液相色谱仪的高效液相色谱法的相关介绍
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等;液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到新的发展。......阅读全文
液相色谱仪的高效液相色谱法的相关介绍
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体
高效液相色谱法正反色谱的相关介绍
正相色谱法 采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。 反相色谱法 一般用非极性固定相(如
谷胱甘肽的高效液相色谱法测量相关介绍
原理:高效液相色谱法是由于溶质在同定相和流动相之间的分配系数、亲和力、分子大小、吸附能力等不同,而进行连续分离的过程。 操作步骤: ①色谱条件 色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。 流动相:磷酸二氢钠和辛烷磺酸钠混合溶液(磷酸二氢钠3.0 g、
高效液相色谱仪的应用相关介绍
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复
高效液相色谱仪的过滤相关介绍
任何颗粒物进入HPLC系统后都会在柱子入口端被筛板挡住,zui后的结果是将柱子堵塞,表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此,要采取各种预防措施,包括操作步骤和商品仪器自身的各种过滤设计,努力防止或减少颗粒物进入HPLC系统中,从而延长仪器和色谱柱的使用寿命,并提高数据的可靠性。在HPLC
高效液相色谱法的相关叙述
高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项高效、快速的分析分离技术,是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定
高效液相色谱仪的流动相相关介绍
如果流动相均由高效液相色谱级溶剂组成,流动相没有必要过滤。这是因为高效液相色谱级的有机溶剂,例如乙腈、甲醇等,在制造的工艺过程中都已经过了0.2 µm微孔滤膜过滤。同样的,无论你是买的HPLC级的水还是在实验室使用超纯水净化系统制备的水,zui后一步也是通过0.2 µm微孔滤膜。然而,如果有任何
高效液相色谱法概念及高效液相色谱仪组成
高效液相色谱法概念: 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography\HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单
高效液相色谱法相关词汇峰高
峰高(peak height,h)—峰的最高点至峰底的距离。
高效液相色谱法相关词汇漂移
漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
高效液相色谱法相关词汇基线
基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
高效液相色谱法相关词汇噪音
噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
高效液相色谱法相关词汇峰底
峰底—基线上峰的起点至终点的距离。
高效液相色谱法相关词汇峰宽
峰宽(peak width,W)—峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ
高效液相色谱法相关词汇峰面积
峰面积(peak area,A)—峰与峰底所包围的面积。
高效液相色谱法相关词汇色谱图
色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。
高效液相色谱法相关词汇分离度
分离度(resolution,R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。
高效液相色谱法相关词汇保留时间
保留时间(retention time,tR)——从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。
高效液相色谱法相关词汇色谱峰
色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。
高效液相色谱法相关词汇拖尾因子
拖尾因子(tailing factor,T)——T=,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。
高效液相色谱法检测苯并芘的介绍
高效液相色谱法是目前应用范围最广的色谱分析法,首先选取合适的液体作为流动相,采用高压输液系统,将流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离,再进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。目前,我国检测动植物油中苯并芘主要采用GB/T 22509-2008(3)中规定的反相高效液相色谱法,但该
关于离子高效液相色谱法的介绍
用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器,为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰,设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。 以阴离子交换树脂(R-OH)作固定相,分离阴离子(如Br-)为例。当待测阴离子Br-随流动相(NaO
关于高效液相色谱法的发展介绍
高效液相色谱法是用微细颗粒得到高效分离的办法,也已用于薄层层析。使用5~10微米的吸附剂制板,可得较好的分离效果,为与一般的薄层层析法相区别,称为高效薄层层析。其优点是样品量少(只需纳克量样品)、展开距离小、展开时间短,是薄层层析法的一个重要发展。
谷胱苷肽的高效液相色谱法检测介绍
原理:高效液相色谱法是由于溶质在同定相和流动相之间的分配系数、亲和力、分子大小、吸附能力等不同,而进行连续分离的过程。 操作步骤: ①色谱条件 色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm) 。 流动相:磷酸二氢钠和辛烷磺酸钠混合溶液(磷酸二氢钠3.0 g
泼尼松的测定—高效液相色谱法介绍
方法名称泼尼松的测定—高效液相色谱法应用范围该方法采用高效液相色谱法测定泼尼松的含量。该方法适用泼尼松。方法原理供试品和内标均制成甲醇溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长254nm处检测泼尼松(C21H26O5)和内标乙酰苯胺的吸收值,计算出其含量。试剂1、甲醇2、水3、四
高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
高效液相色谱仪的外标法和内标法的相关介绍
1、外标法 外标法是指添加一定量的标准品于空白样品中制成对照样品,与未知检测样品平行进行样品处理并检测,根据对照品响应值与标准品的浓度函数关系计算出未知检测样品中被测组分浓度的定量方法。 2、内标法 内标法指的是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被测样品混合物中,然后对含有内标物的样
高效液相色谱仪的液相色谱法检测黄曲霉素
液相色谱法(HPLC) HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。 该法能准
高效液相色谱法相关词汇半峰宽
半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)—峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ
关于高效液相色谱法的实例说明介绍
高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75%~80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色