transwell实验染色后可以放多久
最好是24小时。实验前将保存在-20℃的基质胶转移至4℃冰箱融化过夜，使用前用无血清培养基按培养基：基质胶=2:1的比例稀释；接种前将24孔板和Transwell小室用1×PBS浸泡5min湿润小室。用胰蛋白酶消化细胞后，用无血清培养液洗涤细胞，用含有1%FBS的培养基重悬细胞计数。培养24h后（侵袭实验培养48h后），每孔加入1mL4%溶液，室温固定10min；染色：吸去固定液，用1×PBS洗涤一次，每孔加入1mL0.5%结晶紫溶液，染色30min后用1×PBS洗三次，晾干；观察：用棉签小心擦去Transwell小室内没有迁移的细胞，置于200×显微镜下观察，计数每个视野中的细胞数。将小室放入培养板时，要注意不要有气泡产生，因为一旦有气泡，下层培养液的趋化作用就减弱了。用棉签小心擦去Transwell小室内没有迁移的细胞时，不能碰到已经穿膜的细胞。难穿膜的细胞可以用无血清培养基饥饿处理12-24h。......阅读全文
细胞侵袭实验总结！
实验原理将细胞小室（Transwell小室）放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的
一种新型可视细胞趋化实验方法及系统搭建的介绍
一.细胞趋化实验原理定义：趋化性（Chemotaxis，亦被称为化学趋向性）是趋向性的一种，指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物(如葡萄糖)十分重要，细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方，或远离有毒(如苯酚)的地方。在多细胞生物中，趋化性对其发
关于细胞趋化实验及系统搭建，我们整理了这份攻略
一. 细胞趋化实验原理定义：趋化性（Chemotaxis，亦被称为化学趋向性）是趋向性的一种，指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物 (如葡萄糖) 十分重要，细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方，或远离有毒 (如苯酚) 的地方。在多细胞生
细胞共培养技术具体指什么？
细胞共培养是指将2种或2种以上细胞（可以来自同一组织, 也可以来自不同的组织）放在同一培养系统中培养。细胞共培养技术可以很大程度地模拟体内环境，以便更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用，通过检测不同细胞因子之间的关系，探讨药物的作用机制和可能的作用靶点。细胞共培养方法主要包括直接接触共
细胞划痕实验原理步骤及注意事项有哪些
细胞划痕实验原理细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合，在一定程度上模拟了体内细胞迁移
肿瘤细胞侵袭实验（Tumour－Invasion－Assay）
实验方法原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上，能在DMEM培养基中重建形成膜结构，这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。 滤膜孔径一般为8um，而且膜孔都被Matrigel覆盖，细胞不能自由穿过，
肿瘤细胞侵袭实验
Matrigel 基质膜模型 实验方法原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯
肿瘤细胞侵袭实验——Matrigel－基质膜模型
肿瘤细胞侵袭实验（Tumour Invasion Assay）可应用于：（1）研究各种细胞因子对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响；（2）一些抑制血管生成的新药研究；（3）研究肿瘤细胞侵袭和转移机制。实验方法原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸
肿瘤细胞侵袭实验
Matrigel 基质膜模型 实验方法原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯
简述脂肪干细胞和脂肪细胞的共培养
将准备好的脂肪干细胞和脂肪细胞分别置于Transwell 的上室和下层中，脂肪干细胞与脂肪细胞的个数之比分别为1:5，1:1，2:1 和5:1(4 组分别命名为A、B、C 和D 组)进行共培养，其中每孔中脂肪细胞的数量均为1×105 个。以上每组均做平行实验(n=3)。
细胞共培养实验介绍（一）
1.基本原理体外细胞共培养（co-culture)是将两种细胞（可以来自同一种组织，也可以来自不同的组织）混合共同培养，从而使其中一种细胞的形态和功能稳定表达，并维持较长时间。该技术能模拟体内生成的微环境，便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能作用的靶点，
论文工厂批量造假！这一期刊撤稿中国学者文章162篇
一组121篇论文，几乎全部发表在European Review for Medical and Pharmacological Sciences（113/121） 期刊上。这些论文的作者来自不同的机构，描述的癌症类型和组织样本也不同。但是，尽管这些论文中的每篇乍看起来都是独一无二的，但该组中的所
肿瘤细胞侵袭试验原理和实验步骤1
一、原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上，能在DMEM培养基中重建形成膜结构，这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um，而且膜孔都被Matrigel覆盖，细胞不能自由穿过，必须分泌
关于脂肪干细胞实验的仪器与材料的介绍
倒置荧光显微镜(IX71, Olympus)；数字彩色摄像系统(Sony3CCD)；图像分析软件(Image-pro-plus)；离心机(Z23, Herm 德国)；Transwell (3450-clear, corning, Costar 美国)；纯水机(Millipore-Q-Synthe
Migration－Assay－Protocol
