木瓜蛋白酶的酶活测定

一、基本原理 木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。 酶活单位 在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。 二、试液制备 1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LEDTA、50mmol/L半胱氨酸液2.6mL,加适量水,用0.1mol/L氢氧化钠液调节pH至6.2,最后定容至50.0mL。 2、待测酶液:取试样用水稀释至适当浓度,并调节至pH6.2。 三、测定方法 25℃恒温条件下,取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上,加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL,混合后加入待测酶液后立即计时,用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2,记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校正。按......阅读全文

木瓜蛋白酶的功能特性

《GB 2760-2011 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》规定,木瓜蛋白酶可用作食品工业在的加工助剂(酶制剂)。一般应在制成最后成品之前除去(规定有残留量者除外)。  木瓜蛋白酶主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的浑浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类软化)、谷类

木瓜蛋白酶的催化机制

木瓜蛋白酶的剪切肽键的机制包括:在His-159作用下Cys-25去质子化,而Asn-158能够帮助His-159的咪唑环的摆放,使得去质子化可以发生;然后Cys-25亲核攻击肽主链上的羰基碳,并与之共价连接形成酰基-酶中间体;接着酶与一个水分子作用,发生去酰基化,并释放肽链的羰基末端。

关于溶葡萄球菌酶的酶活测定方法介绍

  比浊法是最常用的一种方法,也是Sigma和AMBI公司采用的方法。检测时可将金黄色葡萄球菌的新鲜培养物悬于缓冲液中,溶葡萄球菌酶作用过程中定量的降低菌液的浊度,浊度下降值与酶量成正比,通过测定吸光度下降值可计算出样品中的酶活性。比浊法的缺点是: ① 检测中使用的底物为金黄色葡萄球菌菌体细胞,使用

木瓜蛋白酶应用介绍

食品工业在食品行业中,木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。 啤酒澄清剂引起啤酒冷藏混浊时主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。利用啤酒澄清剂中的木瓜蛋白酶对形成混浊的蛋白质有广泛的特异性,能把大分子的蛋白质降解成小分子的物质,提高了蛋白质与多元酚复合物的溶解度;另

木瓜蛋白酶制法用途

制法 由木瓜(Carica papaya)的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。用途 酶制剂。主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的混浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化)、谷类预煮的准备、水解蛋白质的生产。在啤酒抗寒和肉类

木瓜蛋白酶性状描述

性状描述 白色至浅棕黄色定形粉末,有一定吸湿性,或为液体,溶于水和甘油,水溶液无色至淡黄色,有时呈乳白色,几乎不溶于乙醇 、氯仿和乙醚等有机溶剂。由木瓜制得的商品酶制剂中,含有如下三种酶:1.木瓜蛋白酶,分子量21000,约占可溶性蛋白质的10%,2.木瓜凝乳蛋白酶,分子量36000,约占可溶性蛋白

什么是木瓜蛋白酶?

木瓜蛋白酶(Papain)简称木瓜酶,又称为木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果实中的乳汁,采用现代生物工程技术提炼而成的天然生物酶制品。它是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力,同时,还具

β葡萄糖苷酶的提取、纯化及酶活测定方法

β-葡萄糖苷酶的提取方法不同来源的β-葡萄糖苷酶,其提取方法也有所不同。动植物体及大型真菌中的糖苷酶一般需要对酶源进行组织捣碎,然后用缓冲液浸提。常用的缓冲液有磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液等。pH值一般选用酶的稳定pH值;提取温度适于低温,一般为4 ℃。利用微生物发酵法生产β-葡萄糖苷

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定实验

实验方法原理 待到血浆加入部分凝血活溶液,在Ca2+参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间,(APTT).APTT测定是内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前肽释放酶的测定,同时,APTT

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定实验

实验方法原理到血浆加入部分凝血活溶液,在Ca2+参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间,(APTT).APTT测定是内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前肽释放酶的测定,同时,APTT测定

木聚糖酶酶活测定方法有哪些

对酶制剂中各种酶活性进行定量分析具有重要意义。首先,它是酶制剂和饲料产品质量检测的依据。酶制剂是生命活性物质,其活性随饲料的加工保存时间与条件以及饲料中其它成分的变化而变化,因此应对各个生产环节添加酶制剂的实际效价进行检测。其次,准确的酶活检测方法也是根据饲料中NSP含量和组成来合理调整添加酶的种类

​木瓜蛋白酶的基本信息

木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点

关于木瓜蛋白酶的基本介绍

  木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等

简述木瓜蛋白酶的催化机制

  木瓜蛋白酶的剪切肽键的机制包括:在His-159作用下Cys-25去质子化,而Asn-158能够帮助His-159的咪唑环的摆放,使得去质子化可以发生;然后Cys-25亲核攻击肽主链上的羰基碳,并与之共价连接形成酰基-酶中间体;接着酶与一个水分子作用,发生去酰基化,并释放肽链的羰基末端。

