琥珀酸脱氢酶活力测定方法NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法
NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法NBT易溶于水,呈淡黄色,以NBT为受氢体,接受由琥珀酸钠盐被酶作用而脱下的氢,进而形成紫蓝色的沉淀,于反应体系中加入PMS,混匀,37℃保温30min,之后加入TCA终止反应。加异丙醇溶解显色,混匀,即可于548nm测OD值。规定:30min内548nm下OD值为1.0时的酶量为1个活力单位。比活力=活力单位数/毫克蛋白。......阅读全文
琥珀酸脱氢酶活力测定方法NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法
NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法NBT易溶于水,呈淡黄色,以NBT为受氢体,接受由琥珀酸钠盐被酶作用而脱下的氢,进而形成紫蓝色的沉淀,于反应体系中加入PMS,混匀,37℃保温30min,之后加入TCA终止反应。加异丙醇溶解显色,混匀,即可于548nm测OD值。规定:30min内548nm下OD值为1.0
琥珀酸脱氢酶测定方法NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法
NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法NBT易溶于水,呈淡黄色,以NBT为受氢体,接受由琥珀酸钠盐被酶作用而脱下的氢,进而形成紫蓝色的沉淀,于反应体系中加入PMS,混匀,37℃保温30min,之后加入TCA终止反应。加异丙醇溶解显色,混匀,即可于548nm测OD值。规定:30min内548nm下OD值为1.0
NBT(氯化硝基四氮唑蓝)法测定琥珀酸脱氢酶的介绍
NBT易溶于水,呈淡黄色,以NBT为受氢体,接受由琥珀酸钠盐被酶作用而脱下的氢,进而形成紫蓝色的沉淀,于反应体系中加入PMS,混匀,37℃保温30min,之后加入TCA终止反应。加异丙醇溶解显色,混匀,即可于548nm测OD值。规定:30min内548nm下OD值为1.0时的酶量为1个活力单位。
琥珀酸脱氢酶活力测定方法TTC(氯化三苯四氮唑)法
TTC(氯化三苯四氮唑)法无色TTC(2,3,5-氯化三苯基四唑)作为人造受氢体,它在细胞呼吸过程中接受氢,还原成三苯基甲膳(TF)。后者以红色晶体的形式存在于细胞内,采用有机溶剂(如甲苯、乙酸乙醋、三氯甲烷、丙酮或乙醇等)进行萃取。萃取液测定485nm吸光度后,以TTC还原量表示脱氢酶活性,根据标
琥珀酸脱氢酶的测定
琥珀酸脱氢酶活力测定方法主要有五种。 硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法 琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succina
琥珀酸脱氢酶的测定
硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法 琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succinate+PMS→Fumarate+PMSH
琥珀酸脱氢酶活力测定方法简介
1、硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法 琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succinate+PMS→Fumarate+PM
琥珀酸脱氢酶测定方法TTC(氯化三苯四氮唑)法
TTC(氯化三苯四氮唑)法无色TTC(2,3,5-氯化三苯基四唑)作为人造受氢体,它在细胞呼吸过程中接受氢,还原成三苯基甲膳(TF)。后者以红色晶体的形式存在于细胞内,采用有机溶剂(如甲苯、乙酸乙醋、三氯甲烷、丙酮或乙醇等)进行萃取。萃取液测定485nm吸光度后,以TTC还原量表示脱氢酶活性,根据标
硝基蓝四氮唑还原试验的方法
硝基蓝四氮唑还原试验将终浓度2和5μmol/L青蒿素处理的U937细胞培养1~5d.收集细胞,以不含血清的RPMI1460洗涤离心,弃上清,每管加入0.5mL的1g/LNBT溶液和0.1mLTPA溶液,摇匀,37℃反应30~60min.吸取少量细胞悬液,涂片,空气干燥,常规WrightGiems
氯化三苯基四氮唑法测定根系活力
一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80mV的氧化还原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲 (TTF),如下式: 生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸
琥珀酸脱氢酶活力测定方法MTT法
MTT法MTT是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazana),经异丙醇作用颗粒溶解显色。在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比,因此可根据光密度570nm处OD值推测出活细胞的数目。
TTC(氯化三苯四氮唑)法测定琥珀酸脱氢酶的介绍
无色TTC(2,3,5-氯化三苯基四唑)作为人造受氢体,它在细胞呼吸过程中接受氢,还原成三苯基甲膳(TF)。后者以红色晶体的形式存在于细胞内,采用有机溶剂(如甲苯、乙酸乙醋、三氯甲烷、丙酮或乙醇等)进行萃取。萃取液测定485nm吸光度后,以TTC还原量表示脱氢酶活性,根据标准曲线计算TF生成量,
关于硝基蓝四氮唑还原试验的方法介绍
硝基蓝四氮唑还原试验将终浓度2和5μmol/L青蒿素处理的U937细胞培养1~5d.收集细胞,以不含血清的RPMI1460洗涤离心,弃上清,每管加入0.5mL的1g/LNBT溶液和0.1mLTPA溶液,摇匀,37℃反应30~60min.吸取少量细胞悬液,涂片,空气干燥,常规WrightGiem
硝基蓝四氮唑还原试验的简介
硝基蓝四氮唑还原试验是对中性粒细胞吞噬力测定。静脉血4ml,肝素抗凝。NBT实验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能。
氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定根系活力
