有效的分离方法─高效液相色谱法
王俊玲的高效液相色谱仪分离方法有传统的蒸馏、结晶、萃取、萃取等。随着生命科学的兴起,出现了离心电泳离子交换膜技术和高效液相色谱仪技术等新的分离技术。近年来,高效液相色谱仪的发展引起了人们的特别关注。色谱法可以追溯到1906年。当俄罗斯的Zhiwuxuejiaci维持植物色素的分离时,他首先应用色谱法。他用碳酸钙填充根玻璃管,并将植物提取物倒在管的上碳酸钙粉末上。根柱管然后用石油醚清洗,颜料混合物随着石油醚的清洗分为绿色和黄色的颜料带。混合物被分离了。他将这种方法命名为希腊文的颜色记录,中文翻译为色谱法或色谱法。此后,其特征在于两相位于的状态,该气体用作称为气相色谱仪的流动相,并且该液体用作高效液相色谱仪的流动相。根据分离机理,分为吸附色谱,离子色谱和排阻色谱。高效液相色谱一(HPLC)原理0又称高效液相色谱仪(HPLC)。如上所述,色谱分离的基本原理并不复杂。当石油醚在流动相中通过碳酸钙粉末在固定相中携带混合物时,由于混合物组分......阅读全文
有效的分离方法─高效液相色谱法
王俊玲的高效液相色谱仪分离方法有传统的蒸馏、结晶、萃取、萃取等。随着生命科学的兴起,出现了离心电泳离子交换膜技术和高效液相色谱仪技术等新的分离技术。近年来,高效液相色谱仪的发展引起了人们的特别关注。色谱法可以追溯到1906年。当俄罗斯的Zhiwuxuejiaci维持植物色素的分离时,他首先应用色谱法
高效液相色谱法的分类及其分离原理
高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。1.液-固色谱法(液-固吸附色谱法)固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。①液-固色谱法的作用机制吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中的溶质分子X(液相)
高效液相色谱法相关词汇分离度
分离度(resolution,R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。
高效液相色谱法的主要类型及其分离原理
高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且
高效液相色谱法的主要类型和分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型: 1 .液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相
高效液相色谱法液—固分离原理介绍
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm 式中
高效液相色谱法液液分配的分离原理介绍
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱
高效液相色谱法离子交换分离原理介绍
(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流 动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中) (
高效液相色谱法的计算方法
楼主,您好。 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料
高效液相色谱法的计算方法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应
高效液相色谱法的计算方法
2(t-t) R= ──W+W 式中 t为相邻两峰中后一峰的保留时间; t为相邻两峰中前一峰的保留时间; W及W为此相邻两峰的峰宽。 除另外有规定外,分离度应大于1.5。 (3) 拖尾因子 为保证测量精度,特别当采用峰高法测量时,应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定,
高效液相色谱法分析分离顺反异构体药物
HPLC法在顺反异构体药物的分离分析中应用广泛,其可与多种检测器联用,在分离分析高沸点、大分子、热稳定性差的化合物方面具有极大优势,而其对顺反异构体的分离选择性和检测精确度主要取决于选用合适的色谱柱和检测器。
高效分离外泌体的方法
关于分离外泌体的最佳方法,仍然众说纷纭,尚无定论。在诸多方法中,尺寸排除色谱法(size exclusion chromatography,SEC)因可分离得到高纯度和浓缩的样本,被广泛用来分离生物液体样本。SEC可通过离心或重力流进行。在重力流的作用下,一个样本可以收集到多组分离组分,并可
高效液相色谱法分离巴比妥与苯巴比妥实验
实验方法原理高效液相色谱法是一种重要的色谱分离技术。根据所用固定相和分离机理的不同,一般将高效液相色谱分为分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和空间排斥色谱等。在分配色谱中,组分在色谱柱上的保留程度取决于它们在固定相和流动相之间的分配系数K:为组分在固定相中的浓度与组分在流动相中浓度之比。显然,K值越大
高效液相色谱法分离巴比妥与苯巴比妥实验
