小型微波谐振腔用于蛋白质微波辅助酶解
摘要 采用微波谐振腔对细胞色素c以及牛血清白蛋白进行微波辅助酶解, 通过电喷雾三级四极杆质谱对得到的肽段进行分析, 证明该方法可用很低的微波功率将蛋白质彻底酶解为多肽. 通过调整微波条件可以使蛋白质的酶解效率基本达到100% , 细胞色素c和牛血清白蛋白的序列覆盖率分别为45%和26%. 该方法不但可将蛋白酶解时间由传统方法的16 h缩短为20 min, 还将功率由使用微波炉时的数百瓦降至20W.点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
微波辅助提取应用最广泛的微波频率
微波辅助提取应用最广泛的微波频率为2450MHz。一、微波辅助提取法微波萃取又称微波辅助提取( Microwave -assisted Extraction,MA E),是指使用适当的溶剂在微波反应器中从植物 、矿物 、动物组织等中提取各种化学成分的技术和方法 。二、微波萃取的机理微波是一种频率在3
微波辅助萃取法的概念
微波辅助萃取(microwave-assisted extraction)又叫微波萃取,是一种非常具有发展潜力的新的萃取技术,即用微波能加热与样品相接触的溶剂,将所需化合物从样品基体中分离出来并进入溶剂,是在传统萃取工艺的基础上强化传热、传质的一个过程。通过微波强化,其萃取速率、萃取效率及萃取质量均
内切酶的特性、酶解与琼脂糖凝胶电泳
学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法,理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具,琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具,所以常常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等
质粒DNA的限制性内切酶消化酶解
原理 限制性核酸内切酶能特异地识别双链DNA中的碱基序列,通过“切割”双链DNA中每一条链上的磷酸二酯键使DNA断裂。利用它可方便地按需要对DNA进行“剪切”加工。限制性核酸内切酶单位的定义为:在限定的温度和反应环境中,1小时消化1μg DNA所需的酶量为一个酶单
微波辅助提取聚合物分析
必须在综合分析的范围内尽可能精确地规定塑料添加剂,以确保聚合物的各种材料特性。最关键的分析步骤是样品制备,即提取分析物。 聚合物与各种各样的添加剂(所谓的添加剂)混合,以产生和保持所需的材料特性,尽管所有可能的环境影响。这些添加剂的定性和定量测定可用于不到十分之一到百分之几的范围内,对于塑料行业
微波辅助消解法有哪些优点
1. 加热快、升温高,消解能力强,大大缩短了溶样时间。消解各类样品可在几分钟—二十几分钟内完成,比电热板消解速度快10-100倍。如凯氏定氮法消解试样需 3-6小时,用微波消解只需9-18分钟,快20倍左右。还能消解许多传统方法难以消解的样品,如锆英石。快速消解的原因来自于微波对样品溶液的直接加热和
微波热解制备生物汽油优缺点
优点是加热速度快,缺点是设备成本高。1、微波热解利用微波辐射加热原理,能够迅速将生物质加热到高温,从而加速反应过程,相比传统加热方法,微波热解具有更高的加热效率和更短的反应时间。2、微波热解所需的设备通常比传统加热设备更昂贵,微波发生器和反应器等设备需要特殊设计和制造,增加了投资成本。
DNA酶切
一、 DNA酶切反应 1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶
DNA酶切
一、 DNA酶切反应 1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在
DNA的酶切与连接——质粒DNA酶切
DNA的连接和酶切可用于:(1)利用限制性核酸内切酶切割DNA和利用DNA连接酶连接DNA是DNA重组过程中的关键步骤之一;(2)成功的酶切和有效的连接为后续的外源基因进入宿主细胞进行表达提供了有效的实验材料。实验方法原理限制性内切酶能够特异性地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附
我超声辅助酶解功能多肽实现产业化
我国农产品加工业中每年约有9000万吨蛋白类副产物产生,因变性程度高、溶解度低、营养品质差,不能被充分利用造成蛋白资源浪费严重。 国家863计划“低值蛋白资源生物转化及精制关键技术与开发”项目江苏大学课题组,突破了瓶颈问题,首创了多项关键技术,创制出了系列化多模式超声波装备。其中,“功能多肽
微波辅助萃取的参数及影响因素
微波辅助萃取操作过程中,萃取参数包括萃取溶剂、萃取功率和萃取时间。影响萃取效果的因素很多,如萃取剂的选择、微波剂量、物料含水量、萃取温度、萃取时间及溶剂 pH 值等。1)萃取剂的选择在微波辅助萃取中,应尽量选择对微波透明或部分透明的介质作为萃取剂,也就是选择介电常数较小的溶剂,同时要求萃取剂对目标成
双酶切反应酶活性分析
同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲
微波的微波萃取原理
利用微波能来提高萃取率的一种最新发展起来的新技术。它的原理是在微波场中,吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使得被萃取物质从基体或体系中分离,进入到介电常数较小、微波吸收能力相对差的萃取剂中;微波萃取具有设备简单、适用范围广、萃取效率高、重现性好、节省时间
