腺病毒的病毒分离与鉴定
1、分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物，粪便和尿液等，加抗生素处理过夜，离心取上清接种敏感细胞（293、Hep-2或HeLa细胞等），37℃孵育后可观察到典型CPE，即细胞变圆、团聚、有拉丝现象，最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。 2、病毒鉴定 用荧光标记的抗六邻体抗体与分离培养细胞作用来鉴定腺病毒，也可用血凝抑制（hemoagglutination inhibition，HI）试验或中和试验（neutralization test，NT）检测属和组特异性抗原并鉴定病毒的血清型。 腺病毒可用Shell vial技术进行快速鉴定。病毒标本经抗生素和离心处理，取上清接种于有细胞的Shell vial培养瓶，孵育1～2天，用特异性六邻体单克隆抗体对其抗原表位进行检测。也可用病人鼻粘膜上皮脱落细胞直接染色检测病毒抗原。 用DNA杂交或内切酶酶切等鉴定分离培养的病毒DNA；PCR可用于腺病毒感......阅读全文
腺病毒包装技术的简介
腺病毒（Adenovirus）是最高效可靠的重组病毒表达系统之一，可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。其具备以下优点： 1. 宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞，除可感染几乎所有人的细胞类型外，还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。 2. 因
概述腺病毒的生活周期
腺病毒的生活周期可以分为两个截然不同却又不能割裂开来的两个阶段。第一阶段包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞，将基因组释放到宿主细胞核中，以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段，细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒，即第二阶段，作好了准备。第一阶段将在6~8个小时内
关于腺病毒的分类介绍
分类及自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来，已陆续发现了100余个血清型，其中人腺病毒有52种，分为A、B、C、D、E和F六个亚群（subgroup）。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清学分类上均属C亚群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强，滴度通常可以达到109p
腺病毒载体的分类介绍
第一代腺病毒载体：一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体，此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应，纯化后可以安全使用，体内表达周期可达4周。 第二代腺病毒载体：E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性
概述腺病毒的研究简史
人体腺病毒已知有52种，分别命名为adl～ad52，研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA，已知的转录单位至少有5个：EⅠ区位于病毒基因组左侧，可再分成EⅠA和EⅠB，与细胞转化有关；EⅡ区编码DNA结合蛋白，参与病毒的复制；EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白；EⅣ区位于ad2
亚细胞结构的分离与鉴定2
第三节 微粒体的分离细胞通过匀浆破碎时，细胞质膜碎成片段，这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器（细胞核、线粒体、质膜、内质网等）的小泡有不同的特性，所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体，称微粒体（microsome）。分离
亚细胞结构的分离与鉴定1
细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分，观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为，转速为10～25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/mi
