蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍

此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算MT浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)。 RIA法首先由Mallie等在1979年检测大鼠血清中MT的含量时建立的,随后Mulder等建立了测定人体液中MT含量的RIA,Zahir Shaidh A等报道了用RIA检测镉污染地区人群的尿液MT含量。此方法的检测范围在0.1~100ng/ml之间,但是此方法要用放射性同位素,需要3天左右的时间,给检测带来不便。 1986年Thomas等建立了ELISA法,与RIA法无显著差异,灵敏度可达100pg/ml,与RIA相比具有测定相对迅速,且不需昂贵的仪器设备和接触放射性同位素。Akintola等在1995年利用MT-1制备抗体......阅读全文

荧光分析法的方法介绍

直接测定法利用物质自身发射的荧光进行测定分析 。间接测定法不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标准工作曲线上查

荧光分析法的特点介绍

荧光分析是一种先进的分析方法,它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及,这同荧光分析具有很多优点分不开的。荧光分析所用的设备较简单,如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍,而且荧光分析的最大特点是:分析灵敏度高

酶活性分析法检定蛋白质的方法步骤

表现出來的酶GUS可以水解其基质衍生物pNPG,所产生的黄色生成物p-nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986);仪器用具:ELISA光度计 (Dynatech);微量滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 4424

蛋白质定量实验_碱性铜还原分析法

试剂、试剂盒Folin-Ciocalteu 试剂硫酸铜试剂碱性铜试剂实验步骤碱性铜还原分析法 (Lowry 法)(Lowryetal.,1951) 和其他能够增强检测性能的方法都是基于一个包括两个步骤的过程。首先,双缩脲反应涉及蛋白质在碱性溶液环境中将铜还原(由Cu2+到 Cu+); 随后是反应增强

免疫学实验体液免疫检测法介绍

  体液免疫检测法介绍:   体液免疫检测法是检测体液免疫功能的技术。分为体外检测和体内检测。体外体液免疫检测法包括抗原抗体反应、体液中各种可溶性免疫因素测定,体内检测为体液免疫测定技术。   体液免疫检测法正常值:   呈阴性结果。   体液免疫检测法临床意义:   异常结果:免疫球蛋白

痕量分析法极谱法的介绍

  采用电化学分析法进行痕量元素测定,除用悬汞电极溶出伏安法测定 Cu、Pb、Cd、Zn、S等元素外,近年来发展了玻璃碳电极镀金膜溶出伏安法测定某些重金属元素。另外用金(或金膜)电极测定As、Se、Te、Hg等元素。膜溶出伏安法可进行阳极溶出,也可进行阴极溶出,测定下限可达1~10ng,将溶出伏安法

电化学法检测金属硫蛋白的介绍

  此方法主要是利用巯基(-SH)在汞滴表面产生氧化还原出现的电位变化建立的,以测定巯基来计算MT的含量,是一种可以直接用于测定MT总量的方法,具有一定的特异性。其检测限可达ng/ml水平。  运用检测MT的电化学方法有:示差脉冲极谱法(DPP)、微分脉冲极谱法、示差脉冲阳极溶出伏安法(DPASV)

概述放射免疫分析法的测定方法

  分别在一定数量的试管中加入不同浓度的标准抗原(或未知样品),每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后,选用适当的方法将B和F分离,测量放射性强度,由放射性强度比B/T对Ag量制出标准曲线,即可从标准曲线上查出未知样品量。  测定时,首先要制备出纯的抗原和抗体

简述放射免疫分析法的优缺点

  RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结

放射免疫检测法检测蓖麻毒素的介绍

  随着生物标记技术的进一步发展,研究者成功建立了放射免疫检测方法。该方法主要是利用抗原-抗体特异性结合而进行体外超微量蓖麻毒素检测,具有高度灵敏性、精确性的特点。放射免疫方法可检测出样品中100pg数量级的蓖麻毒素,适用于对蓖麻毒素中毒者血液中蓖麻毒素含量的检测。但该方法的缺点是操作处理比较繁琐,

