简述高效液相色谱法的应用领域
HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,应用十分广泛。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。 高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等物质的分析。......阅读全文
简述高效液相色谱法色谱柱的系统适用性和分离度
1、系统适用性 按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求;或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。 2、分离度 定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为:R=2(t
高效液相色谱法色谱柱的简介
在选定的条件下,注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液,记录色谱图,量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t(R)和半高峰宽W(h/2),按n=5.54[t(R)╱W(h/2)]^2计算色谱柱的理论板数,如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数,应改变色谱柱的某些条件(如柱长、载体
高效液相色谱法的计算方法
楼主,您好。 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料
有效的分离方法─高效液相色谱法
王俊玲的高效液相色谱仪分离方法有传统的蒸馏、结晶、萃取、萃取等。随着生命科学的兴起,出现了离心电泳离子交换膜技术和高效液相色谱仪技术等新的分离技术。近年来,高效液相色谱仪的发展引起了人们的特别关注。色谱法可以追溯到1906年。当俄罗斯的Zhiwuxuejiaci维持植物色素的分离时,他首先应用色谱法
高效液相色谱法的计算公式
高效液相色谱以经典的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂( 硅胶、氧化铝等)。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大,传质扩散慢,因而柱效低,分离能力差,只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用
高效液相色谱法的计算公式
高效液相色谱以经典的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂( 硅胶、氧化铝等)。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大,传质扩散慢,因而柱效低,分离能力差,只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用
谷胱苷肽的高效液相色谱法检测介绍
原理:高效液相色谱法是由于溶质在同定相和流动相之间的分配系数、亲和力、分子大小、吸附能力等不同,而进行连续分离的过程。 操作步骤: ①色谱条件 色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm) 。 流动相:磷酸二氢钠和辛烷磺酸钠混合溶液(磷酸二氢钠3.0 g
药典中的高效液相色谱法(一)
高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有
高效液相色谱法的计算方法
2(t-t) R= ──W+W 式中 t为相邻两峰中后一峰的保留时间; t为相邻两峰中前一峰的保留时间; W及W为此相邻两峰的峰宽。 除另外有规定外,分离度应大于1.5。 (3) 拖尾因子 为保证测量精度,特别当采用峰高法测量时,应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定,
高效液相色谱法的计算公式
给你个大原则,HPLC的方法学不是做了线性吗,就根据这个来就行。C对/A对=C样/A样C是浓度,A是峰面积,像含量计算,有按平均装量计算的,有按无水物计算的,公式稍微有点差别,自己可以导出来
泼尼松的测定—高效液相色谱法介绍
方法名称泼尼松的测定—高效液相色谱法应用范围该方法采用高效液相色谱法测定泼尼松的含量。该方法适用泼尼松。方法原理供试品和内标均制成甲醇溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长254nm处检测泼尼松(C21H26O5)和内标乙酰苯胺的吸收值,计算出其含量。试剂1、甲醇2、水3、四
高效液相色谱法的定义、类型流程
在所有色谱技术中,液相色谱法(liquidchromatography,LC)是最早(1903年)发明的,但其初期发展比较慢,在液相色谱普及之前,纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。 到了20世纪60年代后期,将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来,使液相
高效液相色谱法检测苯并芘的介绍
高效液相色谱法是目前应用范围最广的色谱分析法,首先选取合适的液体作为流动相,采用高压输液系统,将流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离,再进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。目前,我国检测动植物油中苯并芘主要采用GB/T 22509-2008(3)中规定的反相高效液相色谱法,但该
关于高效液相色谱法的发展介绍
高效液相色谱法是用微细颗粒得到高效分离的办法,也已用于薄层层析。使用5~10微米的吸附剂制板,可得较好的分离效果,为与一般的薄层层析法相区别,称为高效薄层层析。其优点是样品量少(只需纳克量样品)、展开距离小、展开时间短,是薄层层析法的一个重要发展。
高效液相色谱法的适用范围
高效液相色谱法可对维生素、生物碱、激素、氨基酸、农药、核酸、香豆素、脂质等有机物质进行分析,也可测定一些无机离子及金属元素。
关于离子高效液相色谱法的介绍
用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器,为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰,设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。 以阴离子交换树脂(R-OH)作固定相,分离阴离子(如Br-)为例。当待测阴离子Br-随流动相(NaO
高效液相色谱法的计算方法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应
药典中的高效液相色谱法(二)
(2)分离度 定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为:式中tR2为相邻两峰中后一峰的保留时间;tR1为相邻两峰中前一峰的保留时间;W1及W2为此相邻两峰的峰宽。除另有规定外,分离度应大于1.5。(3)重复性 取各品种项下的对照溶液,
高效液相色谱法的组成及功能
高压输液泵功能驱动流动相和样品通过色谱分离柱和检测系统;性能要求流量稳定(±1),耐高压(30~60Mpa),耐各种流动相:例如:有机溶剂、水和缓冲液;种类往复泵和隔膜泵。色谱柱功能分离样品中的各个物质;尺寸10~30cm长,2~5mm内径的内壁抛光的不锈钢管柱;填料粒度5 ~10μm ,高效微粒固
高效液相色谱法的计算公式
[编辑本段]测定方法 定量测定时,可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时,须采用峰面积法。 面积归一化法 测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和,并求出占总峰面积的百分率
高效液相色谱法的计算公式
[编辑本段]测定方法 定量测定时,可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时,须采用峰面积法。 面积归一化法 测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和,并求出占总峰面积的百分率
高效液相色谱法的注意事项
1).流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4). 压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,
高效液相色谱法与经典液相色谱法的主要区别
一、类型不同1、高效液相色谱法1)吸附色谱法(Adsorption Chromatography)2)分配色谱法(Partition Chromatography)3)离子色谱法(Ion Chromatography)4)分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatogr
简述黄曲霉毒素M1的高效液相色谱法检测分析原理
用C18柱抽提纯化样品中的AFM1,乙醚对C18柱洗涤,再用CH2Cl2-乙醇洗脱AFM1,然后加入三氟乙酸(TFA)对AFM1进行衍生化处理,利用液相色谱荧光检测器检测,并与标准AFM1-TFA的衍生物比较,进行定性、定量分析。
简述液相色谱法的原理
液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同,液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以硅胶为填料的液固色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式,液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。按吸附力可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换
高聚物用高效液相色谱法分析
高效液相色谱法仅需要将样品制成溶液而不需要气化,因此不受样品挥发性的限制原则上,高效液相色谱法可用于高沸点、热稳定性差、相对分子质量高(大于400)的有机物的分离和分析(这些物质约占总有机物的75%-80%)。据统计,在已知化合物中,约有20%的气相色谱分析可用,约70%-80%的液相色谱分析可用。
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,小于1小时。3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,小于1小时。3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工
高效液相色谱法可以检测什么
可以检测几乎所有的有机化合物的纯度。
高效液相色谱法相关词汇基线
基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。