Cre重组酶的基本信息

Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1] 。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白,分子量约38kDa。它可以识别催化两个LoxP位点之间发生同源重组,从而造成DNA的缺失、易位等现象。这一特性在基因工程操作中得到多方面的应用,尤其在诱导型基因剔除(Gene Knockout)小鼠的建立中应用得十分成功,因为通过可诱导表达cre酶的转基因小鼠与从ES细胞途径获得的工程小鼠交配,就能有效地获得诱导型基因剔除小鼠。为此,建立可诱导表达cre的转基因小鼠,对于建立制备诱导型基因剔除小鼠至关重要,而且对于某些采用cre-LoxP系统进行体内研究的项目来说也是必不可少的。......阅读全文

Cre重组酶的基本信息

Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1]  。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白,分

Cre重组酶的基本信息介绍

  Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。  Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白,分子量

什么是Cre重组酶?

  Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1] 。   Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种

Cre重组酶的结构和来源

Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡   。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白,分子量约

CreloxP-基因重组技术

re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术,被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位,在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶,是causes recombination的缩写,于1981 年从 P1 噬菌体中被发现,属于 λIn

CreloxP-基因重组技术

re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术,被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位,在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶,是causes recombination的缩写,于1981 年从 P1 噬菌体中被发现,属于 λIn

CreloxP重组系统技术详解

Cre-loxP重组系统一.Cre-loxP重组系统作用原理1. Cre重组酶和loxP位点Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性

CreloxP重组系统技术详解

  Cre-loxP重组系统   一.Cre-loxP重组系统作用原理   1. Cre重组酶和loxP位点   Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,

Small:利用近红外光触发Cre重组酶介导的基因组编辑

  在细胞中进行基因组编辑的一个主要障碍是细胞本身。美国加州大学圣塔芭芭拉分校化学与生物化学系教授Norbert Reich解释道,“人细胞不喜欢摄入东西。”人细胞已形成一种“垃圾处理”机制来分离和降解外来的蛋白、其他的不想要的生物分子和病原体,甚至是受损的细胞结构。因此,对生物技术、生物制药和基因

条件性基因敲除的基本原理Cre/loxP重组系统

条件性基因敲除的基本原理 Cre / loxP 重组系统条件性基因 敲除主要是通过Cre/10xP或者Ftp/FRT重组系统来实现的。这两个系统都是位点特异性重组酶系统,已发展成为在体内、外进行遗传操作的有力工具。这两个系统的应用,可以使靶基因的表达或缺失发生在试验动物发育的某一阶段或某一特定的组织

知识分享:维真-CreloxP-重组系统腺相关病毒产品说明

  一.Cre-loxP重组系统作用原理  Cre重组酶和loxP位点  Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。

RNA重组的基本信息

中文名称RNA重组英文名称RNA recombination定  义RNA分子内或分子间发生的共价重新组合。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

什么是重组酶?

中文名称重组酶英文名称recombinase定  义参与基因定位重组过程的酶。负责识别、切割特异的重组位点,并连接两个参与重组的分子。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

重组酶聚合酶扩增叙述

  重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37℃左右。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链D

DNA重组的基本信息简介

  DNA重组(DNA recombination)实质上指的是遗传重组(genetic recombination),也称为遗传改组(genetic reshuffling),是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生

重组系统腺相关病毒产品说明

一.Cre-loxP重组系统作用原理Cre重组酶和loxP位点Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。LoxP(l

DNA重组技术-酶切

实验概要        通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理   DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。     限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DN

RPA重组酶是什么?

  2006 年,Piepenburg 等首次提出了重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重组酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和单链结合蛋白(gp32)以及两条特异性的上下游引物参与的等温扩增。  首先, T4 uvsX

南模生物小鼠模型在构建一种全新诱导型Cre重组酶系统...

南模生物小鼠模型在构建一种全新诱导型Cre重组酶系统的应用Cre-loxP介导的遗传操作技术,广泛应用于谱系示踪、基因异位表达和组织特异性基因敲除等研究,为了解器官发育、组织再生和疾病进程中体内细胞行为和基因功能提供了关键依据。然而,Cre-loxP介导的遗传操作技术长期存在的缺陷和不足,已成为阻碍

关于DNA重组的基本信息介绍

  DNA重组(DNA recombination)实质上指的是遗传重组(genetic recombination),也称为遗传改组(genetic reshuffling),是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生

关于重组子的基本信息介绍

  重组子(recon):两个位于不同载体或染色体上的突变位点之间可发生交换产生野生型的最小单位,即不能由重组分开的基本单位。重组子(recombinant)另一定义是指,含有重组DNA分子的转化细胞。  转化(transformation)是将异源DNA分子导入另一细胞品系 [1] ,使受体细胞获

什么酶重组等温扩增技术?

通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定重组酶、外切酶、聚合酶等多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,建立特殊扩增反应体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增

重组质粒双酶切鉴定

  既然你的质粒已经提出来了,那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。  你看看双酶切后载体的位置有几条带,如果是两条,那说明酶切不完全,如果是一条,那说明酶切效率没问题。  pET28a分子量为5.6k,你的插入片段为500bp,如果你的质粒完全切开,载体和插入片段的摩尔比为1:1,质量比就是5.6

DNA重组技术:酶切、连接

实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。   5’…G↓A

重组克隆筛选(酶切鉴定)

【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理;2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统,其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说,重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入

重组酶聚合酶扩增(RPA)技术简介

核酸检测革命:可替代PCR的犀利技术——RPA重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA

基因敲除技术概述(二)

2.1.2条件性基因敲除法条件性基因敲除法可定义为将某个基因的修饰限制于小鼠某些特定类型的细胞或发育的某一特定阶段的一种特殊的基因敲除方法[2]。它实际上是在常规的基因敲除的基础上,利用重组酶Cre介导的位点特异性重组技术,在对小鼠基因修饰的时空范围上设置一个可调控的“按钮”,从而使对小鼠基因组的修

条件性基因敲除的基本原理Flp/FRT系统

条件性基因敲除的基本原理 Flp / FRT 系统该系统与Cre/loxP系统相同,也是由一个重组酶 和一段特殊的DNA序列组成。从进化的角度上考虑,Flp/FRT系统是Cre/loxP系统在真核细胞内的同源系统。其中.重组酶Flp是酵母细胞内的一个由423个氨基酸组成的单体蛋白。与Cre相似,Fl

twistDx-的重组酶聚合酶扩增(RPA)技术原理

twistDx 的重组酶聚合酶扩增(RPA)将彻底改变在资源有限的现场环境中扩增和检测核酸的能力。RPA 技术原理RPA 体系的重点是重组酶,这些酶与寡核苷酸引物形成复合体,并使引物与双链 DNA 中的同源序列配对。单链 DNA 结合(SSB)蛋白与被取代的 DNA 链结合,并使形成的 D 环保

条件基因剔除转基因动物

实验概要本文介绍了条件基因剔除转基因动物技术。条件基因剔除转基因动物技术把靶基因的灭活限定于特定时间和某一特定组织细胞内,这将使基因剔除技术具有更大的应用价值。实验步骤1. 条件基因剔除技术    1) 重组酶真核系统所广泛用的4种位点特异重组系统包括:       a. P1噬菌体的Cre/Lox