测序原理是杂交测序方法 随着人类基因组（测序）计划（ Human genome project ）的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展，越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定，基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而 , 怎样去研究如此众多基因在生命过程中所
基因芯片杂交仪,平台震荡器Grant
·Grant的ISO20芯片杂交仪是一个简单的但实用的芯片杂交箱，具有良好温控、保湿和稳定等性能，为芯片杂交的良好装置。 ·密封设计有效地保持了腔体的湿度，从而探针不会干，也无须加盖 ·使用强制气体循环，提高了温度均一性和可重复性 ·铝质玻片架传热均匀、快速 ·加一点杂交
Southern杂交的结果分析
在膜上阳性反应呈带状。实验中应注意以下问题：转膜必需充分，要保证DNA已转到膜上。杂交条件及漂洗是保证阳性结果和背景反差对比好的关键。洗膜不充分会导致背景太深，洗膜过度又可能导致假阴性。若用到有毒物质，必需注意环保及安全。 （1）出现斑点 解决方法：①加热至合适的温度；离心或过滤除去颗粒。②
PCR常见问题汇总（一）
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些zui好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板： ①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有
Ph常见问题汇总2
6.样品温度为 10℃，此时仪表显示的是 10℃还是 25℃下的 pH值? 酸度计显示的是溶液在当前温度下的 pH值,若在 10℃测量，仪表显示的是溶液 10℃的值,如果需要得到 25℃的 pH，必须把溶液温度升/降温至 25℃，再进行测量。酸度计的温度补偿指的是补偿温度对 pH电极的影响
PCR常见问题汇总（二）
PCR反应体系与反应条件-------------------------------------------------------------------------------- 标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液 10ul4种dNTP混合物 各200umol/L引物 各10～100p
无损检测的常见问题汇总（一）
1、什么是无损探伤/无损检测? (1)无损探伤是在不损坏工件或原材料工作状态的前提下，对被检验部件的表面和内部质量进行检查的一种测试手段。 (2)无损检测：NondestructiveTesting(缩写NDT) 2、常用的探伤方法有哪些? 无损检测方法很多据美国
无损检测的常见问题汇总（二）
9、试块的主要作用是什么? (1)校验灵敏度;(2)校准扫描线性。 10、用超生波对饼形大锻件探伤，如果用底波调节探伤起始灵敏度对工作底面有何要求? (1)底面必须平行于探伤面; (2)底面必须平整并且有一定的光洁度。 11.超声波探伤选择探头K值有哪三条
无损检测的常见问题汇总（四）
25.在超声波探伤中把焊缝中的缺陷分几类?怎样进行分类? 在焊缝超声波探伤中一般把焊缝中的缺陷 分成三类：点状缺陷、线状缺陷、面状缺陷。 在分类中把长度小于10mm的缺陷叫做点状缺陷;一般不测长，小于10mm的缺陷按5mm计。把长度大于10mm的缺陷叫线状缺陷。把长度大于10mm
无损检测的常见问题汇总（三）
17.什么是超声场? 充满超声场能量的空间叫超声场。 18.反映超声场特征的主要参数是什么? 反映超声场特征的重要物理量有声强、声压声阻抗、声束扩散角、近场和远场区。 19.探伤仪最重要的性能指标是什么? 分辨力、动态范围、水平线性、垂直线性、灵敏度、信噪
杂交实验的实验结果分析
1．在倒置显微镜下观察异源融合。在培养3天以内，可根据双新原生质体的形态特征来鉴别异核体。因为来自叶肉组织的原生质体具有明显绿色叶绿粒，而来自培养细胞的原生质体无色，但具浓密原生质丝，并可看到显示的核区。2．统计异源融合的频率
菌种保存常见问题问答汇总
1.菌株保存的是第三代，-80℃保存，再取出来活化的话属于第几代？答：保存的是第三代复活出来后，如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代，就是第四代了，如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上，这一支斜面一直就是第三代，如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则，菌株活化复苏不论以任何形