木瓜蛋白酶的功效是什么

  木瓜蛋白酶可能具有助消化的功效。该药物一般具有消炎、利胆、止痛以及助消化等功效。通常可以用于治疗患者的妇科疾病,以及青光眼等疾病,同时还可以用于治疗患者的关节退行性变、血型鉴别以及昆虫叮咬等症状。该药物可能具有促进血液循环,以及改善肌肤等作用,患者可以在医生的指导下选择用药。

木瓜蛋白酶的组成结构介绍

  番木瓜未成熟果实中含有木瓜蛋白酶(Papain)、木瓜凝乳蛋白酶A(Chymopapain A )、木瓜凝乳蛋白酶B(Chym opapain B )、木瓜肽酶B (PapayaPeptidase B ) 等多种蛋白水解酶。且已知四种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具有高度的同源性。其中,木瓜蛋白酶属巯

国内木瓜蛋白酶的发展行情

目前木瓜蛋白酶的市场相对稳定,但产品品质层次不齐,主要体现在酶活力没有办法保证,一些企业的木瓜蛋白酶单价便宜,而且非常诱人,但是酶活力不够稳定,产品质量得不到保证,放置一段时间后酶活力逐步下降,给技术、检测和生产增加了成本,降低了生产效率。因此在购买木瓜蛋白酶时,应选择广西及广东一带原料产地的厂家,

木瓜蛋白酶的生产制备方法

由木瓜的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。木瓜蛋白酶韵生产方法有三种,分别是直接热风烘干法、喷雾干燥法及膜分离冻干法。直接烘干生产方法较简单、快速,但生产出来的成品只是粗酶,杂质多、色泽差且微生物超标,酶活力也较低,只有60万~80万单位/g。多为个体

木瓜蛋白酶的功能特性介绍

  《GB 2760-2011 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》规定,木瓜蛋白酶可用作食品工业在的加工助剂(酶制剂)。一般应在制成最后成品之前除去(规定有残留量者除外)。  木瓜蛋白酶主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的浑浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类软化)、

木瓜蛋白酶的特性和来源

木瓜蛋白酶papain属巯基蛋白酶,具有较宽的底物特异性,作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L-瓜氨酸残基羧基参与形成的肽键。此酶属内肽酶,能切开全蛋蛋白质分子内部肽链—CO—NH—生成分子量较小的多肽类。存在于木瓜胚乳中的蛋白酶。EC3.4.22.2。作为植物来源的蛋白酶来说,此酶研究

木瓜蛋白酶的生产方法介绍

  由木瓜的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。木瓜蛋白酶韵生产方法有三种,分别是直接热风烘干法、喷雾干燥法及膜分离冻干法。 [2]  1、直接烘干  生产方法较简单、快速,但生产出来的成品只是粗酶,杂质多、色泽差且微生物超标,酶活力也较低,只有60万~

木瓜蛋白酶的应用范围介绍

  木瓜蛋白酶在医药、食品、饮料、化学试剂、饲料、纺织化妆品等方面都有广泛的应用,开发前景广阔。  1、食品工业  在食品行业中,木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。  2、啤酒澄清剂  引起啤酒冷藏混浊时主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。利用啤酒澄清剂中的木

简述激活的部分凝血活酶时间的测定原理

  在待测血浆加入部分凝血活酶溶液,在Ca2+参与下纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间,是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验。

酶活测定OD值超过1怎么办

重新测,降低底物或显色剂的浓度,

木瓜蛋白酶的基本性状描述

白色至浅棕黄色定形粉末,有一定吸湿性,或为液体,溶于水和甘油,水溶液无色至淡黄色,有时呈乳白色,几乎不溶于乙醇 、氯仿和乙醚等有机溶剂。由木瓜制得的商品酶制剂中,含有如下三种酶:1.木瓜蛋白酶,分子量21000,约占可溶性蛋白质的10%,2.木瓜凝乳蛋白酶,分子量36000,约占可溶性蛋白质的45%

木瓜蛋白酶的结构和功能特点

木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点

木瓜蛋白酶的制备方法及用途

制法 由木瓜(Carica papaya)的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。用途 酶制剂。主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的混浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化)、谷类预煮的准备、水解蛋白质的生产。在啤酒抗寒和肉类

木瓜蛋白酶的化学性质

木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。它的外观为白色至浅黄色的粉末,微有吸湿性;木瓜蛋白酶溶于水和甘油,水溶液为无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋

木瓜蛋白酶的化学性质

  木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。它的外观为白色至浅黄色的粉末,微有吸湿性;木瓜蛋白酶溶于水和甘油,水溶液为无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植

木瓜蛋白酶的化学性质

木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。它的外观为白色至浅黄色的粉末,微有吸湿性;木瓜蛋白酶溶于水和甘油,水溶液为无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