有哪些常用的色谱定量方法

在无法找到样品中没有的合适的组分作为内标物时,可以采用内加法;在分析溶液类型的样品时,如果无法找到空白溶剂,也可以采用内加法。内加法也经常被称为标准加入法。内加法需要除了和内标法一样进行一份添加样品的处理和分析外,还需要对原始样品进行分析,并根据两次分析结果计算得到待测组分含量。和内标法一样,内加法对进样量并不敏感,不同之处在于至少需要两次分析。下面我们用一个实际应用的例子来说明内加法是如何工作的:题:在分析某混合芳烃样品时,测得样品中苯的面积为1100,甲苯的面积为2000,(其它组分面积略)。称取40.00g该样品,加入0.40g甲苯后混合均匀,在同一色谱仪上进混合后样品测到苯的面积为1200,甲苯的面积为2400,试计算甲苯的含量。分析:本题的分析过程是一个典型的内加法操作,其中内加物为甲苯,待测组分为甲苯和苯。解:1. 由于进样量并不准确,因此两次分析的谱图很难直接进行对比。为了取得可以对比的一致性,我们通过数字计算调整......阅读全文

定量方法知多少绝对定量

在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。使用标准曲线进行绝对定量绝对定量是通过样品的Cq值和标准

荧光定量pcr仪定量方法之绝对定量

  在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。   使用标准曲线进行绝对定量   绝对定量是通

尿糖定量测定方法

  尿糖定量测定是一种临床化验检查项目、化验标本为24小时尿,取其中100-200毫升送检,并记录总尿量、参考值为0.6-5.0毫摩尔/24小时、尿糖定量测定可以更精确地测出糖尿病患者每日尿糖排出量、为临床用药或饮食控制的治疗效果起监护作用。24h尿糖定量对判断糖尿病的程度和指导用药较尿糖定性更为准

尿糖定量测定方法

  尿糖定量测定是一种临床化验检查项目、化验标本为24小时尿,取其中100-200毫升送检,并记录总尿量、参考值为0.6-5.0毫摩尔/24小时、尿糖定量测定可以更精确地测出糖尿病患者每日尿糖排出量、为临床用药或饮食控制的治疗效果起监护作用。24h尿糖定量对判断糖尿病的程度和指导用药较尿糖定性更为准

几种DNA定量方法

Quantitation of DNAFluorescent quantitationWear gloves and goggles protecting from EtBr and UV lightWith an EDP (dilute mode) pick up 9 µl TE and 1 µl

原子吸收定量方法

原子吸收光谱法是一种元素定量分析方法,它可以用于测定60多种金属元素和一些非金属元素的含量。定量分析方法:一、标准曲线法:配制一系列不同浓度的待测元素标准溶液,在选定的条件下分别测定其吸光度,以测得的吸光度A为纵坐标,浓度为横坐标作图,得到标准曲线。再在相同条件下测定试液的吸光度,由标准曲线上就可求

质谱定量方法

外标法1.单点校正法单点校正法实际上是利用原点作为标准曲线上的另一个点,当方法存在系统误差时(即,标准工作曲线不通过原点),单点校正法的误差较大。☞以纯溶剂配制标准工作溶液GB/T21317-2007动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法“根据样液中被测四环素类兽药残留的含量情况,选定峰高相近的标

实验室分析方法液相色谱的定量方法—定量方法

峰高和峰面积测量仅是对检测信号的一种响应该响应需同组分的浓度或者质量结合方可完成定量方法。无论在相同的还是不同的色谱条件下进行的试验,均要采取一定的手段加以校正,才可能得到准确的定量结果。主成分自身对照法、峰面积归化、内标法、外标法及标准加入法是HPLC定量分析中常用的校正技术。不加校正因子的主成分

定量方法知多少之相对定量法详解

在荧光定量PCR检测实验中可以采用多种方法来进行基因的定量。定量的方法也取决于实验的目标。当实验者对待测样品中的核酸的具体拷贝数比较感兴趣时,可以选择绝对定量。如果实验者关注的是实验样本与对照样本之间的倍数变化,无需精确测定拷贝数,则选择相对定量。目前相对定量方法适用于大多数基因表达研究,可分析对照

荧光定量PCR技术的荧光定量PCR的方法

接下来我们就来了解一下荧光定量的主要方法,我们如何选择合适的方法?荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而荧光定量 PCR 的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反

传统定量PCR方法简介

1)内参照法:在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。2)竞争法:选

定量分析方法

  一. 标准曲线法    配制与试样溶液相同或相近基体的含有不同浓度的待测元素的标准溶液,分别测定 A样,作 A-c 曲线,测定试样溶液的A,从标准曲线上查得 c样。    适用于组成简单、干扰较少的试样。   二. 直接比较法:样品数量不多,浓度范围小   三. 标准加入法    当试

传统定量PCR方法简介

  1)内参照法:在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。  2)竞

薄层层析定量方法

可分为洗脱测定法、薄层层析法和原位扫描法:洗脱测定法①洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。原位扫描法②原位扫描法,将展开后的薄层板放在光密度计内,以一定波长的光照射,同时使斑