色谱峰常见问题汇总（二）
六、假峰 可能的原因可采用的排除方法 1.柱吸附样品，随后解吸 1.更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉1~2圈，再重新安装。 2.注射器污染 2.用新注射器及干净的溶剂试一试，如假峰消失，就将注射器冲洗几次。 3.样品量太大3.减少进样量。 4.进样技术差(进样
离心机常见问题汇总
1. 急停开关出现异常问题分析此类报警一般在离心机出现紧急故障按下急停开关后或设备重启时出现此类报警。处理方法只需对设备进行复位键，如复位失败需等30s后驱动变频器开关能自动切断后再进行复位即可。2. 分散单元位置不对问题分析此类报警一般在离心机开启后准备进行操作时或在分散过程中刮刀走到位后出现，由
色谱峰常见问题汇总（一）
一、峰丢失 可能的原因可采用的排除方法 1.注射器有毛病1用新注射器验证。 2.未接入检测器，或检测器不起作用2.检查设定值 3.进样温度太低3.检查温度，并根据需要调整 4.柱箱温度太低4.检查温度，并根据需要调整 5.无载气流5.检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速
菌种保存常见问题答问汇总
1.菌株保存的是第三代，-80℃保存，再取出来活化的话属于第几代？答：保存的是第三代复活出来后，如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代，就是第四代了，如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上，这一支斜面一直就是第三代，如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则，菌株活化复苏不论以任何形
酵母双杂交实验常见问题
酵母双杂交实验常见问题 1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？ 在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp，接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板，在30℃下温浴，直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0
固相萃取仪的常见问题汇总
一、固相萃取仪采用哪种上样方式适合？目前市面上常用正压上样和负压上样两种方式萃取，但负压上样因不能有效控制流速而造成回收率不稳定和仪器重复性差等原因，所以主流厂家一般采用正压上样方式，全自动固相萃取仪采用高精度注射泵正压上样洗脱样品，更加精确地控制液体流速，从而显著提高了仪器重复性并确保了样品回收率
液相色谱仪的常见问题汇总
气泡溢出流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过
Northern杂交试验指导手册（7）－杂交结果检测
方法一、化学发光检测试剂及其配制：洗膜缓冲液：100mmol Maleic acid150mmol NaCl0.3%(v/v) Tween20pH 7.5Maleic acid缓冲液：100mmol Maleic acid150mmol NaClpH 7.5封闭液：5% (w/v) SDS17mmo
分子杂交技术不同的反应条件对杂交结果的影响
(1) 根据杂交液的体积确定杂交的时间：一般来说使用较小体积的杂交液比较好，因为在小体积溶液中，核酸重新配对的速度快、探针用量少，从而使滤膜上的DNA在反应中起主要作用。但在杂交中必须保证有足够的杂交溶液覆盖杂交膜。 (2) 根据所用的杂交溶液确定杂交的温度：一般来说，杂交相为水溶液时,则在6
正压固相萃取仪的常见问题汇总
正压固相萃取仪试验时的常见疑问探讨： 1.固相萃取采用哪种上样方式适合？ 目前市面上常用正压上样和负压上样两种方式萃取，但负压上样因不能有效控制流速而造成回收率不稳定和仪器重复性差等原因，所以主流厂家一般采用正压上样方式，固相萃取仪采用高精度注射泵正压上样洗脱样品，更加准确地控制液体流速，从而显
生物安全柜常见问题大汇总
请勿堵塞生物安全柜前后的穿孔格栅。生物安全柜的进气口通过堵住烤架而变得灰暗。在生物安全柜的开口处堵塞烤架也可能使被污染的房间空气不经过滤地进入柜内。 不要将不需要的设备或耗材存放在机柜中。内阁越混乱，空气流动的破坏就越大。 请勿使用机柜的顶部进行存放。HEPA过滤器可能会损坏并且气流中断。