木瓜蛋白酶的酶活测定
一、基本原理 木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。 酶活单位 在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。 二、试液制备 1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LEDTA、50mmol/L半胱氨酸液2.6mL,加适量水,用0.1mol/L氢氧化钠液调节pH至6.2,最后定容至50.0mL。 2、待测酶液:取试样用水稀释至适当浓度,并调节至pH6.2。 三、测定方法 25℃恒温条件下,取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上,加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL,混合后加入待测酶液后立即计时,用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2,记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校正。按......阅读全文
木瓜蛋白酶的酶活测定
一、基本原理 木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。 酶活单位 在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。 二、试液制备 1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐
木瓜蛋白酶的酶活测定
基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LE
木瓜蛋白酶的酶活测定方法
25℃恒温条件下,取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上,加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL,混合后加入待测酶液后立即计时,用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2,记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校正。
木瓜蛋白酶的酶活测定原理是什么
木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。 酶活单位 在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。 试液制备 1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10m
木瓜蛋白酶的酶活测定原理和方法
本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.
木瓜蛋白酶的酶活性的测定
本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.
木聚糖酶酶活测定方法
对酶制剂中各种酶活性进行定量分析具有重要意义。首先,它是酶制剂和饲料产品质量检测的依据。酶制剂是生命活性物质,其活性随饲料的加工保存时间与条件以及饲料中其它成分的变化而变化,因此应对各个生产环节添加酶制剂的实际效价进行检测。其次,准确的酶活检测方法也是根据饲料中NSP含量和组成来合理调整添加酶的种类
活化部分凝血活酶时间测定
[原理] 在抗凝血浆中,加入足量的活化接触因子激活剂和部分凝血活酶(代替血小板的磷脂),再加入适量的钙离子即可满足内源抗凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需的时间即称为活化部分凝血活酶时间(activated partialthromboplastin time,APTT)
木聚糖酶酶活测定方法
对酶制剂中各种酶活性进行定量分析具有重要意义。首先,它是酶制剂和饲料产品质量检测的依据。酶制剂是生命活性物质,其活性随饲料的加工保存时间与条件以及饲料中其它成分的变化而变化,因此应对各个生产环节添加酶制剂的实际效价进行检测。其次,准确的酶活检测方法也是根据饲料中NSP含量和组成来合理调整添加酶的种类
木瓜蛋白酶的用途
用途 酶制剂。主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的混浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化)、谷类预煮的准备、水解蛋白质的生产。在啤酒抗寒和肉类软化方面的应用,远比其他蛋白酶类广泛。用量一般为1~4mg/kg。
木瓜蛋白酶的介绍
木瓜蛋白酶(Papain),又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等
木瓜蛋白酶的应用
食品工业 在食品行业中,木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。 啤酒澄清剂 引起啤酒冷藏混浊时主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。利用啤酒澄清剂中的木瓜蛋白酶对形成混浊的蛋白质有广泛的特异性,能把大分子的蛋白质降解成小分子的物质,提高了蛋白质与多元酚复合
木瓜蛋白酶Papain
CAS编码 9001-73-4英文通用名称 Papain中文通用名称 木瓜蛋白酶性状描述 白色至浅棕黄色定形粉末,有一定吸湿性,或为液体,溶于水和甘油,水溶液无色至淡黄色,有时呈乳白色,几乎不溶于乙醇 、氯仿和乙醚等有机溶剂。由木瓜制得的商品酶制剂中,含有如下三种酶:1.木瓜蛋白酶,分子量21000
木瓜蛋白酶简介
CAS编码 9001-73-4英文通用名称 Papain中文通用名称 木瓜蛋白酶性状描述 白色至浅棕黄色定形粉末,有一定吸湿性,或为液体,溶于水和甘油,水溶液无色至淡黄色,有时呈乳白色,几乎不溶于乙醇 、氯仿和乙醚等有机溶剂。由木瓜制得的商品酶制剂中,含有如下三种酶:1.木瓜蛋白酶,分子量21000
关于亚硝酸还原酶的酶活测定的介绍
