高效液相色谱法使用的仪器高压泵的介绍

HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、高效分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效液相色谱的特点之一。HPLC使用的高压泵应满足下列条件: a. 流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围(一般为1~10 mL/min); b. 能抗溶剂腐蚀; c. 有较高的输液压力;对一般分离,60×10^5Pa的压力就满足了,对高效分离,要求达到150~300×10^5Pa。 ⑴往复式柱塞泵 当柱塞推入缸体时,泵头出口(上部)的单向阀打开,同时,流动相进入的单向阀(下部)关闭,这时就输出少量的流体。反之,当柱塞向外拉时,流动相入口的单向阀打开,出口的单向阀同时关闭,一定量的流动相就由其储液器吸入缸体中。这种泵的特点是不受整......阅读全文

高效液相色谱法的历史发展

  高效液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、高效和高灵敏度的分离测定。高效液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的高效液相色谱仪,其自动化程

高效液相色谱法的相关叙述

  高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项高效、快速的分析分离技术,是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定

高效液相色谱法的优缺点

优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广;与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。

泼尼松的测定—高效液相色谱法

方法名称泼尼松的测定—高效液相色谱法应用范围该方法采用高效液相色谱法测定泼尼松的含量。该方法适用泼尼松。方法原理供试品和内标均制成甲醇溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长254nm处检测泼尼松(C21H26O5)和内标乙酰苯胺的吸收值,计算出其含量。试剂1、甲醇2、水3、四

高效液相色谱法的优缺点

优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广;与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。

高效液相色谱法的优缺点

优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广;与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。

高效液相色谱法的研究历史

1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)首次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography (来自希腊字, chroma 意思是颜色, graphy 意思是记录 - 直译为颜色记录)来描述他的彩色试验

高效液相色谱法的技术特点

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。③高效:分离效能高。可选择固定

高效液相色谱法的优缺点

高效液相色谱法的优缺点如下:一、优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广。与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。二、缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维

高效液相色谱法的应用简介

  1.在环境分析中的应用:可用于环芳烃(PAHs)、农药残留分析等。  2.在食品分析中的应用:可用于食品营养分析、食品添加剂分析、食品污染物分析等。  3.在生命科学中的应用:生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学和生物化学中分子量物质的纯化、分离和测定可以从分子水平上进行研究。  4.在医学

高效液相色谱法的优缺点

高效液相色谱法的优缺点如下:一、优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广。与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。二、缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维

高效液相色谱法与经典液相色谱法的区别

高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相(常以氨基、氰基键合相等作为固定相).反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性,也就是以非极性键合相为固定相(常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作

关于高压泵的操作规程介绍

  1、检查减速器油箱,高压泵油位和乳化液箱的水位是否在规定的油位和水位上。  2、检查安全阀,压力表、电接点压力表、水位表、液位指示器是否灵敏、正确;压力表、安全阀每年校验一次,安全阀定期作排气试验,以防阀芯粘连和阀孔堵塞。  3、检查水泵各部位,各阀门、电磁阀、管道等是否良好,不得有漏水、漏气,

高效液相色谱法液—固分离原理介绍

  流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm  式中

高效液相色谱法定量测定介绍内标法

采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则应调

高压泵的保养

    泵是液相色谱的核心,泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中,并要在高压下保持流量和压力的稳定。状态正常的高压泵是液相色谱准确分析的基础,所以平日一定要重视对泵的维护。  1、泵压力波动,很多情况下,泵的问题反映在压力上,压力波动又是常见的一类问题。通常我们可以通过重新清洗流路和再次脱气流动相

高压泵的原理

普通直列柱塞式喷油泵、单体泵以及VE VR分配泵等以柱塞(你可以理解成像活塞一样的东西,但非常精密,柱塞偶件配合间隙只有几个um)的上下移动产生高压燃油,然后推动出油阀将高压燃油输送至高压油路,再经喷油器(即,喷油嘴或油头)喷进柴油机的燃烧室内。柱塞的具体原理(书上)喷油泵的吸油和压油,由柱塞在柱塞

手性高效液相色谱法

手性高效液相色谱法分为直接法和间接法。对映体(enantiomer):在空间上不能重叠,互为镜像关系的立体异构体。立体异构体指分子中的结构基团在空间三维排列不同的化合物。手性药物(chiral,drug):含有手性中心的药物。手性中心即为化合物中某个碳原子上连接4个互不相同的基团时,称该碳原子被称为

高效液相色谱法(一)

高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。   在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有机 化合物和

高效液相色谱法(二)

二、进样 器一般HPLC分析常用六通进样阀(以美国RHEODYNE公司的7725和7725I型最常见),其关键部件由圆形密封垫子(转子)和固定底座(定子) 组成。耐高压(35~40MPA),进样量准确,重复性好(0.5%),操作方便。六通阀进样方式有部分装液法和完全装液法两种。①用部分装

高效液相色谱法特点

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:  ①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱医学教育|网,必须对载液加高压。  ②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。  ③高效

高效液相色谱法依据

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。一、特点:1.

高效液相色谱法词汇

  高效液相色谱法:high performance liquid chromatography,HPLC   高速液相色谱法:high speed LC,HSLC   高压液相色谱法:high pressure LC,HPLC   高分辨液相色谱法:high resolution LC

高效液相色谱法(三)

三、色谱柱色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度 快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为 3,5,7,10U

高效液相色谱法(四)

四、检测器HPLC的检测器分为两类:通用型检测器和专用型检测器。1.通用型检测器可连续测量 色谱柱的流出物的全部特性变化,通常采用差分测量法,这类检测器包括示差折光检测器、介电常数检测器、电导检测器等,通用检测器适用范围广,但由于对流动 相有响应,因此易受温度变化、流动相和组分的变化的影响,

手性高效液相色谱法

手性高效液相色谱法分为直接法和间接法。对映体(enantiomer):在空间上不能重叠,互为镜像关系的立体异构体。立体异构体指分子中的结构基团在空间三维排列不同的化合物。手性药物(chiral,drug):含有手性中心的药物。手性中心即为化合物中某个碳原子上连接4个互不相同的基团时,称该碳原子被称为

高效液相色谱法概述

  高效液相色谱法(highperformanc,liquidchromatography,HPLC)是在经典液相色谱法基础上发展起来的一种新型分离、分析技术。经典液相色谱法由于使用粗颗粒的固定相,填充不均匀,依靠重力使流动相流动,因此分析速度慢,分离效率低。新型高效的固定相、高压输液泵、梯度洗脱技

高效液相色谱法分类

高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1. 液固色谱法使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附——解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5

高效液相色谱法简介

以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱,经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。由于高效液相色

如何使用高效液相色谱法测蔬菜中农药残留

农残用GC,GC-MS或者LC-MS更好 很多农残没有紫外吸收或者荧光效应