化学发光免疫分析法具有的优势

免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段,由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示,因此常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。化学发光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶联免疫分析(enzymeimm unoassa

酶联免疫电泳转移分析法

该法是分析蛋白质的一种新方法,由southern blot衍化而来,后者是由Southern E.M. 所创建,即将在琼脂糖凝胶中电泳后的DNA,原位吸附于硝酸纤维素膜上,再用放射性同位素如32P等标记的单链RNA或DNA探针,与板上的核酸分子杂交,从而达到分析DNA中基因位置和顺序的目的。以后

滴定分析法分类介绍碘量法

碘量法碘量法是以I2的氧化性和I-的还原性为基础的氧化还原滴定法。碘量法分为直接碘量法和间接碘量法。(1)直接碘量法    直接碘量法也称碘滴定法。它是利用I2的氧化性直接滴定一些还原性较强的物质,如和维生素C等。由于I2的氧化性较弱,所以直接碘量法不如间接碘量法应用广泛。(2)间接碘量法    间

电分析法检测青蒿素

电化学分析是一种利用物质的电学和电化学性质来进行检测的一种方法,其灵敏度及准确度都很高,所需设备简单且易于实现自动化的微型化。杨培慧等研究了青蒿素在不同电极上的电化学行为,发现于20%乙醇的Britton-Rob-inson缓冲溶液(pH=7.2)中,青蒿素在银电极与玻碳电极上分别有一还原峰,并利用

关于库仑分析法的相关介绍

  库仑分析法创立于1940年左右,其理论基础就是法拉第电解定律。库仑分析法是对试样溶液进行电解,但它不需要称量电极上析出物的质量,而是通过测量电解过程中所消耗的电量,由法拉第电解定律计算出分析结果。为此,在库仑分析中,必须保证:电极反应专一,电流效率100%,否则,不能应用此定律。以测量电解过程中

关于荧光分析法的特点介绍

  荧光分析是一种先进的分析方法,它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及,这同荧光分析具有很多优点分不开的。荧光分析所用的设备较简单,如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍,而且荧光分析的最大特点是:分析灵敏

质谱分析法的应用介绍

质谱法特别是它与色谱仪及计算机联用的方法,已广泛应用在有机化学、生化、药物代谢、临床、毒物学、农药测定、环境保护、石油化学、地球化学、食品化学、植物化学、宇宙化学和国防化学等领域。用质谱计作多离子检测,可用于定性分析,例如,在药理生物学研究中能以药物及其代谢产物在气相色谱图上的保留时间和相应质量碎片

质谱分析法的仪器介绍

  质谱仪种类非常多,工作原理和应用范围也有很大的不同。从应用角度,质谱仪可以分为下面几类:  有机质谱仪:由于应用特点不同又分为:  ①气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)  在这类仪器中,由于质谱仪工作原理不同,又有气相色谱-四极质谱仪,气相色谱 -飞行时间质谱仪,气相色谱-离子阱质谱仪等。  ②

电位分析法的电极电位介绍

  金属插入溶液后,金属中的原子有失去电子以离子的性质离开金属表面进入溶液的倾向,这是金属的溶解;溶液中的金属离子也有在金属表面得到电子进入金属的倾向,这是金属离子的沉积。当金属的溶解于金属离子的沉积达到动态平衡时,在电极与溶液的接触界面上产生了电位差,这个电位差称作电极电位。这是金属电极的电极电位

关于滴定分析法的概念介绍

   滴定分析法又叫容量分析法,将已知准确浓度的标准溶液,滴加到被测溶液中(或者将陵 被测溶液滴加到标准溶液中),直到所加的标准溶液与被测物质按化学计量关系定量反应为止,然后测量标准溶液消耗的体积,根据标准溶液的浓度和所消耗的体积,算出待测物质的含量。这种定量分析的方法称为滴定分析法,它是一种简便、