血浆清蛋白的分离纯化与鉴定
实验概要1．掌握蛋白质的分离技术2．掌握分段盐析、凝胶层析及蛋白质醋酸纤维薄膜电泳的原理及操作方法3．掌握电泳方法检测分离效果实验原理 不同的蛋白质的分子量、溶解度、以及在一定条件下带电的情况有所不同，可以更据这些性质的差别，分离及提纯各种蛋白质。利用硫酸铵分段盐析法将血清中的清蛋
新城疫病原分离与鉴定
当临床诊断有新城疫发生时，应从发病禽或死亡禽采集病料，进行病原分离、鉴定和毒力测定。1 样品的采集、保存及运输1.1 样品采集1.1.1 采集原则。采集样品时，必须严格按照无菌程序操作。采自于不同发病禽或死亡禽的病料应分别保存和标记。每群至少采集5只发病禽或死亡禽的样品。1.1.2 样品内容发病禽：
腺病毒载体综述2
其他疗法 随着高龄人口的增加，对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒，因其可以感染有丝分裂后的细胞，同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区（immunologically privileged site）中的低病原性，因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。
真菌的分离与鉴定的检查过程
分离培养 【方法】 (1)、试管法：用无菌操作的方法，将采集的标本接种于葡萄糖蛋白琼脂(SDA)培养基斜面上，每个斜面接种3-4处，轻轻划破，置22-25℃温箱连续培养1-3周，做好观察记录。 (2)、小培养：先备好无菌玻璃平皿内有弯曲玻棒和载玻片，用无菌小刀将SDA培养基切成1cm2方块
真菌的分离与鉴定的临床意义
除少数真菌培养不成功外，多数真菌能人工培养，根据菌落的外观及镜下特征以确定菌种，弥补直接镜检的不足。 异常结果：浅部真菌(癣菌)仅侵犯皮肤、毛发和指(趾)甲，而深部真菌能侵犯人体皮肤、黏膜、深部组织和内脏，甚至引起全身播散性感染。深部真菌感染肠道即表现为真菌性肠炎，可独立存在如婴儿念珠菌肠炎，
真菌的分离与鉴定的注意事项
(1)、严格无菌操作，避免污染，在培养期间，如发现污染菌生长，应立即转种。 (2)、接种后的第二天开始逐日观察，并记录生长情况。培养阳性可确立诊断。阴性者需培养3周方可发 报告。 (3)、同时培养数管或连续三次培养，特别是呼吸道、肠道等部位的标本，以确保菌种的可靠性。 (4)、真菌的粉末状
腺病毒的抗原检测的介绍
常用来直接检测腺病毒在呼吸道和胃肠道的感染，较快速且灵敏度较高。免疫荧光(尤其对呼吸道标本、咽拭子和活组织标本)和酶免疫分析(尤其对于粪便标本)是常用的方法，与细胞培养相比，免疫荧光所测腺病毒的灵敏性能提高40%~60%，其它直接测定抗原的方法包括免疫层析法和乳胶凝集法。研究证实，与细胞培养检测
英美不明原因儿童肝炎与二型腺病毒有关
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/4/497871.shtm
简述沙门氏杆菌的分离与鉴定
1．标本：根据伤寒病的病程采取不同标本，通常第1～2周取血液，第2～3周取粪便或尿液。急性肠炎取患者吐泻物和剩余食物。败血症取血液作培养。 2．分离培养与鉴定：血液应先接种胆汗肉汤增菌；粪便和经离心的尿沉渣可直接接种肠道杆菌选择性培养基。37℃经18～24小时培养后,挑选无色半透明的不发酵乳糖
痢疾杆菌的分离培养与鉴定诊断
标本 在用药前取粪便的脓血或粘液部分，标本不能混有尿液。如不能及时送检，应将标本保存于30%甘油缓冲盐水或增菌培养液中。中毒性菌痢可取肛门拭子检查。 分离培养与鉴定 接种肠道杆菌选择性培养基，37℃孵育18～24小时，挑取无色半透明的可疑菌落，作生化反应和血清学凝集试验，确定菌群和菌型。如
关于腺病毒诱发疾病的介绍
腺病毒对呼吸道、胃肠道、尿道和膀胱、眼、肝脏等均可感染，人腺病毒约1/3的已知血清型通常与人类疾病相关，但一种血清型可引起不同的临床疾患；相反，不同血清型也可引起同一种疾患。 一、呼吸道感染 呼吸道感染的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎，同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉痛等，包括以下4种不同的综合征
治疗腺病毒肺炎的基本介绍
1.抗病毒药物 以三氮唑核苷治疗腺病毒肺炎，滴鼻效果不明显；改用静脉和/或肌注，在早期病例较对照组为优，晚期病例则效果不明显；雾化吸入治疗的研究有待进行。 2.继发细菌感染的防治 如初步断定有继发感染即应积极治疗，例如金黄色葡萄球菌感染用新型青霉素、先锋霉素等；大肠杆菌用氨基苄青霉素等治疗