Materials to be prepared beforehand:1) FBS free medium2) 10% FBS medium3) Cell migration filter insert ( Transwell®, 12mm Diameter, 12 μm Pore Size.)P
细胞实验主要包括哪些内容
细胞实验是研究生物细胞的结构、功能和相互作用的重要手段。它可以帮助科学家们了解细胞的生理和病理过程，揭示细胞的分子机制，以及发现新的药物和治疗方法。细胞实验主要包括以下几个内容。首先，细胞培养是细胞实验的基础。细胞培养是将细胞从体内或体外分离出来，通过提供适宜的培养基和环境条件，使其在体外继续生长和
巨噬细胞外泌体源miR223对胃癌细胞转移能力的影响研究
河南省人民医院郑培明, 高慧洁, 李俊蒙, 等.选择巨噬细胞及其外泌体分别与胃癌细胞共培养（未加为对照组），检测miR-223表达量并观察其对胃癌细胞转移能力的影响。荧光显微镜观察巨噬细胞是否通过外泌体传递miR-223至胃癌细胞。巨噬细胞转染miR-223拮抗剂，分离外泌体与胃癌细胞共培养，t
简析悬浮微流控芯片
虽然微流体领域已引进新的工具来解决生物学问题，在生命科学中的微流控技术的可及性和通过取得显著的进展仍然有限。打开微流体系统不得不降低要求去适应他们，但由于没有强大的设计规则，阻碍了它们的使用。在这里，我们提出了一个开放的微流体平台，悬浮微流体，使用表面张力，以液体流动和作为驱动。它包含普遍的的毛细现
当外泌体遇上环状RNA（四）
（3）GC来源的外泌体circSHKBP1在体外能促进GC细胞的增殖、迁移和侵袭为了探索circSHKBP1是否影响GC细胞的生物学过程，分析了circSHKBP1在4种人GC细胞系（BGC823、HGC27、AGS和MGC803）和正常胃上皮细胞系GES1中的表达水平。结果表明，circSHKBP
合肥物质院发现低温等离子体抑制癌细胞侵袭分子机制
中科院合肥物质科学研究院医学物理中心辐射生物医学研究室韩伟课题组近期在低温等离子体抑制癌细胞迁移分子机制方面取得新进展。相关成果已被《科学报告》杂志接收。 近年来，低温等离子体作为一种新兴技术，在医学方面的潜力被不断发掘，比如能促进血液凝集和伤口愈合等。此外，低温等离子体还能显著抑制肿瘤细胞
circRNA在胃癌海绵调控机制的应用（二）
3. hsa_circ_0004872作为分子海绵吸附miR-224作者首先通过FISH实验观测到hsa_circ_0004872主要分布在细胞质。然后通过RIP-qPCR验证到hsa_circ_0004872与AGO2蛋白结合，pull down实验显示hsa_circ_0004872与miR-2
合肥研究院发现低温等离子体抑制癌细胞侵袭的分子机制
近期，中国科学院合肥物质科学研究院医学物理与技术中心辐射生物医学研究室研究员韩伟课题组在低温等离子体抑制癌细胞迁移分子机制方面取得新进展。相关研究成果“Non-thermal plasma inhibits humancervical cancer HeLa cells invasiveness
细胞检测技术的特点和应用
细胞检测技术是一系列用于分析和评估细胞的特征、生理状态、功能以及与疾病相关变化的方法和手段。以下是一些常见的细胞检测技术：显微镜技术光学显微镜：可观察细胞的形态、大小、结构。荧光显微镜：利用荧光标记的抗体或染料，特异性地显示细胞内的特定成分或结构。共聚焦显微镜：能够获取细胞更清晰的断层图像，用于研究
脂肪干细胞的Hoechst/PI－死活染色介绍
弃掉旧培养基，用D-Hanks 冲洗除去残留培养基然后向每个Transwell 孔中加入质量浓度为1 mg/mL 的Hoechst 33342 大约10 μL，使其终质量浓度为10 μg/mL，37℃下避光反应10 min。待Hoechst 染色完成后，用D-Hanks 冲洗除净残余的Hoech
Nature:磁共振影像示踪“特洛伊木马”细胞攻击残余脑肿瘤
在科学技术蓬勃发展的今天，大多数肿瘤经临床规范化治疗后，患者的生存期及生存质量均有较为显著的提升，然而，对于脑胶质瘤而言，对它的疗效在近30年来却没有得到很大的改观，肿瘤患者总体预后依然较差，5年生存率不足10%，中位生存期仅为12-15个月，被认为是目前最难治愈的肿瘤之一。那么，是什么原因阻挡
一项对压力性尿失禁患者阴道壁成纤维细胞外泌体的研究
压力性尿失禁（SUI）是指腹压增加时尿液的无意识泄漏，是一种女性常见的泌尿学问题，中国20岁以上成年女性的患病率达18.9%。SUI业已成为一项突出的医疗问题和备受关注的社会问题，大大增加了全球卫生系统的经济负担。外泌体是一种直径约30~100 nm，由双层脂膜包裹的分泌性囊泡。目前已知几乎所有
研究揭示缺氧外泌体对肝癌的影响
原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）是一种常见的高度恶性肿瘤，其全球发病率逐年增长，在肿瘤相关死亡原因中位居第2位。而肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）在原发性肝癌中占比接近90%，全世界每年有超过70万人死于肝细胞癌，仅我国就占了死亡
器官培养实验
实验方法原理取出器官或组织，将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后，将组织放在位于气液界面的支持物上，如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养，根据需要更换培养液。试剂、试剂盒M199
器官培养实验
实验方法原理 取出器官或组织，将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后，将组织放在位于气液界面的支持物上，如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养，根据需要更换培养液。试剂、试剂盒 M199仪器、耗材 解剖器械滤膜培养皿12 孔培养板受精鸡蛋实验步骤 一、材料无菌 1. 解剖器械 2.
细胞迁移能力相关实验检测方法介绍
细胞的迁移运动不仅是细胞进行很多重要生理活动的基础，同时也是炎症反应和肿瘤发生等病理过程中的重要步骤和关键环 节。细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而 产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立