PCR法检测荧光假单胞菌的简介
针对16S rRNA 保守序列设计引物,通过 PCR 扩增,可以将牛奶中嗜冷菌扩增出147bp的 DNA片段,标记后用 ELISA 检测,得到荧光假单胞菌AH-70 的OD450和菌浓度的方程,分析得此方法和平板计数法的相关系数达到 0.94,可以检测菌浓度范围是103-107CFU/mL。PCR 检测具有很高的灵敏度,特异性较强,有文献报道当原料奶中埃希肠杆菌的浓度达到 10CFU/mL 时能被检测出来。PCR 检测菌落数结果同样会受到死菌株数的影响,而且在现实生产中对食品提取可以PCR扩增的DNA难度很大,容易被食品体系中因素影响精确度。......阅读全文
荧光PCR法与PCR荧光探针法有何不同
荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。从两者的原理上来看,不难判断,荧光PCR法更加简单方
荧光PCR法与PCR荧光探针法有何不同
荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。从两者的原理上来看,不难判断,荧光PCR法更加简单方
荧光定量PCR技术简介
国内最先进的荧光定量PCR检测系统,是国际上最新研制的一种核酸定量技术,该技术在PCR反应系统中引入了荧光标记探针,具有高灵敏性、高特异性、和高精确性的特点。目前已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变和多态性研究等多个领域。荧光定量PCR(简称FQ-PCR)由美国PE公司199
实时荧光定量PCR简介
荧光定量PCR检测技术从诞生到现在已经有 8 年了,但是其应用在近四年才迅猛增长。在 Medline 数据庫中,用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索,在1996 年仅有 19 篇,在 1997 年仅有 28 篇,在 98 、 99 、2000 年分别达到了
荧光定量PCR检查简介
实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBi
假单胞菌产生的絮凝剂处理高浊度废水的最佳条件是什么?
假单胞菌产生的絮凝剂处理高浊度废水的最佳条件会受到多种因素的影响,以下是一些常见的需要考虑和优化的条件:微生物培养条件:包括培养基成分、培养温度、pH 值、培养时间和通气量等。合适的培养条件有助于假单胞菌产生高效的絮凝剂。絮凝剂投加量:需要通过实验确定最佳的投加量,投加量不足可能无法达到理想的絮凝效
荧光PCR/实时定量PCR技术应用简介
一.荧光PCR原理1.荧光共振能量传递 (FRET)某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之为FRET。2.荧光化学:荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加
产超广谱β一内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性探讨
铜绿假单胞菌由于分离率高、耐药性广泛,其感染治疗困难、死亡率高.并时有暴发流行而成为医院感染和抗生素耐药的新热点,也是临床治疗的难点一 。近年来,由于第三代头孢菌素的大量应用,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌甚至铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)都相继出现了超广谱 内
34株多重耐药铜绿假单胞菌β内酰胺酶基因及Ⅰ类整合子...
34株多重耐药铜绿假单胞菌β内酰胺酶基因及Ⅰ类整合子检测分析【摘要】 目的:探讨我院临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶相关基因及Ⅰ类整合子(intⅠ1和qacE△1-sul1)的携带情况,为临床抗感染治疗和控制医院感染提供依据。方法:采用K-B法对临床分离的铜绿假单胞菌进行药敏试验
广西抽检440批次样品!饮用纯净水铜绿假单胞菌超标
广西壮族自治区市场监督管理局网站发布食品安全监督抽检信息通告(2019年第128期)。据通告,近期,广西壮族自治区市场监督管理局组织抽检10类食品440批次样品,不合格19批次。 其中,钦州白海豚饮品有限公司生产的“饮用纯净水”检出不合格,不合格项目为铜绿假单胞菌。 铜绿假单胞菌是一种条件致
铜绿假单胞菌T3SS抑制剂研究获新进展
华南农业大学群体微生物研究中心教授崔紫宁团队在铜绿假单胞菌III型分泌系统(T3SS)抑制剂研究方面取得新进展。相关成果近日在线发表于《农业与食品化学杂志》(Journal of Agricultural and Food Chemistry)。铜绿假单胞菌是一种重要的条件性致病菌,由于其自身具有强
铜绿假单胞菌T3SS抑制剂研究获新进展
华南农业大学群体微生物研究中心教授崔紫宁团队在铜绿假单胞菌III型分泌系统(T3SS)抑制剂研究方面取得新进展。相关成果近日在线发表于《农业与食品化学杂志》(Journal of Agricultural and Food Chemistry)。铜绿假单胞菌是一种重要的条件性致病菌,由于其自身具有强
黑龙江:饮用水又不合格-铜绿假单胞菌成“惯犯”
黑龙江省食药监局今日(4月6日)公告,帽儿山天然矿泉水和天岭包装饮用水在该局近期抽检中检出不合格,据悉,这是今年黑龙江省抽检中第三次饮用水检出不合格。 据悉,在1月9日、1月16日公布的第3、4期抽检中,黑龙江佳人天然饮品有限公司生产的华黛佳人饮用纯净水、五大连池苏打矿泉饮品有限责任公司生