定量分析方法

  一. 标准曲线法   配制与试样溶液相同或相近基体的含有不同浓度的待测元素的标准溶液,分别测定 A样,作 A-c 曲线,测定试样溶液的A,从标准曲线上查得 c样。   适用于组成简单、干扰较少的试样。  二. 直接比较法:样品数量不多,浓度范围小  三. 标准加入法   当试样基体影响较大,且又

荧光定量PCR检测方法

  所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。  检测方法  1.SYBRGreenⅠ法:  在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信

分享定量液体灌装机中常见的定量方法

  定量灌装机是目前常用的生产后期设备,尤其是对于大规模生产的液体产品来说更是必不可少。液体在生产的时候定量方法是一个很重要的点,所以我们在次为大家说明一下常见的定量方式。   首先要说的是定量杯的方式,该类方法首先要把液体注入定量杯中,然后再将其注入到瓶中。这种方式定量比较准确,不过不适合于粘稠

尿蛋白定量试验方法

  检查方法有:沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。目前染料结合法、比色法应用较广泛,免疫法及尿蛋白电泳法具有更高的灵敏度和特异性,有很好的临床应用前景。  尿蛋白检测方法的选择:对于进行现场快速检验,或初次就诊的门诊患者,采用试带法或磺基水杨酸法,基本可满足健康体检和疾

蛋白质定量常用方法

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同,特别是白蛋白含色氨酸为0.2%,而γ-球蛋白中含量达2%-3%,导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+,集中原法和双缩脲反应两者的作用,使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依

几种传统定量PCR方法简介

1)内参照法:在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。2)竞争法:选

丙肝病毒定量检测方法

丙肝病毒检测手段,目前检测丙肝病毒核酸,使用的试剂是国产的和进口的两种类型的试剂。这两种类型的试剂检测灵敏度是不一样的,因为丙肝病毒有一个特点,在血清当中的浓度是比较低的,所以有时候病毒水平低的情况下,用灵敏度不高的试剂,可能病毒在低水平情况下,就会漏检,现在国产的试剂检测水平,病毒在100cps/

蛋白质定量常用方法

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同,特别是白蛋白含色氨酸为0.2%,而γ-球蛋白中含量达2%-3%,导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+,集中原法和双缩脲反应两者的作用,使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依赖

相对定量实验的方法介绍

 相对定量实验有两种方法:标准曲线法和CT值比较法。如果使用标准曲线法,可以使用绝对标准品,也可以使用相对标准品,而且相对标准品在实验操作上更为简便易行。相对标准品是只知道样品中DNA或RNA的稀释比例而不需要知道其分子数目的标准品,典型的做法是将一个已知pg数的样品做一系列梯度稀释。CT值比较法是

实时荧光定量PCR检测方法

聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。目前,PCR成为分子生物学研究必不可少的一部分。实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技术,是指在PCR反应

尿沉渣定量检查计数方法

尿沉渣定量检查有传统的艾迪(Addis)计数法以及1h计数法、尿沉渣计数板法和仪器计数法等。 1.1h尿有形成分计数法 本法较留12h尿简便,不需限制饮食(但不能大量饮水),不必加防腐剂,对有形成分影响小,适用于门诊及住院患者连续检查。2.尿沉渣定量分析板计数法 本法实验条件(尿量、离心、留一定量沉

定量研究论文的主要方法

定量研究论文的主要方法是基于数据的统计分析方法,通过收集、整理和分析大量的数字数据,对研究问题进行定量描述和解释,从而形成客观、科学的研究结论。

光谱定量分析方法

由于直读光谱是一种相对的分析方法,必须先绘制出可靠的标准曲线才可能到可靠的分析结果。标准曲线的制作可以有多种方式,常见的有校准曲线法、控制试样法、持久曲线法等。(1)校准曲线法 校准曲线法一般多采用拟合(二次或三次方程)来近似表示,也有用折线法。a.当元素的含量较低时,可用V-c或-cx等。制作校准

核酸定量分析方法

核酸定量分析 DNA 或 RNA(以260nm处的吸光值为基础) 1. 制备用蒸馏水稀释过的DNA 或 RNA 样品溶液 ( 典型稀释比为 1:100 或 5:500μl) 2. 使用紫外光源,在260 nm 处测定吸光值,也可以在280 nm 和230 nm 测定吸光值 (260/280 的光吸收

定量限测定方法的评价

  定量限 (limit of quantitation,LOQ)是指在保证具有一定可靠性(一定准确度和精密度)的前提下,分析方法能够测定出的样品中药物的最低浓度。  它反映了分析方法测定低药物浓度样品时具有的可靠性。它与上述的检测限的差别在于:定量限要定量测定某一药物在样品介质中的最低浓度,且定量

实时荧光定量PCR一种科学准确的定量方法

实时荧光定量PCR——一种科学准确的定量方法实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。本文试就其定量原理、