简述变性凝胶电泳的基本原理
双链DNA分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA片段能够被区分开,但同样长度的DNA片段在胶中的迁移行为一样,因此不能被区分。DGGE/TGGE技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上,加入了变性剂(尿素和甲酰胺)梯度,从而能够把同样长度但序列不同的DNA片段区分开来。一个特定的DNA片段有其特有的序列组成,其序列组成决定了其解链区域(melting domain,MD)和解链行为(melting behavior)。一条几百个碱基对的DNA片段一般有几个解链区域,每个解链区域有一段连续的碱基对组成。当变性剂浓度逐渐增加达到其最低的解链区域浓度时,该区域这一段连续的碱基对发生解链。当浓度再升高依次达到各其他解链区域浓度时,这些区域也依次发生解链。直到变性剂浓度达到最高的解链区域浓度后,最高的解链区域也发生解链,从而双链DNA完全解链。......阅读全文
简述变性凝胶电泳的基本原理
双链DNA分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA片段能够被区分开,但同样长度的DNA片段在胶中的迁移行为一样,因此不能被区分。DGGE/TGGE技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上,加入了变性剂(尿素和甲酰胺)梯度,从而能够把同样长度但序列不同的DNA片
变性凝胶电泳的基本原理
双链DNA分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA片段能够被区分开,但同样长度的DNA片段在胶中的迁移行为一样,因此不能被区分。DGGE/TGGE技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上,加入了变性剂(尿素和甲酰胺)梯度,从而能够把同样长度但序列不同的DNA片段区
变性凝胶电泳的基本原理
双链DNA分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,其迁移行为决定于其分子大小和电荷。不同长度的DNA片段能够被区分开,但同样长度的DNA片段在胶中的迁移行为一样,因此不能被区分。DGGE/TGGE技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上,加入了变性剂(尿素和甲酰胺)梯度,从而能够把同样长度但序列不同的DNA片段区
简述疫苗的基本原理
疫苗是将病原微生物(如细菌、立克次氏体、病毒等)及其代谢产物,经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。疫苗保留了病原菌刺激动物体免疫系统的特性。当动物体接触到这种不具伤害力的病原菌后,免疫系统便会产生一定的保护物质,如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等;当动物再次
简述糖原的基本原理
糖原由D-葡萄糖的分支或直链组成,在肝和肌肉最丰富。过碘酸是一种强氧化剂,能将葡萄糖中乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成二个游离醛基(—CHO),游离醛基与Schiff's试剂反应生成紫红色产物,颜色深浅与多糖含量成正比。由于单糖在固定、脱水和包埋等组织化学操作过程中被抽提掉,故一般组
简述质谱法的基本原理
质谱法的基本原理是通过分析离子化样品的质荷比来实现对被测化合物定性定量分析。当被检测样品进入质谱仪,在质谱仪离子源中,化合物被离子轰击,电离成分子离子和碎片离子,这些离子在质量分析器中,由于质荷比不同,运动轨迹不同,通过电子倍增管检测放大的信号传入显示器,展现出一幅完整的质谱图。一般质谱图的横坐
