高效液相色谱法使用的仪器高压泵的介绍
HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、高效分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效液相色谱的特点之一。HPLC使用的高压泵应满足下列条件: a. 流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围(一般为1~10 mL/min); b. 能抗溶剂腐蚀; c. 有较高的输液压力;对一般分离,60×10^5Pa的压力就满足了,对高效分离,要求达到150~300×10^5Pa。 ⑴往复式柱塞泵 当柱塞推入缸体时,泵头出口(上部)的单向阀打开,同时,流动相进入的单向阀(下部)关闭,这时就输出少量的流体。反之,当柱塞向外拉时,流动相入口的单向阀打开,出口的单向阀同时关闭,一定量的流动相就由其储液器吸入缸体中。这种泵的特点是不受整......阅读全文
高效液相色谱法的应用
高效液相色谱法的应用远远广于气相色谱法。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物研究、环境监测、食品检验及法学检验等领域。 一.在食品分析中的应用 1.食品营养成分分析:蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸(邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等)、有机胺、矿物质等; 2.
高效液相色谱法的出现
1960年代,为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。高效液相色谱使用粒径更细的固定相填充色谱柱,提高色谱柱的塔板数,以高压驱动流动相,
高效液相色谱法的分类
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混
高效液相色谱法的简介
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
高效液相色谱法的应用
高效液相色谱法的应用远远广于气相色谱法。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物研究、环境监测、食品检验及法学检验等领域。 一. 在食品分析中的应用 1.食品营养成分分析:蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸(邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等)、有机胺、矿物质等;
阿魏酸的高效液相色谱法分析介绍
用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量,方法简单快速,结果准确,精密度高。文献介绍其流动相多采用酸性系统,主要有甲醇-水-磷酸系统、甲醇-水-冰乙酸系统、甲醇-乙腈-水-冰乙酸系统等,试验中可适当调整甲醇的用量。采用HPLC法测定复方银杏口服液中阿魏酸的含量,流动相为甲醇:1%冰醋酸(45:55),检
高效液相色谱法测定叶黄素的方法介绍
高效液相色谱法是一种灵敏性强、高效、快速的分离方法,能精确检测各种组分在其样品中的含量,是使用的最广泛的对叶黄素进行定量分析的检测方法。该方法具有较高的精确性、稳定性好,能够高效、快速的检测样品中叶黄素的成分含量 。
高效液相色谱法色谱柱的拖尾因子的介绍
为保证测量精度,特别当采用峰高法测量时,应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。拖尾因子计算公式为: T(拖尾因子)=W0.05h/2d1式中 W(0.05h)为0.05峰高处的峰宽; d1为峰极大至峰前沿之间的距离。除另有规定外,T应在
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送。
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压
高效液相色谱法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各
高效液相色谱法
高效液相色谱法概述HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,需高压泵推动,柱效高,分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程,其组成、比例和pH值可灵活调节,分离模
高效液相色谱法
首先保留时间与标准峰要完全一致,你可以通过加标的方式来确认,加标浓度大致与目标响应相当,若加的标准峰与目标物完全重叠,则可认为是单个组分,若出现肩峰,则表明有杂峰。如果是DAD检测器,可以通过光谱图来识别,一般的HPLC-DAD就自带峰纯度检测功能,绿区越大表明峰越纯。当然你自己也可以看,因为峰是短
实验室分析仪器高效液相色谱法的特点
1、高压液相色谱法以液体作为流动相(称为载液),液体流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了迅速通过色谱柱,必须对载液施加高压。在现代液相色谱法中供液压力和进样压力都很高,一般可达到15~35MPa。2、高速高效液相色谱法所需的分析时间较经典液相色谱法少得多,一般都小于1h,例如,分离苯的羟基化合物七个组
