凝胶过滤层析的原理
基本原理:凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。凝胶层析的特点:1)凝胶层析操作简便,所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质——凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。2)分离效果较好,重复性高。最突出的是样品回收率高,接近100%。3)分离条件缓和。凝胶骨架亲水,分离过程又不涉及化学键的变化,所以对分离物的活性没有不良影响。4)应用广泛。适用于各种生化物质,如肽类、激素、蛋白质、多糖、核酸的分离纯化、脱盐、浓缩以及分析测定等。分离的分子量范围也很宽,如Sephadex G类为102......阅读全文
凝胶过滤实验
蛋白质纯化的层析技术中,凝胶过滤比较独特,它是基于蛋白质分子质量的相对大小而分离。与传统的过滤相反,通过凝胶过滤柱后,并没有任何蛋白质留存于其中。凝胶过滤优缺点明显;优点在于,脆性蛋白质与层析固定相结合并不会破坏其功能;缺点在于,和凝胶不结合则限制层析的分辨率。作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来
凝胶过滤色谱
根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。
凝胶过滤实验
操作采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V 。,它表示颗粒外部的体积。可以进人介质的分子的体积定义为总体积%, 它表示
凝胶过滤实验
实验步骤 操作 采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤
凝胶过滤层析简介
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离
凝胶过滤层析实验
蛋白质的凝胶过滤分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的
凝胶过滤层析简介
支持物是人工合成的交联高聚物,在水中膨胀后成为凝胶。凝胶内为内水层,凝胶周围的水为外水层。控制交联度以形成不同孔径的网状结构。交联度小的孔径大,交联度大的孔径小。凝胶只允许被分离物质中小于孔径的分子进入,大于孔径的分子被排斥在外水层,最先被洗脱下来。而进入孔径的分子也按分子量大小大致分离成不同的
凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分
凝胶过滤层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 凝胶过滤缓冲液仪器、耗材 布氏漏斗凝胶过滤层析柱分光光度计实验步骤 1. 如果凝胶过滤的介质是干粉,则需在凝胶过滤缓冲液中完全溶胀。2. 在远离过往通道及直接光照的恒温环境,将层折柱垂直安装在稳固的实验室支架上。3. 用一注射器将凝胶过滤缓冲液从柱子的输出管注入柱
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验材料蛋白质试剂、试剂
凝胶过滤层析的凝胶层析的应用
⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱长与直径之比为5-15,样品体积可达柱床体积的25%-
凝胶过滤层析的优点
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
凝胶过滤层析的优点
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
凝胶过滤层析的原理
基本原理:凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混
凝胶过滤层析的优点
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
凝胶过滤层析的优点
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
凝胶过滤层析的定义
凝胶过滤层析是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行洗脱分离的一项技术。
什么是凝胶过滤层析
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离
凝胶过滤层析的应用
⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱长与直径之比为5-15,样品体积可达柱床体积的25
凝胶过滤层析的优点
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
凝胶过滤层析的原理
基本原理:凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混
凝胶过滤层析的原理
凝胶过滤层析的原理是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行洗脱分离,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当
凝胶过滤层析的原理
凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液
凝胶过滤色谱与凝胶渗透色谱的区别
凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
凝胶过滤色谱-与凝胶渗透色谱的区别
凝胶过滤色谱 与凝胶渗透色谱的区别是凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
凝胶过滤色谱仪分类
凝胶过滤色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室凝胶过滤色谱仪和工业凝胶过滤色谱仪。2、按功能可分:分析型凝胶过滤色谱仪和制备型凝胶过滤色谱仪。3、按灵敏性可分:微量凝胶过滤色谱仪和痕量凝胶过滤色谱仪。4、按产地可分:国产凝胶过滤色谱仪和进口凝胶过滤色谱仪。5、按使用范围可分:专用型凝胶过滤色谱
如何装填凝胶过滤柱实验
试剂、试剂盒 XK26 40 柱SephacrylS-300 HR蓝葡聚糖TM 缓冲液+0.1mol LKCl实验步骤 材料和设备XK26/40 柱(PharmaciaBiotech,Inc*)SephacrylS-300 HR(PharmaciaBiotech,Inc.)蓝葡聚糖试剂TM 缓冲液+
凝胶过滤层析的技术特点
凝胶过滤层析是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行洗脱分离的一项技术。 凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称为排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的