溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话，是可以用的，但是很明显，就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话，是引物二聚体，而如果主峰后面出峰的话，一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和镁离子浓度来解决，但如果次峰强于主峰，就是说杂带的特异性高于目的条带，一般的只能换引物了。扩展资料一、定义熔解曲线(Melting curve)是指随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。熔解曲线分析可以用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物。 二、原理扩增反应完成后，通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生熔解曲线，熔解温度上有一特征峰（Tm，DNA双链解链50%的温度），用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开，因为它们在不同的温度熔解线。随着反应中双链DNA变性，荧光染料又恢复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变与温度作图。在扩增产物的只有染料法才需要做熔解曲线，探针法没有必......阅读全文
溶解曲线出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下
qPCR溶解曲线TM值
tm>80℃_芙馇叻治隹梢杂美慈范ú煌姆从Σ铮ǚ翘匾煨圆铩?_芙馇?(Dissociation curve)：随温度升高，DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。全部DNA双螺旋结构降解一半的温度称为溶解温度（Tm）。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。不排除极度
qPCR溶解曲线TM值
tm>80℃随温度升高，DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。全部DNA双螺旋结构降解一半的温度称为溶解温度（Tm）。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比关系。不排除极度偶然的情况：1.两个序列的溶解曲线一样 2.没有目标产物，只有一种非特异产物。
荧光定量标准溶解曲线
全球大爆发的新型冠状病毒肺炎或新型冠状病毒感染疾病的诊断有多种方法，其中针对其病毒核酸的实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测是病原学诊断的金标准。PCR 方法是所有核酸（RNA、DNA）定量检测的重要方法，对于新冠病毒等RNA核酸首先需要逆转录为cDNA，而后PCR方法则基本一致，下面
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光
溶解曲线为什么出现双峰
溶解曲线的意思是：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化，比如你用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光
溶解曲线的峰代表什么
溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化。比如用的是TAQMAN探针，taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的，那么在只有温度变化的情况下，是没有荧光
pcr溶解曲线的峰值太低
横坐标是温度,每个温度点一个.一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值（不是强度本身）.一开始加热的时候,虽然荧光强度比较强,但是由于双链没有解离,所以荧光强度保持不变.当加热接近于PCR产物Tm时,双链开始解离,荧光强度变小,机器会比较前后2个温度点的荧光强度,然后把2者的差值标在图上.Tm到达
PCR溶解曲线要跑多久
一次pcr的时间不是固定的,要根据循环数决定。一般一次pcr需要70-90分钟,如果加上前面加样时间,一般两个小时左右。一般染料法定量pcr在进行完pcr后都要运行熔解曲线,一般设定先94度几分钟,然后骤冷到65度（假定65度为退伙温度）.在65度时,pcr产物是以双链的形式存在的。因为染料是插到双
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。
什么是realtimePCR溶解曲线
如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继
qPCR的溶解曲线有多个峰值
溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物。
什么是realtimePCR溶解曲线
如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继
溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话，是可以用的，但是很明显，就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话，是引物二聚体，而如果主峰后面出峰的话，一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和镁离子浓度来解决，但如果次峰强于主峰，就是说杂带的特异性高于目的条带，一般的只能换引物了。
什么是realtimePCR溶解曲线
如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高点。上面的是反映在扩增曲线上面的。2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继
荧光定量pcr溶解曲线没有峰
荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为：一般每加温一度，读一次信号，当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多，曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化，开始加热，信号变化不大，所以几乎是平的。当加热接近于PCR产物Tm时，双链开始解离，荧光强度变小，机器会比较前后2个温度点的荧光强度，把2者的差
溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话，是可以用的，但是很明显，就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话，是引物二聚体，而如果主峰后面出峰的话，一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和镁离子浓度来解决，但如果次峰强于主峰，就是说杂带的特异性高于目的条带，一般的只能换引物了。扩
qpcr不做溶解曲线可以吗
没有溶解曲线说明对应的pcr管中没有产物。qpcr的溶解曲线就是对应孔内pcr产物对应的tm值。如果一个孔没有溶解曲线说明这个孔中没有产物，没有产物的原因有很多种，例如：pcr反应体系中可能没有加模板或者加酶或者引物等，少一个成分都会导致相应的孔没有溶解曲线，也有可能是。