蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍

此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算MT浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)。 RIA法首先由Mallie等在1979年检测大鼠血清中MT的含量时建立的,随后Mulder等建立了测定人体液中MT含量的RIA,Zahir Shaidh A等报道了用RIA检测镉污染地区人群的尿液MT含量。此方法的检测范围在0.1~100ng/ml之间,但是此方法要用放射性同位素,需要3天左右的时间,给检测带来不便。 1986年Thomas等建立了ELISA法,与RIA法无显著差异,灵敏度可达100pg/ml,与RIA相比具有测定相对迅速,且不需昂贵的仪器设备和接触放射性同位素。Akintola等在1995年利用MT-1制备抗体......阅读全文

薄层分析法检测黄曲霉毒素的介绍

  TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的

薄层分析法检测黄曲霉毒素的介绍

  薄层分析法法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复

电分析法检测青蒿素的基本介绍

  电化学分析是一种利用物质的电学和电化学性质来进行检测的一种方法,其灵敏度及准确度都很高,所需设备简单且易于实现自动化的微型化。  杨培慧等研究了青蒿素在不同电极上的电化学行为,发现于20%乙醇的Britton-Rob-inson缓冲溶液(pH=7.2)中,青蒿素在银电极与玻碳电极上分别有一还原峰

关于免疫功能检测法—数量的检测介绍

  免疫细胞数量变化的原因、表现部位及细胞的特性数量原因表现部位细胞特征增加对内外各种刺激的反应性增生主要表现在血液,其次是淋巴结或脾等周围免疫器官主要是成熟的免疫细胞肿瘤性增生,如白血病、骨髓瘤、淋巴肉瘤主要表现在骨髓或淋巴结,其次在血液、脾及其他器官主要是未成熟细胞,部分为成熟细胞减少细胞丢失和

免疫检测法检测可卡因的特点介绍

  免疫检测法(mimunoassay)具有操作简便、高效、灵敏、特异、适合大规模检测等优点,但要采用这种,必须获得具有抗原活性的可卡因全抗原。通常分子量低于1000的物质不具有免疫原性,进入机体不能产生抗体,必须与载体蛋白偶联形成全抗原,方能具有免疫原性。载体蛋白中含有的活性基团主要有羧基、氨基、

关于放射免疫分析法的基本信息介绍

  1960年美国化学家R.S.耶洛和S.A.贝尔森提出此法,耶洛因此于1977年获得诺贝尔生理学或医学奖。  她从小酷爱自然科学。在大学里,她热衷于物理学,却致力於医学研究,她工作於纽约市布隆克斯区退伍军人医院,致力于「胜太荷尔蒙的放射免疫分析」。居里夫人自传和核子物理学家美籍意大利人费米的讲演,

库伦分析法介绍

  库仑分析法创立于1940年左右,其理论基础就是法拉第电解定律。库仑分析法是对试样溶液进行电解,但它不需要称量电极上析出物的质量,而是通过测量电解过程中所消耗的电量,由法拉第电解定律计算出分析结果。为此,在库仑分析中,必须保证:电极反应专一,电流效率100%,否则,不能应用此定律。以测量电解过程中

关于金属硫蛋白的克隆及检测介绍

  随着分子生物学技术的快速发展,使MT克隆技术、RNA印迹技术和PCR技术应用于MT的定量检测成为现实。金属硫蛋白克隆检测是通过MT多克隆和单克隆抗体,运用免疫扩散、免疫电泳等方法来检测组织中的MT-mRNA含量进行定量分析,这在MT分子的生物学研究中有很重要的意义。  金属硫蛋白多采用联机检测,

放射免疫分析法的优缺点

  RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结

放射免疫分析法的优缺点

  RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结

时间分辨荧光免疫分析法的主要应用

1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。2.病毒性肝炎标志物。3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)。4.药物。5.多肽类。

免疫分析法的基本特点是什么

1)在实验药物动力学和临床药物学中测定生物利用度和药物代谢动力学参数等生物药剂学中的重要数据,以便了解药物在体内的吸收、分解、代谢和排泄情况;(2)在药物的临床检测中,对治疗指数小、超过安全剂量易发生严重不良反应或最佳治疗浓度和毒性反应浓度有交叉的药物血液浓度进行监测;(3)在药物生产中从发酵液或细

关于放射免疫分析法的展望

  在本法的基础上,近年来又发展了其他免疫分析法,用其他有特殊性质的物质代替放射性同位素来标记抗原,同样利用标记与未标记抗原与抗体的竞争性结合,然后用适宜方法测定。其中研究较多的是荧光免疫分析,采用荧光化合物标记抗原,结合分离后通过荧光值的测定进行定量分析。