【原理】 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80mV的氧化还原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲 (TTF),如下式: 生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
关于硝基蓝四氮唑还原试验的简介
硝基蓝四氮唑还原试验是对中性粒细胞吞噬力测定。静脉血4ml,肝素抗凝。NBT实验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能。 正常参考值: 白细胞吞噬细菌百分率62~76% 吞噬指数132~172%
临床化学检查方法介绍硝基四唑氮蓝试验介绍
硝基四唑氮蓝试验介绍: 中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗增加,代谢中所脱的氢还原氮蓝四唑成为蓝黑色的点状或块状物,沉积于粒细胞胞质中,根据细胞内沉积颗粒判断阳性率。本试验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能,可以用于诊断儿童慢性肉芽肿病,以及用于鉴别细菌性和病毒性感染。硝基四唑氮蓝试验正常值: 正
硝基四唑氮蓝试验的正常值
正常人,一般认为10%以上者为阳性。5%-10%为NBT阴性。若NBT为阴性,则取0.5ml肝素抗凝血加10μg细菌内毒素后按上法试之,如NBT阳性细胞>29%,表示受检者的中性粒细胞吞噬功能正常,若仍为5%-10%,则属功能异常。
硝基四唑氮蓝试验的临床意义
NBT低值见于慢性肉芽肿、先天性丙球缺乏症、红斑狼疮以及使用免疫抑制剂等。此法还可用于区别细菌与病毒感染。如为病毒感染时,虽有发热,但NBT仍正常;只有细菌、真菌感染时,NBT阳性细胞增加。NBT试验还可用于器官移植后发热反应的鉴别诊断。如因细菌感染而发热,NBT值升高;但如因体内非特异性反应而
硝基蓝四氮唑还原试验的异常结果分析
升高:常见于细菌性感染,如败血症,化脓性关节炎,骨髓炎,细菌性脑膜炎等。而病毒性感染、器官移植后排斥反应引起的发热则不升高。 降低:主要用于诊断中性粒细胞缺陷病,如儿童慢性肉芽肿,髓性过氧化物酶缺乏症等。
硝基四唑氮蓝试验的注意事项
(1)肝素抗凝血和NBT应用液等量混合后保温。保温方式很重要,水浴中会使NBT还原减少。 (2)计数时,凡聚集成团或破裂的中性粒细胞和单核细胞不计在内。经常有成堆的血小板黏附在中性粒细胞上,注意区别。 (3)本试验特异性不强,目前主要用于慢性肉芽肿和细菌系统感染的筛选。
氯化三苯基四氮唑法测定根系活力的原理和操作方法
【原理】氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80mV的氧化还原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲 (TTF),如下式:生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、
关于四唑硝基蓝的基本信息介绍
又称为硝基蓝四唑, 氯化硝基四氮唑蓝· 英文名:Tetranitroblue tetrazolium chloride(NBT).别名 3,3'-(3,3'-Dimethoxy[1,1'-biphenyl]-4,4'-diyl)bis[2,5-bis(p-nitr
关于硝基蓝四氮唑还原试验的异常结果分析
升高:常见于细菌性感染,如败血症,化脓性关节炎,骨髓炎,细菌性脑膜炎等。而病毒性感染、器官移植后排斥反应引起的发热则不升高。 降低:主要用于诊断中性粒细胞缺陷病,如儿童慢性肉芽肿,髓性过氧化物酶缺乏症等。
免疫学实验硝基四唑氮蓝试验介绍
硝基四唑氮蓝试验介绍: 中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗增加,代谢中所脱的氢还原氮蓝四唑成为蓝黑色的点状或块状物,沉积于粒细胞胞质中,根据细胞内沉积颗粒判断阳性率。本试验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能,可以用于诊断儿童慢性肉芽肿病,以及用于鉴别细菌性和病毒性感染。 硝基四唑氮蓝试验正常值
氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力
一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物 体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可
关于氯化三苯基四氮唑法的方法介绍
1、氯化三苯基四氮唑法— 定性测定 (1)配置反应液 把1%TTC溶液,0.4moL/L琥珀酸钠和磷酸缓冲液按1:5:4比例混合。 (2)把根仔细洗净,把地上部分从茎基切除,将根放入三角瓶中,倒入反应液,以浸没根为度,置37℃左右暗处放1h,以观察着色情况,新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变
关于氯化三苯基四氮唑法—种子测定的介绍
一、氯化三苯基四氮唑法—种子测定的原理 有生活力的种子能够进行呼吸代谢,在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来?的氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的2,3,5-三苯基氯化四唑还原为红色、不溶性的三苯基甲臢,而且种子的生活力越强,代谢活动越旺盛,被染成红色的程度越深,死亡的种子由于没有呼吸作用,因而
琥珀酸脱氢酶活力测定方法-硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法
琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succinate+PMS→Fumarate+PMSH2;②PMSH2+DCPIP→PMS
琥珀酸脱氢酶活力测定方法-硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法
琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succinate+PMS→Fumarate+PMSH2;②PMSH2+DCPIP→PMS