重量分析法的相关介绍

  定量分析中的一种经典方法。18世纪中叶,罗蒙诺索夫首先使用天平称量法,对物质在化学变化中量的改变进行了测定,并证明了质量守恒定律,实际上为定量分析中的重量分析法奠定了基础。重量分析法要求有精密的分析天平,19世纪分析天平称量准确度达 0.1毫克;20世纪出现了微量分析天平和超微量,称重的准确度分

关于电位分析法的分类介绍

  电位分析法  用一个指示电极和一个参比电极,或者采用两个指示电极,与试液组成电池,然后根据电池的电动势的变化或指示电极电位的变化进行分析的方法,称为电位分析法。  库仑分析法  测定电解过程中所消耗的电量,按法拉第定律求出待测物质含量的分析方法称作库仑分析法。库仑分析法还可分为控制电位库仑分析法

简述库仑分析法的分类介绍

  根据电解方式分为控制电位库仑分析法和恒电流库仑滴定法。  ①控制电位库仑分析法。在电解过程中,将工作电极电位调节到一个所需要的数值并保持恒定,直到电解电流降到零,由库仑计记录电解过程所消耗的电量,由此计算出被测物质的含量。  ②恒电流库仑滴定法,简称库仑滴定法。用恒电流电解在溶液中产生滴定剂(称

关于库仑分析法的应用介绍

  凡能与电解时所产生的试剂迅速反应的物质,均可用库仑滴定法测定,因此,能用容量分析的各类滴定,如酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定和络合滴定等测定的物质,均可用于库仑滴定法。  1.酸碱滴定  阳极反应:H2O = 1/2O2+2H +2e  阴极反应:2H2O =H2 +2OH -2e  2.沉淀

光谱分析法的介绍

光谱分析法是利用光谱学的原理和实验方法以确定物质的结构和化学成分的分析方法。英文为spectral analysis或spectrum analysis。各种结构的物质都具有自己的特征光谱,光谱分析法就是利用特征光谱研究物质结构或测定化学成分的方法。

关于电导分析法的介绍

  以测量待测溶液的电导为基础的分析方法。电导是电阻的倒数, 测电导实质就是测电阻。电导分析也可以说是通过测量两电极间溶液的电阻来确定离子含量的方法。  由于溶液的电导并不是某一种离子的特征参数,而是溶液中所有离子的共同贡献,因此电导分析法的选择性很差, 使它的应用受到很大限制。

关于库仑分析法的特点介绍

  库仑分析法要求工作电极上没有其他的电极反应发生,电流效率必须达到百分之一百。  库仑分析法的优点是:  ①灵敏度高,准确度好。测定10-10~10-12摩/升的物质,误差约为1%。  ②不需要标准物质和配制标准溶液,可以用作标定的基准分析方法  ③对一些易挥发不稳定的物质如卤素、Cu(Ⅰ)、Ti

比色分析法的应用特点介绍

  比色分析具有简单、快速、灵敏度高等特点,广泛应用于微量组分的测定。通常测定含量在10-1~10-4mg/L的痕量组分。比色分析如同其他仪器分析一样,也具有相对误差较大(一般为1%~5%)的缺点。但对于微量组分测定来讲,由于绝对误差很小,测定结果也是令人满意的。在现代仪器分析中,60%左右采用或部

蛋白质定量实验_考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法

实验方法原理蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基,其化学结构中的共轭双键,具有吸收紫外光的特性,吸收高峰在280 nm处,蛋白质溶液的吸光度(A280)与蛋白质含量成正比关系,可作为样品中蛋白质定量测定。该方法简便、灵敏、快速,且样品用量少且可回收,低浓度的盐类也不干扰测定,但测定

全面介绍有机元素分析法

有机元素分析仪应用越来越广泛主要功能是用于有机化合物,高分子材料,药物,石油产品等材料中C、N、H、S、O质量百分含量的测定。首先,什么是有机元素?有机物中常见的元素有碳(C)、氢(H)、氧(O)、氮(N)、硫(S)等。1912年,Pregl 应用德国的Kuhl-mann制出的微量天平建立了碳氢元素