关于腺病毒的研究简史介绍
人体腺病毒已知有52种，分别命名为ad1～ad52，研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA，已知的转录单位至少有5个：EⅠ区位于病毒基因组左侧，可再分成EⅠA和EⅠB，与细胞转化有关；EⅡ区编码DNA结合蛋白，参与病毒的复制；EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白；EⅣ区位于ad2
关于腺病毒的防治原则介绍
腺病毒的甲醛灭活疫苗已被用于某些人群的预防，而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用，人们对全病毒疫苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒，可使水传播性结膜炎爆发的危险性降至最小，在作眼的检查时应严格无菌操作，对所用设备充分灭菌，也可控
腺病毒55型的信息简介
腺病毒已知有57个血清型，通常可引起呼吸道、眼部及胃肠道感染，少数情况下可引起膀胱和肝脏感染，偶见致胰腺、心肌、中枢神经系统疾病。腺病毒导致呼吸道感染的潜伏期通常为4至12天，平均8天。目前无针对性疫苗。注意个人卫生比如勤洗手是避免感染的最好办法。 因腺病毒引起的呼吸道感染暴发疫情在国内外时有
腺病毒的基本信息介绍
腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70～90 nm的颗粒，由252个壳粒呈20面体 [2] 排列构成。每个壳粒的直径为7～9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子，约含4.7kb，两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103D
腺病毒载体的应用优势介绍
腺病毒载体转基因效率高，体外实验通常接近100%的转导效率；可转导不同类型的人组织细胞，不受靶细胞是否为分裂细胞所限；容易制得高滴度病毒载体，在细胞培养物中重组病毒滴度可达（10E+11）/ml；进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组，仅瞬间表达，安全性高。因而，腺病毒载体在基因治疗临床试验方面有了
腺病毒的包装，纯化和感染
1腺病毒的包装，纯化和感染技术背景：Adeasy 系统利用了腺病毒具有的高感染能力，可高度浓缩等优点，并破坏了腺病毒基因组中的早期基因E1，使之成为较为安全、高效的病毒载体。利用带有E1 基因的293 细胞作为包装细胞，通过倍比扩增，富集病毒颗粒，并通过CsCl 梯度离心，透析进行分离纯化。对绝大多
简述腺病毒肺炎的检查方式
1.实验室检查 白细胞总数在早期（第1～5日）大都减少或正常，惟有继发细菌感染时才升高。血涂片检查，中性粒细胞碱性磷酸酶，一般较正常小儿或细菌性肺炎患儿为低。部分病儿血清冷凝集试验可为阳性。发热期间部分病例尿检查有少量蛋白。脑脊液检查一般正常。 2.X线检查 X线摄片检查，肺纹理增厚、模糊
分析腺病毒肺炎的形成病因
已知腺病毒有41个血清型别，其中很多与人类上、下呼吸道感染密切有关。3型和7型腺病毒为腺病毒肺炎的主要病原。 腺病毒是DNA病毒，主要在细胞核内繁殖，耐温、耐酸、耐脂溶剂的能力较强，除了咽、结合膜及淋巴组织外，还在肠道繁殖。可根据其对特殊动物红细胞的凝集能力分为3组，容易引起婴幼儿肺炎的3、7
腺病毒感染的病因分析
发现腺病毒有6个亚型（A～F）和55个不同的血清型（按病毒基因组分型）。已知约20余种血清型可感染人类。病毒为直径70～80纳米的20面体衣壳，内核含双股DNA。对热和酸不稳定。由于不含脂质，对胆盐等脂质溶解剂抵抗力强，故能在肠道中存活。不同亚型可引起不同感染。
腺病毒性肠炎的检查
腺病毒性肠炎--免疫电镜 临床诊断较困难，无法与其他病毒性胃肠炎区别，依赖于实验室检查确诊。采集患儿粪便，用电镜或免疫电镜检查病毒颗粒，用ELISA 法或间接免疫荧光法检查病毒抗原。 实验室检查： 1、常规检查，血常规：白细胞总数多数正常少数略为增多，细胞分类中可有淋巴细胞增加粪便检查：
治疗腺病毒肺炎的相关介绍
1、抗病毒药物：以三氮唑核苷治疗腺病毒肺炎，滴鼻效果不明显；改用静脉和/或肌注，在早期病例较对照组为优，晚期病例则效果不明显；雾化吸入治疗的研究有待进行。 2、继发细菌感染的防治：如初步断定有继发感染即应积极治疗，例如金黄色葡萄球菌感染用新型青霉素、先锋霉素等；大肠杆菌用氨基苄青霉素等治疗。