高效液相色谱法对仪器的一般要求和色谱条件
高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色谱柱内径一般为2.1~4.6mm,填充剂粒径约为2~10µm。超高效液相色谱仪是耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。 (1)色谱柱 反相色谱柱:以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的
液相色谱仪的高效液相色谱法的相关介绍
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体
高效液相色谱法检测乳铁蛋白的介绍
高效液相色谱法(HPLC)是利用不同的色谱柱对不同组分因分配系数及吸附力大小的不同而被分离,并被检测器识别的技术,其中由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系的反相高效色谱是HPLC中应用最为广泛的一种液相色谱法,优点是反应灵敏、结果准确可靠、重复性好,但缺点是对样品的纯度要求较高,往往需
关于环境分析方法—高效液相色谱法的介绍
高效液相色谱法(HPLC) 经典的液相色谱法是以重力流动的液体为流动相,因而分离速度很慢;由于色谱柱填充物粒度较大,分离效率不高,并缺乏专用的检测装置,使应用受到限制。在现代气相色谱技术的影响下,液相色谱法的流动相输液系统和色谱柱的填充材料都有了改革,于70年代形成了高效液相色谱法。其特点为:
高效液相色谱法液液分配的分离原理介绍
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱
高压泵有相关介绍
有另外一种高压泵做爆破性压力试验的增压泵,可以把液体增压到640Mpa的压力,广泛应用于各个行业,爆破行实验等。G系列气液增压泵采用单气控非平衡气体分配阀来实现泵的自动往复运动,泵体高压泵 气驱部分采用铝合金制造。接液部分根据介质不同选用碳钢或不锈钢,泵的全套密封件均为进口优质产品,从而保证了
高效液相色谱法的组成结构
可分为“高压输液泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、“馏分收集器”以及“数据获取与处理系统”等部分。
高效液相色谱法的技术动态
液相色谱和质谱连接,可以增加额外的分析能力,能够准确鉴定和定量像细胞和组织裂解液,血液,血浆,尿液和口腔液等复杂样品基质中的微量化合物。高效液相色谱质谱系统(ABSciex Eksigent LC / MS和LC / MS / MS)提供了一些独特的优势,包括:快速分析和流转所需的最少样品准备高灵敏
高效液相色谱法的主要优点
高效液相色谱法的主要优点是: ⑴分辩率高于其它色谱法;⑵速度快,十几分钟到几十分钟可完成;⑶重复性高;⑷高效相色谱柱可反复使用;⑸自动化操作,分析精确度高。
简述高效液相色谱法的类型
1.吸附色谱法(Adsorption Chromatography) 2.分配色谱法(Partition Chromatography) 3.离子色谱法(Ion Chromatography) 4.分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatography)
高效液相色谱法的操作流程
流程:如图1所示,溶剂贮器⑴中的流动相被泵⑵吸入,经〔3〕梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经⑷测其压力和流量,导入(5进样阀(器)经⑹保护柱、⑺分离柱后到⑻检测器检测,由⑽数据处理设备处理数据或⑾记录仪记录色谱图,⑿馏分收集器收集馏分,⒀为废液。
高效液相色谱法定性的参数
1.仪器工作条件环境温度:5-35℃相对湿度:20%-80%2.仪器外观仪器表面应光洁平整、字迹清晰,表面涂覆色泽均匀,不应有明显划伤、露底、裂纹、气泡等现象。各调节旋钮、按键、开关等工作正常,无松动;指示、显示清晰完整。
高效液相色谱法的主要类型
1.吸附色谱法(Adsorption Chromatography)2.分配色谱法(Partition Chromatography)3.离子色谱法(Ion Chromatography)4.分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatography)5.键合相色谱法(b
高效液相色谱法的工作原理
流动相通过高压泵进入系统,样品溶液通过注射器进入流动相,流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同,经过两相反复吸附-解吸分配后,各组分的运动速度有很大的不同。它被分离成一个单独的组件,然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传送给记录
关于高效液相色谱法的简介
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混
高效液相色谱法的优缺点
优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广;与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。