简述XRF的基本原理
X射线光管发射的原级X射线射入至样品,激发样品中各元素的特征谱线; 探测器记录特征波长的X射线光子N; 根据特定波长X射线光子N的强度,计算出该波长对应的元素浓度。
简述醛固酮的基本原理
醛固酮进入远曲小管和集合管上皮细胞后,与胞浆内受体结合,形成激素-受体复合体,后者通过核膜,与核中DNA特异性结合位点相互作用,调节特异性mRNA转录,最终合成多种醛固酮诱导蛋白,进而使管腔膜对Na+的通透性增大,线粒体内ATP合成和管周膜上钠泵的活动性增加。从而导致对Na+的重吸收增强,对水的
简述原电池的基本原理
原电池反应属于放热的反应,一般是氧化还原反应,但区别于一般的氧化还原反应的是,电子转移不是通过氧化剂和还原剂之间的有效碰撞完成的,而是还原剂在负极上失电子发生氧化反应,电子通过外电路输送到正极上,氧化剂在正极上得电子发生还原反应,从而完成还原剂和氧化剂之间电子的转移。两极之间溶液中离子的定向移动
简述核酸分离的基本原理
通过机械磨碎细胞或加入表面活性剂裂解细胞使内容物提取出来,再加入蛋白变性剂变性沉淀蛋白质。最后靠核酸在醇溶液中溶解度下降的特点提取纯的核酸。
简述凝胶层析的基本原理
凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液
简述核酸杂交的基本原理
其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品的不同又被分为DNA印迹杂交(Southern blot hybridization )和RNA印迹杂交(Nort
简述亲和色谱的基本原理
将一对能可逆结合和解离生物分子的一方作为配基(也称为配体),与具有大孔径、亲水性的固相载体相偶联、制成专一的亲和吸附剂,再用此亲和吸附剂填充色谱柱,当含有被分离物质的混合物随着流动相流经色谱柱时,亲和吸附剂上的配基就有选择地吸附能与其结合的物质,而其他的蛋白质及杂质不被吸附,从色谱柱中流出,使用
简述腹膜透析的基本原理
腹膜透析的基本原理是利用腹膜作为透析膜,把灌入腹腔的透析液与血液分开,腹膜有半透膜性质,并且具有面积大、毛细血管丰富等特点,浸泡在透析液中的腹膜毛细血管腔内的血液与透析液进行广泛的物质交换,以达到清除体内代谢产物和毒物,纠正水电解质、酸碱平衡失调的目的。在腹膜透析中,溶质进行物质交换的方式主要是
简述自准直仪的基本原理
自准直仪由光源 [2]发出的光经分划板、半透反射镜和物镜后射到反射镜上。光线通过位于物镜焦平面的分划板后,经物镜形成平行光。平行光被垂直于光轴的反射镜反射回来,再通过物镜后在焦平面上形成分划板标线像与标线重合。当反射镜倾斜一个微小角度α角时,反射回来的光束就倾斜2α角。
简述mRNA疫苗的基本原理
mRNA疫苗的基本原理是通过特定的递送系统将表达抗原靶标的mRNA导入体内,在体内表达出蛋白并刺激机体产生特异性免疫学反应,从而使机体获得免疫保护。
变性凝胶电泳实验
基本方案 缓冲液梯度测序胶 电解质梯度测序胶 含甲酰胺的测序胶 实验材料 DNA
变性凝胶电泳实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 乙醇异丙醇二甲基二氯硅烷TEMED变性丙烯酰胺溶液SDS仪器、耗材 电泳仪注射器巴斯德吸管干胶机实验步骤 1. 制作每块凝胶时,首先要用肥皂及水小心严格地清洗两块30 cm×40 cm的前后玻璃平板,用去离子水冲洗后晾干,用喷射洗瓶喷10%乙酵或异丙醇使平板湿海。2
变性凝胶电泳的基本介绍
变性凝胶电泳是在凝胶中加入了尿素或甲酰胺等碱 性试剂制作的凝胶称作变性凝胶,DNA样 品在变性凝胶中的电泳分离过程称作变性凝 胶电泳。在正常情况下,DNA分子是以双 链形式存在,在普通凝胶中,DNA分子由 于核苷酸序列排列的内部特征,也能具有 不同的空间构型,使得M 分子产生不同 的迁移率,出现
变性凝胶电泳的作用方式