荧光定量PCR染料法介绍
荧光定量PCR仪负责监控反应体系中荧光强度的变化,记录检测荧光达到阈值时的循环数。从理论上说,每一个qPCR循环会使目标序列翻倍,因此人们可以在Ct值的基础上对样本进行定量。 荧光定量PCR主要分为染料法和探针法两种。染料法一般采用DNA染料,这种方法不仅使用简单,成本也z
荧光PCR法测猫杯状病毒的检测方法及原理
轻微的猫杯状病毒通常会让猫咪无精打采,有时会出现打喷嚏、口部眼部的分泌物增多等情况。病情严重是会导致猫咪呼吸困难,引起肺部炎症。虽然该病的率很低,但是却有着很强的传染性,需要及时进行诊断。由于多种病毒均可引起猫的呼吸道疾患,且症状具有类似之处,因此诊断较为困难。猫杯状病毒(FCV)属于RNA病毒,具
实时荧光定量PCR的原理简介
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 检测方法 1.SYBRGreenⅠ法: 在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信
荧光定量PCR:简介,原理,应用
荧光定量PCR简介 荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据
荧光定量PCR:简介、原理、应用
荧光定量PCR的应用分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理
实时荧光定量PCR技术简介
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入
实时荧光PCR检测技术
实时荧光PCR检测技术众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能
荧光定量PCR检测方法
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 检测方法 1.SYBRGreenⅠ法: 在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信
什么是荧光PCR检测
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探
铜绿假单胞菌、大肠菌群等指标不合格-这6批次饮料需留心
据河北省食药监局通报,近期,该局组织抽检粮食加工品、饮料、罐头、速冻食品、糖果制品、水果制品等6类食品31批次样品,6批次饮料检出不合格,涉及铜绿假单胞菌、大肠菌群等指标。 通报显示,6批次不合格产品中饮用水占了5批次,均检出铜绿假单胞菌,包括:保定冠宁饮品制造有限公司生产的冠宁山泉天然弱碱性
重庆5批次不合格食品情况的通告,涉及铜绿假单胞菌等
近期,重庆市市场监督管理局组织抽检饼干、餐饮食品、茶叶及相关制品、炒货食品及坚果制品、蛋制品、淀粉及淀粉制品、豆制品、方便食品、蜂产品、糕点、罐头、酒类、可可及焙烤咖啡产品、粮食加工品、肉制品、乳制品、食糖、食用农产品、糖果制品、饮料等20类食品459批次样品。抽样检验项目合格样品454批次,不
牙龈假单胞菌在结直肠癌病因中的有一定作用
2021年5月25日中山大学在CANCER RESEARCH杂志上发表了题为"Porphyromonas gingivalis Promotes Colorectal Carcinoma by Activating the Hematopoietic NLRP3 Inflammasome"的文章
铜绿假单胞菌耐药表型分析及MALDITOF-MS在其同源性分析
目的:初步分析我院某科铜绿假单胞菌耐药表型及评价采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry ,MALDI-TOF MS)的VITEK MS质谱仪(
一例颈椎后路术后切口不愈合伴铜绿假单胞菌感染病例...
一例颈椎后路术后切口不愈合伴铜绿假单胞菌感染病例报告病例报道患者,男,46岁,因外伤致颈髓损伤(C4平面),外伤2个月后在原急诊医院行颈椎后路切开减压加侧块螺钉内固定术,术后1周为方便护理转本院继续治疗。入院查体:颈椎强直,颈后正中见自枕骨至C6棘突长约11CM纵形切口,敷料渗出,量较少,渗出为淡黄
一例应用罗红霉素辅助治疗铜绿假单胞菌感染病例分析
铜绿假单胞菌是临床上分离率较高的条件致病菌,其耐药率高、致病力强,是医院院内感染监测细菌的重点,多重耐药、泛耐药超级铜绿假单胞菌的出现,给临床防治带来更大的挑战。作者作为临床药师参与了1例耐药铜绿假单胞菌肺部感染患者的抗感染治疗,协助医生制定抗感染治疗方案,患者病情得到控制,达到预期效果并好转出院。
江西食药监局:7批次饮用水检出铜绿假单胞菌、铅等
12月22日,江西省食药监局发布最新一期食品安全抽检信息,通报了7批次不合格饮用水,主要为检出铜绿假单胞菌、铅、耗氧量、大肠菌群等不合格。 抽检中发现,有4批次饮用水被检出铜绿假单胞菌不合格,其中有1批次同时被检出大肠菌群超标。分别为:金溪县武夷之源矿泉水有限公司生产的“山之脉”包装饮用水(生
PCR产物的检测PCRELISA法
在一个引物的5’端标记上生物素以便使其能与包被板上的亲合素结合而固定PCR产物,而在另一引物的5’端标记FITC,用HRP标记的抗FITC抗体与之结合显色,即可进行常规ELISA检测。如设立标准对照,此技术还可用于定量分析。 【试剂与配置】 包被液:4.3mmol/L Na2HPO4,