电泳浓缩胶浓度怎么选取

1,看目的蛋白的大小 一般actin以下的可以跑12胶 红线左右可以用12或10跑 几百的很大的用6的胶 小蛋白12的10的一般都能跑 如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看 2,看样品浓度多少,以及你想用几次 通常我们是定到4微每微,总量10...5919......阅读全文

蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液

蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液产品说明书主要用途蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液(pH 8.3)是一种旨在用于常规变性蛋白电泳运行的辅助溶液。产品即到即用,无蛋白酶污染,性能稳定,高纯均一,重复性好,简化操作,建立标准化体系。产品成分Triza Base,Glycine,SDS,Deionized Wat

蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液

  蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液产品说明书   主要用途   蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液(pH 8.3)是一种旨在用于常规变性蛋白电泳运行的辅助溶液。产品即到即用,无蛋白酶污染,性能稳定,高纯均一,重复性好,简化操作,建立标准化体系。   产品成分   Triza Base,Glycine

westernbloting电泳胶可以4度过夜吗

跑westernblot时电泳时的条带呈斜行原因很多主要可能是电泳凝胶配制时未搅拌均匀,造成条带未能直线跑完电泳凝胶中混入气泡,造成条带被挤压倾斜也可能是样品缓冲液有干扰,造成条带迁移率不统一另外上样量过大,被其他泳道挤压也有可能

蛋白电泳胶跑得不好怎么办

是不是发生在从压缩胶要进分离胶的时候?有没有发现“漏样”的现象?就是某一个或几个孔的样品在分离胶和压缩胶交界处漏了,可以看到横向的一条线不管是不是这种情况,我建议你把配胶的buffer换掉,如果还不行,上样缓冲液和lysis buffer都要换

1%琼脂凝胶电泳怎么制胶

操作步骤如下:1.制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.2.胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾

水平电泳槽的制胶步骤介绍

主要特征: ·模具一次成型,耐冲击、耐高温、耐腐蚀、不漏液。 ·缓冲容量充足,既可以起到良好的冷却效果,又可以使电泳过程中PH值保持稳定。 ·可拆卸电极架,使电极的维修及更换更加方便、快捷、安全。 ·有效防止槽内液体挥发或触电的透明上盖,开盖自动断电,确保操作安全。·配备制胶槽,省去胶带封胶的繁琐操

SDSPAGE蛋白电泳配胶不凝固

我分析原因是过硫酸胺失效,过硫酸氨最好是先用现配,如果怕麻烦而且跑胶的频率很高的话,那么用完之后ap要放在4℃保存,一周之后必须新配。另外可以适当的增加temed的量,从5μl提高到8μl并无大碍。如你所说,是不是就是ap失效呢,还有,我强烈建议你复查一边浓缩胶,分离胶各各buffer的组分是否配制

RNA琼脂糖变性胶电泳分析

一、原理RNA分子是以单链形式存在的,但在局部仍有双链结构形成。由于这种局部双链结构的干扰,使得在非变性凝胶上对RNA分子完整性的鉴定及其分子量大小的检测,变得不十分可靠。通过加入乙二醛一二甲基亚砜、氢氧化甲基汞、甲醛等变性剂进行变性处理,使其局部双链变为单链。再进行电泳,RNA的泳动距离与其片段大

电泳分离技术配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介

变性条件下的凝胶电泳实验——梯度胶凝胶电泳

实验方法原理在凝胶电泳中使用丙烯酰胺梯度胶比使用线性胶有两大优点。一是在高浓度丙烯酰胺条件下可以增加蛋白质的分子筛作用,从而使低分子量蛋白质形成淸晰的条带。另一是梯度胶可以在块胶内分离分子量范围更大的蛋白质(如 5%~20% 的凝胶可以分离 15 kDa~200 kDa 的蛋白质;而 3%~30%

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——制胶(用于垂直电泳,水平电泳)

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同,只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气,以免产生泡沫

配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCl缓冲系统,浓缩胶是pH=6.7,分离胶pH=8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而Cl-离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分

配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介

电泳切胶的一些注意事项

电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳子来跑胶。3.关于防护,在一般有机玻璃后就足够了,戴

电泳槽制胶优点及其注意事项

 伯乐电泳槽制胶优点  封边垫条*地固定在长玻板上,保证玻板对齐,防止漏胶  凸轮卡锁的制胶框操作简单,在任何平面上都能对齐玻板  特殊的塑料电泳梳不会抑制凝胶聚合反应,制胶过程中,内置的脊可避免的空气接触,保证均一的凝胶聚合  标有厚底和孔数的玻板和电泳梳便于识别  平行排列的灌胶架能同时看到正在