实验方法原理高效液相色谱法是一种重要的色谱分离技术。根据所用固定相和分离机理的不同,一般将高效液相色谱分为分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和空间排斥色谱等。在分配色谱中,组分在色谱柱上的保留程度取决于它们在固定相和流动相之间的分配系数K:为组分在固定相中的浓度与组分在流动相中浓度之比。显然,K值越大
—高效液相色谱法测定腺苷的方法计算
方法名称灵芝子珍珠口服液—腺苷的测定—高效液相色谱法应用范围本方法采用高效液相色谱法测定灵芝子珍珠口服液中腺苷的含量。本方法适用于灵芝子珍珠口服液。方法原理取供试品加甲醇,超声处理,放置待沉淀完全,滤过,取许滤液蒸干,残渣加水溶解,以水饱和的正丁醇提取,正丁醇提取液蒸干,残渣加50%甲醇溶解并定容,
高效液相色谱法根据分离机制的不同可分几种主要类型
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型:1.液—液分配色谱法(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化学键合相色谱(ChemicallyBondedPhaseChromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极
气相色谱法与高效液相色谱法的分离原理介绍
分离原理: 1.气相:气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。 2.液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色
高效液相色谱法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各
高效液相色谱法
首先保留时间与标准峰要完全一致,你可以通过加标的方式来确认,加标浓度大致与目标响应相当,若加的标准峰与目标物完全重叠,则可认为是单个组分,若出现肩峰,则表明有杂峰。如果是DAD检测器,可以通过光谱图来识别,一般的HPLC-DAD就自带峰纯度检测功能,绿区越大表明峰越纯。当然你自己也可以看,因为峰是短
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送。
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压
高效液相色谱法
高效液相色谱法概述HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,需高压泵推动,柱效高,分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程,其组成、比例和pH值可灵活调节,分离模
高效液相色谱法的定量分析方法
高效液相色谱法(HPLC)是一种常用的分离和分析方法,常用于有机物、生物大分子、离子、蛋白质、糖类等物质的分离和测定。在HPLC分析中,常用的定量分析方法有外标法、内标法和归一法。外标法:此方法是通过比较样液与标准溶液中目标物质的峰面积来确定样液中目标物质的含量。内标法:此方法是在样液中加入一种内标
如何建立高效液相色谱法测定含量的方法
1 色谱条件的确定专属性是色谱条件建立的关键通常是采用在被测物对照品(或供试品)中加入适量的杂质或辅料以验证所选色谱条件能否将各杂质与被测物分离检出[2]。应按1(w/w)被测物浓度的各杂质量添加至被测物中模拟被测物中可能存在杂质的状态即有少量(约1)杂质存在时能否与被测物达到完全分离(
高效液相色谱法测定叶黄素的方法介绍
高效液相色谱法是一种灵敏性强、高效、快速的分离方法,能精确检测各种组分在其样品中的含量,是使用的最广泛的对叶黄素进行定量分析的检测方法。该方法具有较高的精确性、稳定性好,能够高效、快速的检测样品中叶黄素的成分含量 。
高效液相色谱法常用的定量方法内标法
内标法 按品种正文项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物质,分别配成溶液,各精密量取适量,混合配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量进样,记录色谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算校正因子: 式中 AS为内标物质的峰面积或峰高; AR为对照品的峰面积或峰高; cs为内标
甜味剂检测方法——高效液相色谱法
高效液相色谱法是检测食品中甜味剂常用的方法之一。在我国的食品卫生检验方法汇编中GB/T 5009140-2003饮料中乙酰磺胺酸钾的测定和GB/T 500928-2016食品中糖精钠的测定第一法都是采用液相色谱法检测的。目前已经开展了用紫外吸收检测器、二极管阵列检测器、示差折光检测器和蒸发散射检测器
简述高效液相色谱法色谱柱的系统适用性和分离度
1、系统适用性 按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求;或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。 2、分离度 定量分析时,为便于准确测量,要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度(R)的计算公式为:R=2(t
液相色谱法的分离原理
液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色