不同的双链DNA片段因为其序列组成不一样,所以其解链区域及各解链区域的解链浓度也是不一样的。当它们进行DGGE时,一开始变性剂浓度比较小,不能使双链DNA片段最低的解链区域解链,此时DNA片段的迁移行为和在一般的聚丙烯酰胺凝胶中一样。然而一旦DNA片段迁移到一特定位置,其变性剂浓度刚好能使双链DNA
非变性凝胶电泳的概念
中文名称非变性凝胶电泳英文名称nondenaturing gel electrophoresis;native gel electrophoresis定 义不含变性剂,以聚丙烯酰胺、琼脂糖等凝胶为分离介质的电泳。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
简述光谱仪的基本原理
根据现代光谱仪器的工作原理,光谱仪可以分为两大类:经典光谱仪和新型光谱仪。经典光谱仪器是建立在空间色散原理上的仪器;新型光谱仪器是建立在调制原理上的仪器。经典光谱仪器都是狭缝光谱仪器。调制光谱仪是非空间分光的,它采用圆孔进光。 根据色散组件的分光原理,光谱仪器可分为:棱镜光谱仪,衍射光栅光谱仪
简述固相萃取的基本原理
固相萃取是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相萃取分离原理,即生物样品通过含有吸附剂的固定相,保留其中某一组分,再选用适当的溶剂洗去杂质,然后用少量洗脱液迅速洗脱,从而达到分离、净化与浓缩的目的。这要求待测物质与固定相之间的作用力要大于待测物质与基质之间的作用力。待测分子与固定相之间的作用力包括:偶
简述密度计的基本原理
地球的重力将物体拉向地面,但是如果将物体放在液体中,浮力将会对它产生反方向的作用力。 浮力的大小等同于物体排开液体的重力。 密度计是根据重力和物体漂浮时受力平衡及阿基米德原理制成的。一个功能完好的密度计仅能处于漂浮状态,因此浮力向上推的力要比重力向下拉的力稍微大一点。但在平衡的时候,其受的重力
简述基因扩增技术的基本原理
PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与D
简述超声提取法的基本原理
超声提取法是利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等加速胞内有效物质的释放、扩散和溶解,显著提高提取效率的提取方法。超声提取的主要理论依据是超声的空化效应、热效应和机械作用。 当大能量的超声波作用于介质时,介质被撕裂成许多小空穴,这些小空穴瞬时闭合,并产生高达几千个大气压的瞬间压力,即空化现象
简述滤光片的基本原理
滤光片是塑料或玻璃片再加入特种染料做成的,红色滤光片只能让红光通过,如此类推。玻璃片的透射率原本与空气差不多,所有有色光都可以通过,所以是透明的,但是染了染料后,分子结构变化,折射率也发生变化,对某些色光的通过就有变化了。比如一束白光通过蓝色滤光片,射出的是一束蓝光,而绿光、红光极少,大多数被滤
简述抗原-抗体反应的基本原理
抗体能特异性地识别相应的抗原,并与之结合.这种结合在体外也能发生,这种特性就是许多免疫检测方法的基础.抗原与抗体相互作用是非共价的,可逆的,其特性符合许多化学反应的基本原理.但因为抗体分子的结构特点,以及抗原分子结构的多样性,使抗原抗体结合反应表现出复杂性.
简述电子捕获层析的基本原理
电子捕获检测器(电子捕获层析法)是分析痕量电负性较强的有机化合物最有效的检测器,也是放射性离子化检测器中应用最广的一种检测器。电子捕获层析的作用机理是:利用电负性化合物对放射性电子射线的不同电子俘获能力。外加一定场强时,放射源的初级电子在电场作用下向正极(收集极)移动,经与载气分子碰撞,产生更多
简述X射线管的基本原理
X 射线管包含有阳极和阴极两个电极,分别用于用于接受电子轰击的靶材和发射电子的灯丝。两极均被密封在高真空的玻璃或陶瓷外壳内。X 射线管供电部分至少包含有一个使灯丝加热的低压电源和一个给两极施加高电压的高压发生器。当钨丝通过足够的电流使其产生电子云,且有足够的电压(千伏等级)加在阳极和阴极间,使得