放射免疫分析法的优缺点

RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果等

放射免疫分析法的优缺点

RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果等

放射免疫分析法的测定方法

分别在一定数量的试管中加入不同浓度的标准抗原(或未知样品),每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后,选用适当的方法将B和F分离,测量放射性强度,由放射性强度比B/T对Ag量制出标准曲线,即可从标准曲线上查出未知样品量。测定时,首先要制备出纯的抗原和抗体。凡能刺

时间分辨荧光免疫分析法的分析原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱

放射免疫分析法的优缺点

RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果等

放射免疫分析法的建立2

(3)分离B与F:每管加入2%加膜活性炭溶液300μl,摇匀,立即离心,去上清,测沉淀(F)的CPM数。 (二)顺序饱和加样程序 1、基本原理 先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B

放射免疫分析法的测定方法

  分别在一定数量的试管中加入不同浓度的标准抗原(或未知样品),每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后,选用适当的方法将B和F分离,测量放射性强度,由放射性强度比B/T对Ag量制出标准曲线,即可从标准曲线上查出未知样品量。  测定时,首先要制备出纯的抗原和抗体

放射免疫分析法的建立1

一、放射免疫分析的基本试剂(一)标准品标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准

Maintrac分析法检测肿瘤细胞

化疗效果是癌症治疗过程中关键所在,也是令患者和医生都感到困惑的问题。本文介绍了一种创新的Maintrac分析法,能在早期治疗中帮助医生选择适合的个性化治疗方案,以期达到更好的疗效。 德国癌症病患的数量每年都在不断增加,根据罗伯特科赫研究所数据显示:每年约有高达450000人罹患癌症。对患者

光谱分析法检测青蒿素的介绍

  青蒿素仅在紫外区203nm处有极弱的末端吸收,不能直接采用紫外分光光度法(UV法)检测。因此需要将青蒿素通过碱或酸溶液进行衍生后才能产生具有紫外吸收的化合物(α、β-不饱和酮酸盐),在波长292nm或260nm处进行紫外检测。UV、高效液相色谱紫外检测法(HPLC-UV)都是基于以上原理。这类方

化学发光标记免疫分析法

   化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光

放射免疫分析法未来展望

  在本法的基础上,近年来又发展了其他免疫分析法,用其他有特殊性质的物质代替放射性同位素来标记抗原,同样利用标记与未标记抗原与抗体的竞争性结合,然后用适宜方法测定。其中研究较多的是荧光免疫分析,采用荧光化合物标记抗原,结合分离后通过荧光值的测定进行定量分析。

化学发光标记免疫分析法

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发

化学发光免疫分析法优势浅谈

众所周知,国内IVD市场对免疫类检测需求量日益增大,各类免疫检测类产品层出不穷,化学发光作为一种检测结果较为准确的方法学,已逐渐替代ELISA免疫检测。化学发光免疫分析法(CLIA)是近三十年来迅速发展起来的非放射性免疫分析方法,是继酶免技术(EIA)、放射免疫技术(RIA)和荧光免疫技术(FIA)

免疫层析法检测原理分类介绍

双抗体夹心•以 hCG试剂为例金标为鼠源性抗β-hCG单克隆抗体与胶体金的复合物,测试线包被羊抗α-hCG多克隆抗体,控制线包被羊抗鼠多克隆抗体。妇女受孕的“指示剂” hCG是一种肽,包含一条和FSH(促卵泡成熟激素),FLH 具有同源性的α链和一条高度特异的β链。当待测尿液或血清中含有一定量的hC

仪器分析法的基本介绍

  仪器分析是化学学科的一个重要分支,它是以物质的物理和物理化学性质为基础建立起来的一种分析方法。利用较特殊的仪器,对物质进行定性分析,定量分析,形态分析。 仪器分析方法所包括的分析方法很多,有数十种之多。每一种分析方法所依据的原理不同,所测量的物理量不同,操作过程及应用情况也不同。

差示分析法的介绍

以往研究基因表达差异的方法主要有: 蛋白质双向电泳、cDNA 减法杂交和mRNA 差示技术( 简称DD2PCR )。蛋白质双向电泳只能粗略地比较两种细胞内产生的蛋白质, 不能直接从基因水平分析鉴定, 因而很难推广; cDNA 减法杂交需建立cDNA 文库, 通过两次杂交分离去除双链分子, 再将余下的