NiRs是胞内酶,其氧化还原反应过程中需要供体电子,且大多需要在厌氧条件下进行。因此体外检测亚硝酸还原酶时需要在密闭无氧且有电子供体的情况下才能进行检测。电子供体有甲基紫精、连二亚硫酸钠和硫代硫酸钠等 [4] 。
活化部分凝血活酶(APTT)时间测定
活化部分凝血活酶时间测定(activeated partial thromboplasting time,APTT),是检测“内源性途径”凝血因子缺陷的过筛试验,也是当前用于凝血因子治疗、肝素抗凝治疗监控以及检测狼疮抗凝物(一种抗磷脂自身抗体)的主要手段,其临床应用频率仅次于PT或与之相当。
活化部分凝血活酶(APTT)时间测定
活化部分凝血活酶时间测定(activeated partial thromboplasting time,APTT),是检测“内源性途径”凝血因子缺陷的过筛试验,也是当前用于凝血因子治疗、肝素抗凝治疗监控以及检测狼疮抗凝物(一种抗磷脂自身抗体)的主要手段,其临床应用频率仅次于PT或与之相当。
活化部分凝血活酶(APTT)时间测定
活化部分凝血活酶时间测定(activeated partial thromboplasting time,APTT),是检测“内源性途径”凝血因子缺陷的过筛试验,也是当前用于凝血因子治疗、肝素抗凝治疗监控以及检测狼疮抗凝物(一种抗磷脂自身抗体)的主要手段,其临床应用频率仅次于PT或与之相当。
关于溶葡萄球菌酶的酶活测定方法介绍
比浊法是最常用的一种方法,也是Sigma和AMBI公司采用的方法。检测时可将金黄色葡萄球菌的新鲜培养物悬于缓冲液中,溶葡萄球菌酶作用过程中定量的降低菌液的浊度,浊度下降值与酶量成正比,通过测定吸光度下降值可计算出样品中的酶活性。比浊法的缺点是: ① 检测中使用的底物为金黄色葡萄球菌菌体细胞,使用
木瓜蛋白酶的组成结构
番木瓜未成熟果实中含有木瓜蛋白酶(Papain)、木瓜凝乳蛋白酶A(Chymopapain A )、木瓜凝乳蛋白酶B(Chym opapain B )、木瓜肽酶B (PapayaPeptidase B ) 等多种蛋白水解酶。且已知四种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具有高度的同源性。其中,木瓜蛋白酶属巯基蛋
木瓜蛋白酶的应用范围
木瓜蛋白酶在医药、食品、饮料、化学试剂、饲料、纺织化妆品等方面都有广泛的应用,开发前景广阔。食品工业在食品行业中,木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。 木瓜蛋白酶在啤酒中的应用啤酒澄清剂引起啤酒冷藏混浊时主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。利用啤酒澄清剂中的木瓜
木瓜蛋白酶的结构功能
木瓜蛋白酶别名木瓜酶(Papain)纯木瓜蛋白酶是由212个氨基残基组成的单条肽链,相对分子量23406。木瓜蛋白酶制品可含有木瓜蛋白水解酶、木瓜凝乳酶和溶菌酶。是一种巯基蛋白酶,其专一性差!能分解比胰脏蛋白酶更多的蛋白质。木瓜凝乳酶相对分子量36000,约占可溶性蛋白酶的45%,溶菌酶相对分子量2
木瓜蛋白酶的应用价值
在食品工业应用中,木瓜蛋白酶可使食品大分子的蛋白质水解成小分子肽或氨基酸,用于水解动植物蛋白、制成嫩肉粉、水解大豆、饼干松化剂、面条稳定剂、啤酒饮料澄清剂、高级口服液、保健食品、酱油酿造及酒类发酵剂等,有效转化蛋白质的利用,大大提高食品营养价值,降低成本。
木瓜蛋白酶的生产方法
由木瓜的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。木瓜蛋白酶韵生产方法有三种,分别是直接热风烘干法、喷雾干燥法及膜分离冻干法。直接烘干生产方法较简单、快速,但生产出来的成品只是粗酶,杂质多、色泽差且微生物超标,酶活力也较低,只有60万~80万单位/g。多为个体
木瓜蛋白酶的功能特性
《GB 2760-2011 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》规定,木瓜蛋白酶可用作食品工业在的加工助剂(酶制剂)。一般应在制成最后成品之前除去(规定有残留量者除外)。木瓜蛋白酶主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的浑浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类软化)、谷类预煮
木瓜蛋白酶的制备方法
制法 由木瓜(Carica papaya)的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。
木瓜蛋白酶的催化机制
木瓜蛋白酶的剪切肽键的机制包括:在His-159作用下Cys-25去质子化,而Asn-158能够帮助His-159的咪唑环的摆放,使得去质子化可以发生;然后Cys-25亲核攻击肽主链上的羰基碳,并与之共价连接形成酰基-酶中间体;接着酶与一个水分子作用,发生去酰基化,并释放肽链的羰基末端。
木瓜蛋白酶的组成结构
番木瓜未成熟果实中含有木瓜蛋白酶(Papain)、木瓜凝乳蛋白酶A(Chymopapain A )、木瓜凝乳蛋白酶B(Chym opapain B )、木瓜肽酶B (PapayaPeptidase B ) 等多种蛋白水解酶。且已知四种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具有高度的同源性。其中,木瓜蛋白酶属巯基蛋
木瓜蛋白酶的基本结构
番木瓜未成熟果实中含有木瓜蛋白酶(Papain)、木瓜凝乳蛋白酶A(Chymopapain A )、木瓜凝乳蛋白酶B(Chym opapain B )、木瓜肽酶B (PapayaPeptidase B ) 等多种蛋白水解酶。且已知四种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具有高度的同源性。其中,木瓜蛋白酶属巯基蛋
木瓜蛋白酶的应用介绍
木瓜蛋白酶在医药、食品、饮料、化学试剂、饲料、纺织化妆品等方面都有广泛的应用,开发前景广阔。食品工业在食品行业中,木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。 木瓜蛋白酶在啤酒中的应用引起啤酒冷藏混浊时主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。利用啤酒澄清剂中的木瓜蛋白酶对形