微波的微波萃取原理
利用微波能来提高萃取率的一种最新发展起来的新技术。它的原理是在微波场中,吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使得被萃取物质从基体或体系中分离,进入到介电常数较小、微波吸收能力相对差的萃取剂中;微波萃取具有设备简单、适用范围广、萃取效率高、重现性好、节省时间
双酶切反应酶活性分析及双酶切建议缓冲液
同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳 NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性
超声波辅助萃取与微波辅助萃取的工作原理
在超声波的空化、粉碎的特殊作用下,细胞在溶媒中瞬间产生的空化泡崩溃而破裂,使溶媒渗透到细胞内部,从而使细胞中的成分溶于溶剂之中。在超声波振动的作用下,促进了成分向溶媒中溶解,提高了有效成分的提出率,从而达到提取有效成分的目的.微波萃取的基本原理是微波直接与被分离物作用,即微波能直接作用于样品基体内。
内切酶列表:
Single letter code:R = G or A; Y = C or T; W = A or T; M = A or C; K = G or T; S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, G or T;D = A, G or T;N =
DNA酶切反应
一、 DNA 酶切反应1、将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在管
酶切反应建议
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶
【共享】双酶切
1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近,必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列两端有多个碱基的,则必须先切,否则就可能造成酶切失败。2、 回收PCR产物:回收的PCR产物片段=1:10 ,一般取前者0.03pmol
酶切反应心得
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶的用
双酶切反应
双酶切buffer的选择: 1、U :Supplied with its own unique reaction buffer that is different from the four standard NEBuffers. Its compatibility with the fou
关于微波辅助合成萃取仪的应用介绍
微波辅助合成萃取仪设计合理,操作友好简单,具有良好的扩展性能满足不同实验方案,广泛应用于有机合成、药物化学、有机萃取、食品科学、分析化学、无机化学、蛋白质研究、石油化工、材料化学等相关领域,为科研工作者提供了优于常规加热的新型化学反应平台。 1.jpg 在各种液体反应环境中微
DNA的限制性内切酶酶切反应
[实验目的] 通过本实验学习DNA的限制性内切酶酶切反应的基本原理与实验技术。 [实验原理] 1.限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作
限制性内切酶酶切反应实验原理
限制性内切酶已有百余种,每种酶有其特定的核苷酸序列识别特异性,酶的活性需Mg2+来激活。不同的酶也有许多差别:有些酶除需Mg2+外,还需ATP等其他辅助因子的激活;切割位点和识别序列间的距离不同;某些内切酶同时具有甲基化作用。根据这些差别,可将限制性内切酶分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。Ⅱ型限制性内切酶只需要
酶切的基础知识(酶切原理和实验过程)
酶切的原理:DNA酶切一般分为质粒直接酶切和PCR产物酶切。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类。Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点
微波萃取的微波萃取历史
1986年,匈牙利学者Ganzler K首先提出利用微波进行萃取的方法抄。在微波萃取过程中,高频电磁波穿透萃取介质,到达被萃取物料的内部,微波能迅速转化为热能而使细胞内袭部的温度快速上升。当细胞内部的压力超过细胞的承受能力时,细胞就会破裂,有效成分即从胞内zd流出,并在较低的温度下溶解于萃取介质,再
DNA的限制性内切酶酶切反应技术
限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)是指识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。本实验是掌握DNA的限制性内切酶的酶切技术。DNA的限制性内切酶酶切反应技术[实验原理]1. 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位
DNA的限制性内切酶酶切反应实验
[实验目的]通过本实验学习DNA的限制性内切酶酶切反应的基本原理与实验技术。[实验原理]1.限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP 的