配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCl缓冲系统,浓缩胶是pH=6.7,分离胶pH=8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而Cl-离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分

配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCl缓冲系统,浓缩胶是pH=6.7,分离胶pH=8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而Cl-离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分

变性条件下的凝胶电泳实验——SDS尿素胶凝胶电泳

实验方法原理当蛋白质的电荷性质与其质量明显相关时。小分子蛋白质在 SDS-PAGE 中的迁移率便不再与它们的分子量成比例。在这种情况下通常使用 SDS-尿素胶另外,SDS-尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对于免疫沉淀和在低离子强度下不溶的膜蛋白是非常有用的。实验材料蛋白质溶液实验步骤1. 工作溶液1.1 溶液

24cm-IPG胶条二维电泳

实验概要本实验应用二维电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2DE)技术对提取的2D大鼠视网膜组织蛋白进行分离,获得了分辫率高和重复性好的2DE图像,建立了2DE分离技术的平台,为进一步研究莫定了基础。实验步骤1. 清洗器具用品:清洗所有的干胶条套件,包括胶条

电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项

电泳时胶回收切胶的注意事项:电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片好洗净,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3. 关于防护

SubCell-G-水平电泳槽制胶优点

使用bio-rad电泳Sub-Cell GT水平电泳槽制胶有以下几个优点:1、封边垫条永久地固定在长玻板上,保证玻板精确对齐,防止漏胶 2、凸轮卡锁的制胶框操作简单,在任何平面上都能精确对齐玻板 3、特殊的塑料电泳梳不会抑制凝胶聚合反应,制胶过程中,内置的脊可避免的空气接触,保证均一的凝胶聚合 4、

电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项

  电泳时胶回收切胶的注意事项:   1. 电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。   2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而

电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项

  电泳时胶回收切胶的注意事项:   1. 电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片好洗净,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。   2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳

电泳时胶回收和凝胶成像的注意事项

电泳时胶回收切胶的注意事项: 1. 电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳子来跑胶。

RNA电泳跑胶为什么没有5S条带

生物体内一般含有核糖体rna(rrna)、信使rna(mrna)、转运rna(trna)三种主要的rna,其中rrna含量最多,提取组织总rna所得最多的就是rrna。真核生物中含有5s、5.8s、18s、28s,原核生物中有5s、16s、23s;而植物组织中一般较多的为5s、18s、28ss代表沉

琼脂糖凝胶电泳,做胶加EB目的

染色啊。你agarose胶电泳跑DNA,根据大小不同电泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可见光下看不见DNA的。所以加EB也好,SYBRgreen也好,我们实验室用的genefinder也好,都是将DNA染色,用特殊的化学分子与DNA结合,并且在特殊波长的激发光下发射荧光,荧光强度与DNA含

蛋白质电泳制胶要注意哪些方面

总结平时的实验经验,大概需要注意以下几条:1.玻璃板需要清洗干净,不然蛋白质在凝胶中电泳会受到阻碍.一般用软布在自来水下清洗后用蒸馏水洗一下,或者直接偷懒的办法就是拿酒精棉球擦擦.2.确保制胶所用试剂有效.3.根据你的目的蛋白分子量确定胶的浓度.一般采用如下:蛋白分子量大小(kd) 凝胶百分比(10

琼脂糖凝胶电泳,做胶加EB目的

在搜搜上找的同一问题的答案:“染色啊。你agarose胶电泳跑DNA,根据大小不同电泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可见光下看不见DNA的。所以加EB也好,SYBR green也好,我们实验室用的genefinder也好,都是将DNA染色,用特殊的化学分子与DNA结合,并且在特殊波长的激发

SDSPAGE蛋白质电泳-配胶缓冲液系统对电泳的影响

在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介

聚丙烯酰胺凝胶(PAGE胶电泳)电泳的方法与银染方法

PAGE胶电泳(聚丙烯酰胺凝胶电泳 )主要是以PAGE为介质,根据DNA分子大小和电荷分离DNA分子。PAGE胶电泳采用银染法进行显色。银染的原理:一、银离子(一般是AgNO3 )和DNA结合;二、还原剂甲醛把Ag+ 还原成银颗粒,最终DNA呈现为黑褐色。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持